利用硅橡胶灌注化合物进行二维X射线血管造影以观察精细血管结构

该方法有助于解答重建外科领域中关于如何实施穿支皮瓣提拉手术的关键问题。该技术的主要优势在于，可在不同血管皮瓣条件下轻松观察细小血管结构（如吻合支血管）的变化。为建立皮瓣模型，需确认麻醉后的7周龄雄性Sprague-Dawley大鼠（体重200至250克）已达到适当的镇静水平，即对足趾夹捏无反应，随后从下腹部至背部标记一个4厘米×12厘米的环形皮瓣设计。

以皮瓣中心位于剑突与阴茎中点处为准。使用手术刀沿标记切开，并用剪刀解剖皮瓣，包括皮肤和肉膜筋膜。在下腹部周围解剖血管蒂，并使用显微镜或手术放大镜暴露血管组织。

结扎血管，并沿背侧正中线切开皮瓣。然后将皮瓣复位，并使用皮肤缝合器固定。制作具有明确血管分布区域的皮瓣非常重要，以便根据实验方案的需要，方便地对皮瓣的血管状况进行调整。

在手术当天，于肩胛骨之间做一条2厘米长的正中皮肤切口，使用蚊式钳和钝头剪刀暴露唾液腺复合体。沿肩胛舌骨肌纵向解剖后，分离颈总动脉周围组织，并用黑色丝线将动脉的头端和尾端牵开。在近端缝线上打结并保持牵拉，以维持动脉充盈状态，同时将尾端缝线 loosely 放置。

将24号导管插入已准备好的动脉中，并用尾侧缝线固定导管。将一个三通旋塞连接到导管上，使用空注射器对导管施加负压，确认有血液回流进入导管。随后，向导管内注入25至30毫升新配制的硅橡胶灌注液，直至眼部和足部颜色发生变化。

当所有化合物注入完毕后，关闭三通旋塞阀，使造影剂固化约15分钟。然后在化合物注射器周围放置保护屏障，以避免放射显影剂被污染，并将注射器从旋塞阀上取下。

采集标本时，使用手术刀在肉膜（panniculus carnosus）上距离皮瓣约1厘米处做切口，以避免损伤皮瓣内部的任何血管结构，并在肉膜平面下方围绕皮瓣进行解剖。随后使用剪刀采集包含皮瓣及皮瓣内血管蒂的组织，并用5-0丝线结扎皮瓣的血管蒂，将皮瓣从机体分离。硅橡胶灌注血管造影可清晰显示细微的血管结构，即使在成像条件较差的情况下，也能获得高质量的扩张吻合支静脉的血管造影图像。

例如，在本项代表性实验中可以观察到，所有皮瓣均基于旋髂深动静脉进行切取，随后通过不同位置的动脉进行超供血。若以主要供血血管为标准将整个皮瓣划分为四个区域，则造影剂到达主血管后，会充盈超供血动脉远端的下一个区域。扩张的穿支静脉也可被观察到，尽管其在正常皮肤的血管造影中并不可见。

一旦掌握，若操作得当，每只大鼠可在一小时内完成该技术。在实施该过程时，重要的是要牢记在注射过程中避免污染或溢出血管造影剂。观看本视频后，您应能充分理解如何制作特定条件的皮瓣以及如何进行血管造影。