Name: 大鼠运动皮质微电极植入所致功能缺损的啮齿动物行为检测 (视频) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-08-18T12:30:00.000+00:00
Duration: 10 min 42 s
Description: 学习大鼠运动皮质微电极植入后的行为检测方法，通过旷场网格、爬梯和握力测试评估即时与长期运动功能缺损。该技术为神经工程研究提供实时运动功能测量手段。

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本研究部分得到了美国退伍军人事务部康复研究与发展服务局的功绩评审奖 #B1495-R（Capadona）以及总统科学家与工程师早期职业奖（PECASE，Capadona）的资助。此外，本工作还部分得到了国防部助理部长卫生事务办公室通过同行评审医学研究计划（项目编号：W81XWH-15-1-0608）的支持。本内容不代表美国退伍军人事务部或美国政府的观点。作者谨此感谢凯斯西储大学（CWRU）啮齿类动物行为核心实验室的Dr. Hiroyuki Arakawa在设计和测试啮齿类动物行为实验方案方面提供的指导。作者还感谢凯斯西储大学机械与航空航天工程系的James Drake和Kevin Talbot在啮齿类动物梯子实验装置的设计与制造过程中提供的帮助。

所有实验程序和动物护理操作均经路易斯·斯托克斯克利夫兰退伍军人事务医疗中心机构动物护理和使用委员会批准，并遵循其规定执行。
注意：为了帮助研究人员了解为何选择刺伤损伤模型作为对照，建议参考 Potter et al.21 的相关研究工作。
1. 微电极植入手术操作
<ol>
	<li>术前动物准备
	<ol>
		<li>使用异氟烷（2 - 4%）在诱导室中对动物进行麻醉。在麻醉期间，使用生命体征监测系统持续监测动物的心率和血氧含量。</li>
		<li>将动物转移至鼻罩以维持麻醉。皮下注射头孢类抗生素（例如头孢唑啉，25 mg/kg）和非甾体类抗炎药（例如卡洛芬，5 mg/kg），分别用于预防感染和控制疼痛。</li>
		<li>在动物眼睛上充分涂抹眼用软膏，防止角膜干燥。</li>
		<li>使用小型动物指甲剪修剪脚趾甲，防止动物在伤口愈合期间抓挠缝线。注意不要剪得过短，以免引起疼痛和出血。</li>
		<li>使用电动剃毛器彻底剃除动物从耳后至两眼之间的头部毛发。</li>
		<li>在动物头部切口区域皮下注射布比卡因（0.3 mL 的 0.125% 布比卡因，由原液稀释而成），以提供局部镇痛。</li>
		<li>将动物固定在立体定位仪上，使用耳杆固定头部以防止手术过程中移动。在动物身下放置循环水加热垫，以维持其体温。</li>
		<li>覆盖无菌手术巾，例如经机构批准的无菌塑料膜，以隔离手术区域。</li>
		<li>使用聚维酮碘溶液与异丙醇交替擦拭手术区域进行消毒。</li>
		<li>根据机构规程进行足趾夹捏测试，确认动物处于外科麻醉深度。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>准备动物以进行植入
	<ol>
		<li>使用10号手术刀片沿中线做约1英寸长的切口，暴露颅骨。用棉签钝性剥离骨膜，并用纱布压迫止血。使用鳄嘴钳牵开周围组织，并用过氧化氢清洁和脱水颅骨表面。</li>
		<li>在暴露的颅骨上滴加数滴以氰基丙烯酸酯为基础的组织粘合剂，以增强后续牙科水泥的粘附性。</li>
		<li>在选定的大脑半球上，通过在骨头上做一小切口标记对应前爪运动的运动皮层区域，该位置大约位于中线外侧3 mm、前囟前方2 mm处。</li>
		<li>使用1.75 mm圆头牙科钻去除部分颅骨，操作时特别注意避免钻速过快或过深，并将一只手支撑在立体定位仪上以增加稳定性。应间歇性地使用钻头，防止局部过热31。</li>
		<li>使用精细的45°弯钩硬脑膜剥离针轻轻翻起硬脑膜。</li>
		<li>使用带棉头的棉签和生理盐水清除任何出血，注意避免直接接触脑表面。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>将微电极插入运动皮层
	<ol>
		<li>小心地将已灭菌的微电极安装在立体定位仪的通用夹持器上，注意避免触碰电极柄。确保电极的前置放大器接口连接端被夹持器牢固固定。 
		注：此处使用了一种非功能性的密歇根式硅基电极，尺寸为2 mm × 123 µm × 15 µm，电极柄通过精细镊子插入。</li>
		<li>利用立体定位仪上的微操纵器，小心地将电极尖端定位至开放的颅骨窗上方。</li>
		<li>使用微操纵器作为测量引导，缓慢将电极向下推进约2 mm进入脑组织（根据所选电极类型，可能需要以受控速率进行自动插入）。操作时应尽可能避开可见的血管。电极到位后，小心松开夹持器中的连接端，并撤回插入臂。</li>
		<li>使用带棉头的棉签和生理盐水小心清除电极周围的出血。</li>
		<li>使用硅胶弹性体封闭植入电极周围的颅骨开窗区域。</li>
		<li>使用牙科水泥将电极固定在颅骨上。</li>
		<li>待水泥完全干燥后，将切口前后两端的边缘拉拢，并用缝线闭合。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>术后护理
	<ol>
		<li>让动物在循环水加热垫上恢复，同时继续监测其生命体征。避免使用加热灯，因为灯光产生的温度较难控制，可能导致动物过热。</li>
		<li>当动物完全清醒后，将其转移至清洁的笼子，并确保其能方便地获取食物和水。</li>
		<li>在术后第1至第3天，每天皮下注射头孢类抗生素（25 mg/kg）和非甾体类抗炎药（5 mg/kg），以预防感染并控制疼痛。</li>
		<li>至少在术后第5天内，每日观察动物是否有疼痛或不适、出血、体重变化或缝线相关问题的迹象。</li>
	</ol>
	</li>
</ol>
2. 行为学测试
<ol>
	<li>所有行为学测试均需在电极植入手术前一周内对动物进行两次测试，以计算其术前基线评分。手术后，让动物休息一周，然后每周进行两次各项测试。整个研究过程中，术前和术后测试应保持一致的测试条件，以尽量减少应激对表现的影响，否则可能测得的是焦虑水平而非运动功能。
	<ol>
		<li>每次测试开始前以及每只动物测试结束后，均须使用基于二氧化氯的消毒剂清洁所有测试设备。</li>
		<li>对开放场地网格测试和梯子行走测试进行录像。这些测试需要配备一台视频摄像机（最低1080p分辨率，帧率至少15 fps，对角线视场角78°）、一台笔记本电脑以及用于存储视频数据的空间。</li>
		<li>每天测试开始前，将动物带入测试房间，并在测试开始前让其适应环境至少20分钟。测试房间应保持光照和温度恒定，且所有测试应由相同的实验人员完成。理想情况下，所有动物在整个测试期间均应在同一房间内进行测试，且房间环境不作任何改变。</li>
		<li>使用食物奖励鼓励动物完成任务，尤其是在梯子行走训练期间。谷物、小块香蕉片或饼干是良好的奖励物。</li>
		<li>将每只动物每周测试的表现标准化为其各自的术前基线评分（公式 1）。 
		公式 1： <img alt="百分比变化公式：\((基线评分 - 每周测试评分) / 基线评分 \times 100\)" src="/files/ftp_upload/57829/57829eq1.jpg" data-altupdatedat="1788250015000" data-alt="Equation 1"></li>
	</ol>
	</li>
	<li>开放场地网格测试 
	注：开放场地网格测试装置为实验室自制，运行表面面积为1 m2，四周设有约40 cm高的不透明侧壁。网格底部运行面从下方用胶带划分为9个相等的方格（图1A）。摄像机永久固定在脚手架上，位于网格正上方中心位置。
	<ol>
		<li>开始开放场地网格测试时，将动物面朝远离实验者的方向放置于网格中央。</li>
		<li>让动物自由奔跑3分钟，同时录制视频。</li>
		<li>动物完成测试后，将其从网格中移出并放回笼中。使用基于二氧化氯的消毒剂彻底清洁网格。</li>
		<li>每只动物每天测试一次。</li>
		<li>使用视频追踪软件分析动物穿过的网格线数量、总移动距离及最大速度，作为粗大运动功能的评估指标。 
		注：本文所展示的数据由经过培训的研究人员手动量化，但推荐使用近期开发的实验室内部追踪算法32。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>梯子行走测试 
	注：梯子行走测试装置为实验室自制，由两块长1 m的透明亚克力侧壁组成，其间以直径3 mm、间距2 cm的横杆连接（图2A）。梯子行走是一项技能型测试，因此在记录术前基线评分前需进行为期一周的训练。训练与正式测试的流程相同。
	<ol>
		<li>开始梯子行走测试前，将动物转移至一个临时的清洁暂养笼中。</li>
		<li>设置梯子，使其连接两个笼子。梯子的起始端置于一个清洁笼子上，终点端置于动物的 home cage 上，以此作为动物完成行走的动力。</li>
		<li>将相同（或类似）型号的摄像机安装在三脚架上，置于梯子正中央。摄像机位置应与横杆高度齐平，并能完整拍摄整个梯子。</li>
		<li>在摄像机开始录制后，手持动物至梯子起始线处，使其前爪接触第一根横杆。</li>
		<li>让动物以自身速度穿越梯子。从动物前爪接触第一根横杆开始，到其到达倒数第三根横杆的终点线为止的时间，即为穿越时间。</li>
		<li>若动物在梯子上转身或在20秒内未移动，则视为本次运行失败。为每次失败的运行赋予惩罚性时间评分。惩罚时间根据术前测试中记录的最慢表现确定27。</li>
		<li>每天让每只动物穿越梯子5次，每次之间休息约1分钟。</li>
		<li>以每天最快3次运行的平均时间为精细运动功能的评估指标。此外，使用视频追踪软件记录每只前爪从横杆上滑脱的次数。 
		注：本文所展示的数据由经过培训的研究人员手动量化，但推荐使用Dona et al.开发的近期实验室内部追踪算法32。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>抓握力测试
	<ol>
		<li>每次测试前校准抓握力测量仪，并以克（g）为单位测量力量。</li>
		<li>将抓握力测量仪放置在实验台边缘，使抓握手柄悬于地面之上。</li>
		<li>握住动物尾根部，使其前爪抓住手柄（图3A）。</li>
		<li>当动物双前爪牢固抓住手柄后，缓慢而稳定地通过尾根部将动物从测量仪方向拉离。</li>
		<li>记录抓握力测量仪数字显示屏上显示的动物最大抓握力值。</li>
		<li>每只动物每天测试3次，每次之间休息约2分钟。</li>
		<li>作为精细运动功能的评估指标，记录并计算3次试验中最大抓握力输出的平均值。</li>
	</ol>
	</li>
</ol>
3. 行为学后实验方案
<ol>
	<li>完成所有行为学测试后（例如在植入后8至16周，使用氯胺酮（160 mg/kg）和赛拉嗪（20 mg/kg）对动物进行深度麻醉，经心脏灌注，取出脑组织并进行冷冻切片，随后利用免疫组织化学标记物对组织染色，以量化植入部位周围的细胞反应33,34,35,36,37,38.</li>
</ol>
4. 统计学分析
注意：对于旨在回答特定研究问题的任何研究，强烈建议进行前瞻性功效分析。功效分析应基于特定的研究假设、实验设计、预期处理效应量和变异性，以及达到临床或科学意义所需的效应量，以确定特定实验设计下获得统计学显著性所需的动物数量。
<ol>
	<li>使用常用统计软件进行统计分析。</li>
	<li>将描述性统计结果制表，并以均值 ± 标准误的形式展示。</li>
	<li>在每个每周时间点分析行为学表现［在开放场地网格（步骤 2.2）、梯子（步骤 2.3）和握力测试（步骤 2.4）中］，以比较对照组 与 采用双样本 t 检验对植入组进行分析。将每个周时间点视为独立的测量值。</li>
	<li>使用混合效应线性模型量化纵向性能。周数和组别为固定因子，实验动物作为随机效应嵌套于组别内。采用方差分析（ANOVA）确定因子效应，显著性水平为 p &lt; 0.05.</li>
	<li>使用线性回归分析比较梯度性能与免疫球蛋白G（IgG）强度的关系。采用Pearson法计算相关系数。</li>
</ol>

作者无任何利益冲突需要披露。

本方案已用于在啮齿类动物脑损伤模型中有效且可重复地评估精细运动和粗大运动功能障碍。此外，该方法还可实现精细运动行为与运动皮层微电极植入后组织学结果之间的相关性分析。这些方法易于操作、成本低廉，并可根据研究人员的具体需求进行调整。更重要的是，行为学测试不会给动物带来显著应激或疼痛；相反，研究人员发现动物似乎逐渐喜欢上了测试过程中的锻炼和奖励。既往研究表明，运动皮层损伤可导致运动、记忆及功能损害44,45。然而，尽管已有这些认识，关于微电极植入运动皮层所引起的功能影响仍缺乏足够信息27，而这一问题可能对患者的临床预后产生不利影响。
在整个实验方案中，无论是手术操作还是行为学测试，均可进行多种修改。本方案概述了在动物大脑运动皮层中影响前爪功能的区域植入微电极的操作流程。该流程可轻松调整以适应不同类型的植入物，例如用于电刺激的电极46或用于药物递送的套管<sup class="x...

皮层内微电极最初用于绘制大脑神经回路图谱，现已发展成为一种有价值的工具，可用于检测运动意图，并由此产生功能性输出1。所检测到的功能性输出可帮助脊髓损伤、脑性瘫痪、肌萎缩侧索硬化症（ALS）或其他运动功能受限疾病的患者控制计算机光标2,3或机械臂4,5,6，或恢复其自身失能肢体的功能7。因此，皮层内微电极技术已成为一个前景广阔且快速发展的研究领域8。
由于该领域已取得显著成果，目前已有临床研究正在开展，以改进并更深入地理解脑机接口（BMI）技术的可能性5,9,10。通过实现与大脑神经元之间充分的通信潜力，人们认为其康复应用前景无限8。尽管人们对皮层内微电极技术的未来持高度乐观态度，但众所周知，微电极最终会失效11，这可能归因于植入后引发的急性神经炎症反应。在大脑中植入外来材料会造成周围组织的即刻损伤，并进一步引发神经炎症反应，从而导致持续性损害，而该炎症反应的程度取决于植入物的特性12。此外，大脑中的植入物&#160;可能引起微损伤效应：即由于装置插入导致的急性水肿和出血，被认为会引起葡萄糖代谢降低13。此外，无论使用何种动物模型，信号质量以及可记录到有效信号的时间长度均存在不一致性11,14,15,16。多项研究已证实神经炎症与微电极性能之间存在关联17,18,19。因此，学界共识认为，至少部分原因在于微电极周围神经组织的炎症反应损害了电极的可靠性。
许多研究已探讨了局部炎症11,20,21,22，或探索了减轻因植入所导致脑组织损伤的方法11,23,24,25，旨在随时间推移改善记录性能14,26。此外，我们最近的研究表明，在大鼠运动皮层插入微电极所引起的医源性损伤会导致即时且持续的精细运动功能障碍27。因此，本文所介绍方案的目的是为研究人员提供一种定量评估方法，用于检测因皮层内装置（本文中为微电极）植入及长期留置所引发脑创伤后可能出现的运动功能障碍。本文描述的行为学测试旨在区分粗大运动与精细运动功能的损伤，且可广泛应用于多种脑损伤模型。这些方法操作简便、可重复性强，易于在啮齿类动物模型中实施。此外，本文所述方法可实现运动行为学结果与组织病理学结果之间的关联分析，而这一优势在脑机接口（BMI）领域此前鲜有发表。最后，由于这些方法最初设计用于检测精细运动功能28、粗大运动功能29以及应激与焦虑行为29,30，因此也可应用于多种头部损伤模型，以帮助研究人员排除（或确认）任何运动功能缺陷。

<table><tbody><tr><td>雄性 Sprague Dawley 大鼠，体重 201-225 克</td><td>Charles River</td><td>CD</td><td></td></tr><tr><td>Compac5 麻醉系统</td><td>Vetequip</td><td>901812</td><td></td></tr><tr><td>电动剪毛器</td><td>Wahl</td><td>9918-6171</td><td></td></tr><tr><td>立体定位仪</td><td>David Kopf Instruments</td><td>1760</td><td></td></tr><tr><td>Gaymar 加热水垫及水泵</td><td>Braintree Scientific Inc</td><td>&amp;nbsp;TP-700</td><td></td></tr><tr><td>Vetbond 组织粘合剂</td><td>3M</td><td>07-805-5031</td><td></td></tr><tr><td>牙科钻头</td><td>Pearson Dental</td><td>O60-0045</td><td></td></tr><tr><td>硬脑膜剥离针</td><td>Fine Science Tools</td><td>10064-14</td><td></td></tr><tr><td>硅胶柄微电极</td><td>克利夫兰退伍军人医疗中心自制</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>KwikCast 硅胶弹性体</td><td>World Precision Instruments</td><td>KWIK-CAST</td><td></td></tr><tr><td>Teets 牙科水泥&amp;nbsp;</td><td>A-M Systems</td><td>525000</td><td></td></tr><tr><td>高清网络摄像头 c920</td><td>Logitec</td><td>960-000764</td><td></td></tr><tr><td>握力计</td><td>Harvard Apparatus</td><td>565084</td><td></td></tr><tr><td>Minitab 17 统计分析软件</td><td>Minitab Inc</td><td></td><td></td></tr><tr><td>旷场网格实验装置</td><td>凯斯西储大学自制</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>梯子行走实验装置</td><td>凯斯西储大学自制</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>兔抗大鼠 IgG 抗体</td><td>Bio-Rad</td><td>618501</td><td></td></tr></tbody></table>

通过啮齿类动物行为学测试评估大鼠运动皮层微电极植入所致功能缺损

Rodent Behavioral Testing to Assess Functional Deficits Caused by Microelectrode Implantation in the Rat Motor Cortex

植入大脑的医疗器械具有巨大的应用潜力。作为脑机接口（BMI）系统的一部分，皮层内微电极已展现出记录单个或少量神经元动作电位的能力。这些记录到的信号已成功用于使患者与计算机、机械肢体或其自身肢体进行交互或控制&#160;。然而，先前的动物研究表明，脑内微电极的植入不仅会损伤周围组织，还可能导致功能缺陷。本文将讨论一系列行为学测试方法，用于量化在大鼠运动皮层植入皮层内微电极后可能出现的运动功能障碍。开放场地网格测试、梯子穿越测试和握力测试等方法，可为微电极植入所引发的潜在并发症提供有价值的信息。行为学测试结果将与终点组织病理学分析相关联，从而进一步揭示该操作对邻近组织的病理后果及其影响。

采用本文所述方法，按照既定操作流程39,40,41,42完成运动皮层的微电极植入手术，随后进行开放场地网格测试以评估粗大运动功能，并通过梯子行走和抓力测试评估精细运动功能27。对植入电极的动物，术后每周进行两次运动功能测试，持续16周，以未接受手术且未植入电极的动物作为对照组。所有术后评分按周取平均值，并归一化至每只动物术前的基线评分。所有误差均以均值标准误（SEM）表示。
为评估动物的大运动功能和应激行为，使其在开放旷场网格中自由奔跑3分钟（图1A）。该测试...

我们已证明，在大鼠运动皮层植入微电极会导致立即且持续的运动功能障碍。本文所述方法概述了一种微电极植入手术以及三种啮齿类动物行为学任务，旨在阐明由于微电极植入对运动皮层造成损伤后，精细运动或粗大运动功能可能发生的改变。

植入大脑的医疗器械具有巨大的潜力。作为脑机接口（BMI）系统的一部分，皮层内微电极……

该方法有助于回答神经工程领域中的关键问题，例如器械植入是否对长期运动功能产生影响。该技术的主要优势在于，与终点组织学分析相比，持续的行为学检测能够在整个研究过程中提供运动功能的实时且全面的评估。开始此操作时，需皮下注射头孢类抗生素以预防感染，并给予非甾体抗炎药以控制疼痛。接下来，将眼用软膏涂抹于动物眼部，以防止角膜干燥。使用小型动物专用的指甲剪修剪脚趾甲，以防止动物在术后伤口愈合期间抓挠缝线。随后，在动物头部切口区域皮下注射布比卡因，以提供局部镇痛作用。使用耳杆将动物固定在立体定位仪上，以防止手术过程中头部移动。然后在动物身下放置循环水加热垫，以维持其体温。随后，使用聚维酮碘溶液和异丙醇交替擦拭手术区域进行消毒。然后根据机构规程进行脚趾捏压，以确认动物已处于手术麻醉水平。为准备动物进行植入，在中线处做一个约一英寸长的切口以暴露颅骨。使用棉签钝性剥离骨膜，并用一块纱布止血。然后使用鳄鱼夹或止血钳向后牵拉周围组织。颅骨清理干净后，在暴露的颅骨表面滴加数滴基于氰基丙烯酸酯的组织粘合剂，以增强后续步骤中牙科水泥的粘附效果。在选定的半脑，通过在颅骨上制造一个小切口，标记对应前爪运动的运动皮层区域。使用1.75毫米圆头牙科钻头去除部分颅骨，需特别注意避免钻得过快或过深。应间歇性地使用钻头，以防止过热。用生理盐水和轻柔吸引清除颅骨上的骨碎片。钻孔时需小心，避免损伤硬脑膜。随后使用精细咬骨钳或弯头显微镊子去除残留的骨质。之后，用45度角的细钩状硬脑膜剥离器将硬脑膜翻开。使用棉签和生理盐水清理任何出血，注意不要直接接触脑表面。为将微电极插入运动皮层，需小心地将已灭菌的微电极安装在立体定位仪的通用固定夹上，注意避免碰撞电极柄。确保电极的头级接口连接器被固定夹牢固夹紧。使用立体定位仪上的显微操作器，小心地将电极尖端移至开放性颅骨切口上方。轻柔地将电极缓慢下放至脑组织内约两毫米深处。操作时应尽可能避开所有可见的血管结构。如本演示所示，使用显微镊子手动插入硅质非功能性假微电极。电极就位后，小心地从通用固定器上松开连接器，并撤回插入臂。使用棉签和生理盐水小心清除电极周围出血。随后使用硅胶弹性体封闭植入电极周围的开颅部位。然后使用牙科水泥将电极固定在颅骨上。待水泥完全干燥后，将切口前后两端的边缘拉合并缝合关闭。对于无功能的植入物，可将整个切口闭合。开始开放式场地网格测试时，将动物置于网格中央，使其背对测试者。记录三分钟视频，期间允许动物自由奔跑。当动物完成测试后，将其从网格上移除，并使用基于二氧化氯的消毒剂彻底清洁网格。使用视频追踪软件分析动物穿过的网格线数量、总移动距离和最大速度，作为评估其粗大运动功能的指标。进行梯子测试前，需要经过一周的训练，然后记录术前基线评分。然后将动物转移到一个临时的清洁暂养笼中，开始梯子行走测试。设置梯子，使其连接两个笼子。梯子的起始端放在一个清洁的笼子上，末端则置于动物的居住笼内，以此作为动物完成行走的动力。将用于拍摄梯子行走测试的摄像机安装在三脚架上，并置于梯子横档高度的中央位置。开启摄像机后，将动物固定在梯子起始线处，使其前爪接触第一根横档。让大鼠以自身速度通过梯子。动物的爪子接触第一根横杆到抵达倒数第三根横杆终点线之间所经过的时间，将决定其通过所需的时间。如果动物在梯子上转身，或在20秒内未移动，则视为失败。每次失败的运行均应赋予相应的惩罚分值时间，惩罚时间依据术前测试中记录的最慢表现来确定。每次测试日让每只动物穿过梯子五次，每次运行之间休息约一分钟。以每天最快的三次运行的平均值作为精细运动功能的评估指标。此外，使用视频追踪软件记录每只前肢从梯子横档上滑落的次数。进行握力测试时，将握力计放置在操作台边缘，使握力手柄悬伸于地面之上。然后让动物用两只前爪抓住手柄，同时用手握住动物尾部的基部固定。当动物的每只爪子都牢固抓住手柄后，通过握住尾部基部，以缓慢而稳定的力量将动物从握力计上向后拉。使用握力计记录动物施加的最大握力。每次测试日对每只动物进行三次测试，每次测试之间休息约两分钟。作为精细运动功能的指标，记录并计算三次试验中每次试验的最大握力输出值的平均值。仅在恢复期后的第一周测试中，对照组动物与植入组动物在开放场地格栅实验中的表现存在显著差异。在研究的其余时间段内，两组动物的表现无差异，表明不存在长期的粗大运动功能缺陷。除恢复期后第一周外，对照组动物穿越梯子的速度明显快于植入组动物。植入手术后的动物无法维持术前的梯子穿越速度，表明其精细运动功能可能存在缺陷。这一点进一步得到以下观察结果的支持：植入动物右侧前爪打滑的次数增加，且与脑部植入区域相对应。在整个研究过程中，对照组动物的握力测试结果通常显著高于植入组动物。此外，植入动物在恢复后即刻的表现显著低于基线水平，但随着时间推移表现逐渐改善，并恢复至基线水平。图中显示了动物在梯子任务中的表现与免疫球蛋白G荧光强度之间的相关性，后者是血脑屏障通透性的标志物。相关系数为0.901，表明两者之间存在极强的相关性。一旦掌握，该技术每次测试每只动物大约可在30分钟内完成。在实施该操作时，重要的是尽量减少环境变量，因为这些因素可能会分散动物对当前任务的注意力。在完成该操作后，可进一步采用其他方法，如免疫组织化学或其他光学成像技术，以研究细胞或组织对植入式微电子器件的响应。观看本视频后，您应能够充分理解如何对因初级运动皮层植入装置或损伤所引发的粗大及精细运动功能障碍，进行快速、简便且可重复的检测。

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Research

科研

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Bioengineering

生物工程

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来源：Fritsch, B. 等．清醒啮齿类动物经颅电脑刺激．J. Vis. Exp.

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同步监测无线电生理信号与记忆行为学测试作为研究海马神经发生的一种工具

本文介绍了一种用于在社会性群体笼养环境中采集个体自主发起行为实验数据的系统。通过使用自动化精细抓取评估方法，验证了该系统的有效性，可实现对中风后运动功能障碍、与动机相关的潜在行为改变、昼夜节律变化以及其他创新性依赖变量的表征。...

采集大鼠自主行为数据以表征卒中后功能缺损

本方案介绍了一种基于微控制器的行为学检测箱，通过采集置于箱体下方传感器的加速度数据，评估 Prepulse...

开发用于评估精神疾病动物模型中脉冲前抑制及神经活动的行为箱

学习大鼠运动皮质微电极植入后的行为检测方法，通过旷场网格、爬梯和握力测试评估即时与长期运动功能缺损。该技术为神经工程研究提供实时运动功能测量手段。

通过啮齿类动物行为学测试评估大鼠运动皮层微电极植入所致功能缺损

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