在糖尿病小鼠中创建慢性伤口的协议

这种小鼠模型可以帮助回答伤口慢性医学领域的问题。这个模型的主要优点是，小鼠的慢性伤口模仿人类慢性伤口的许多方面。首先，将鼠标放在干净的表面上，然后通过捏住其尾部的底座将其固定到位。

然后准备剪发器，并准备快速拉开它们，如果鼠标做任何突然的动作。剃整个背部从脖子到尾巴，包括所有在尾巴周围。轻轻运行刀片对头发生长的方向，以最有效的切割。

不要将剪子压入皮肤深处，因为这可能擦伤或割伤。接下来，为应用脱毛化妆水。用水浸纸巾润湿皮肤，防止化学灼伤。

轻轻按压，用足够的压力将剪下来的头发弄湿在皮肤上。然后，当皮肤湿润时，将一小块脱毛化妆水到剃光区域 15 到 20 秒。应用后，让化妆水皮肤反应20至45秒。

在冲洗化妆水之前，轻轻擦去化妆水位置的一些检查反应。如果皮肤是粉红色和无毛的，反应是完整的。然后，抓住鼠标洗掉它。

用非多管用的手用拇指向下按其尾巴的底座对手掌，并关闭其他手指。然后用老鼠的鼻子向上和远离水，让水流过动物的背部。然后迅速，但轻轻地，用另一只手揉鼠标的背面，洗去化妆水。

取出所有脱毛霜后，用纸巾擦干皮肤。重要的是不要将化妆水应用于耳朵、尾巴或脸部附近的任何地方。如果发生这种情况，请立即用湿毛巾化妆水擦拭，然后将水流过鼠标，以防止损坏这些区域。

如果使用奶油后发现任何深色斑块，请将面霜重新应用到这些区域。在整个实验过程中，皮肤的深色斑块会长得更快。因此，必要时每三到五天剪一次头发。

一两个不在伤口场的补丁是可以接受的，但如果鼠标的背面有更多的暗斑，不要使用它作为慢性伤口模型。去除头发后，将鼠标单独放在一天内，然后受伤，因为皮肤会太敏感，从脱毛化妆水。手术前30分钟，在无菌PBS中注射120微升丁丙诺啡。

此过程的所有卷都假定为 60 克鼠标。手术前20分钟，在无菌PBS中用480微升的 ATZ 微升注射。分割腹部两侧的体积。

管理 ATZ 后，将鼠标放在加热垫顶部的小塑料容器中，直到手术开始。用纸巾盖住小容器，以帮助控制热量。老鼠在温暖时应该冷静下来。

确认麻醉状态后，继续受伤。要开始伤害程序，用 70% 乙醇喷洒化学擦拭，以擦拭鼠标的背部以清洁伤口位点和皮肤表面。不要过度擦拭，否则会有杀死皮肤上存在的细菌的风险。

慢性伤口模型的成功依赖于非无菌条件。这些老鼠不是无细菌的，它们被安置在传统的维他体内。存在于皮肤上的细菌微生物群对于在抗氧化酶抑制剂治疗后开始和发育慢性伤口至关重要。

现在想想伤口的位置。理想情况下，使用鼠标的后侧居中，远离皮肤的暗斑。现在，在 30 到 45 秒内执行修整程序。

首先轻轻按压七毫米皮肤活检冲孔到所需的伤口位点，并扭转冲孔周围只是足够深，留下的印象是冲孔。然后，用钳子拉起冲孔的中心，用手术剪刀沿着轮廓切割，以切除轮廓的皮肤。完成后，用半块透明薄膜敷料牢牢盖住伤口。

在受伤后10分钟内，在无菌PBS中涂抹60微升的MSA等分，将 MSA 顶点沉积在伤口上。手术后6小时后，再给丁丙诺啡施用。可根据需要给予额外的剂量。

慢性伤口启动发生在不到六个小时，伤口边缘明显改变从氧化应激。慢性伤口是保持开放的伤口，与最初的伤口相比扩大，并含有生物膜。20天后，伤口完全慢性。

控制伤口地点的生物膜形成细菌包括伪多莫纳斯白化病、肠杆菌以及各种葡萄球菌和皮质细菌。这些细菌也存在于人类慢性伤口中。看完这段视频后，你应该对如何在小鼠中制造慢性伤口有一个很好的理解。

一旦你建立了这些慢性伤口，然后你可以使用它们来调查许多细胞分子机制涉及启动伤口慢性。