一种用于在小鼠中诱导横主动脉缩窄的闭胸模型

本实验的总体目标是在小鼠闭胸模型中进行横主动脉缩窄，以诱导左心室心肌肥厚。这种微创技术有助于减少呼吸系统并发症，并最大限度地降低炎症反应。该方法可帮助我们回答免疫学领域中的一些关键问题，例如心脏巨噬细胞在左心室肥厚发展过程中的反应。

该技术的主要优势在于，肋骨保持完整，因此创伤被降至最低。由于空间和潮气量根据体重进行调整，该方案可用于不同体型的小鼠。此外，该方法还能减少手术创伤，并降低测量值的偏差。

根据文本方案，在麻醉小鼠后，将其转移至温度可控的手术台，并断开连接麻醉诱导箱的鼻罩以维持麻醉状态。使用尼龙缝合线固定小鼠的上门齿。轻捏尾巴以确认反射消失。

使用胶带固定四肢。插入直肠探头后，根据制造商说明将脱毛膏涂抹于咽喉部和上胸部，静置一分钟。随后擦去脱毛膏，必要时可重复操作。

将呼吸机参数调整至生理水平，并在手术显微镜下操作，于下颌骨下方约三毫米处沿中线切开皮肤，向下延伸至第二肋。辨认下颌下腺的中线及结缔组织。然后使用两把弯头镊子轻柔地钝性分离下颌下腺的中线部位，暴露气管周围肌肉组织。

用钝性分离法轻轻分开气管旁肌肉，以暴露气管。用镊子牵拉舌头以伸直咽喉，便于插管，并将气管插管导管轻柔地插入气管内。通过直接观察导管是否位于气管内，以及检查胸部是否有适当的起伏运动，来确认插管成功。

使用镊子轻轻分离气管旁的结缔组织，暴露两侧颈动脉。在20赫兹多普勒探头尖端涂抹超声耦合剂，将探头尖端以小于45度的角度置于右侧和左侧颈动脉上。缓慢旋转探头，向内外侧移动以寻找多普勒信号，然后倾斜探头以优化信号。

使用一副新的无菌手套和剪刀，将皮肤切口向下扩展至第二肋间隙。然后用镊子尖端打开第二肋间隙，并插入拉钩。在200%放大倍数下，辨认中线及结缔组织。

然后，使用弯头镊子轻轻分离胸腺。去除脂肪组织，直至能清晰看到主动脉弓。用弯头持针镊在横主动脉下方、头臂动脉与左颈总动脉之间，制备一个隧道。

然后，使用精细镊子夹住6-0缝线，将缝线从主动脉弓下方穿过。用第二把镊子从弓的另一侧接过缝线。小心地将间隔物平行放置于横位主动脉处。

在垫片上打一个松散的双结，并确保垫片与主动脉平行且位置最佳。然后打第一个结，迅速打第二个反向结，随后立即移除垫片。整个操作中最关键的步骤是迅速而牢固地打好两个结，并立即取出垫片。

用6-0聚丙烯缝线闭合第二肋间间隙，并在结扎时特别注意锁骨下血管。然后使用6-0聚丙烯缝线，以连续缝合方式缝合皮肤。确认结扎无误后，按照文本方案进行术后护理。

这些多普勒血流速度测量结果验证了TAC手术的成功：由于左心室和主动脉压力升高，右侧颈动脉血流速度增加，而左侧颈动脉在狭窄后出现血流速度减弱。如本图所示，与未手术小鼠相比，TAC小鼠在术后第6天心脏重量与体重的比值显著升高。该比值在术后21天后趋于稳定。

心率对左心室收缩力和心输出量具有显著影响。该图显示，在术后21天，主动脉缩窄小鼠与非主动脉缩窄小鼠的心率无差异。如图所示，通过左心室导管在术后21天测得的收缩压升高，证实了主动脉存在持续性缩窄。

C57 black six 小鼠在进行 TAC 手术后通常会出现伴有收缩功能障碍的离心性肥厚。发现左心室直径增大，在压力-容积测量中也显示出显著差异。因此，收缩末期和舒张末期容积均显著增加。

一旦掌握，该技术若操作得当，可在10分钟内完成。最后，该方案通过最大程度减少手术创伤，限制了免疫系统的非特异性激活，从而实现了对左心室肥厚中免疫反应的优化分析。观看本视频后，您应能够充分理解如何进行标准化的微创横位主动脉缩窄手术。