通过耳镜观察和行为性拍击惊跳反应验证的大鼠传导性听力损失简易手术诱导方法

本研究的总体目标是通过手术穿刺鼓膜诱导听力损失，并通过耳镜观察和拍手惊跳行为学评估来验证其效果。本实验的目的是建立一种人类传导性听力障碍的模型。在本实验中，我们演示了传导性听力损失的手术操作步骤，该方法简化了锤骨切除过程；同时展示了通过耳镜观察验证传导性听力损失的方法，以及一种简单的拍手惊跳行为学检测方法，用以确认传导性听力损失已成功建立。

我们所描述方法的主要优势在于其非侵入性操作，通过耳镜验证传导性听力损失，并通过拍击惊吓反应进行确认。本研究及相关操作程序已获得香港城市大学、香港大学以及香港特别行政区卫生署动物研究伦理委员会的批准。在本实验方案中，我们选用大鼠作为实验动物，但您也可选择其他任何啮齿类动物。

称量动物以确保腹腔注射麻醉剂量合适。麻醉时，确保动物接受适当剂量至关重要。抓住大鼠颈背部皮肤将其提起。

确保使用正确剂量的氯胺酮和赛拉嗪进行腹腔注射，并完成注射。务必通过夹捏足趾来确认无痛觉反应。手术准备包括已麻醉的大鼠、显微剪刀和耳镜。

请用乙醇彻底清洁手术区域。将手术巾铺在已清洁的台面上。随后放入剪刀、耳镜和大鼠。

剪刀的尺寸取决于啮齿类动物的大小。在耳镜下观察大鼠的左耳和右耳，以确保鼓膜健康。抓住耳廓并拉伸外耳道，使其变得模糊且发黑。

在此处引入显微剪刀。将显微剪刀引入外耳道中心，注意避免划伤组织。仔细聆听弹响声，然后旋转以确保锤骨脱位。

应使用耳镜确认传导性听力损失手术是否成功。在手术前后，使用带有小直径窥耳器的耳镜评估每只大鼠的耳部。通过耳镜观察时，应仔细研究正常鼓膜与穿孔鼓膜之间的差异。

左侧为正常的鼓膜，锤骨头部位置正常，与右侧穿孔的鼓膜有显著差异。右侧鼓膜在传导性听力损失手术后，锤骨发生移位，紧张部破裂，锤骨的鼓膜脐部及头部完全缺失。啮齿类动物的术后护理。

将啮齿类动物置于温暖光源下的家中笼内，并注射抗菌剂和葡萄糖。通过行为性拍手惊吓反应验证传导性听力损失。将传导性听力损失大鼠与正常大鼠分别放置在相邻的两个笼子中。

将这些放置于一个安静的房间内。站在半米远处，以相等的时间间隔拍手特定的次数。此处我们选择五次。

此处为我们的代表性行为学实验结果。注意下方的大鼠对响亮的拍手声没有跳跃反应，而屏幕上方的大鼠则对这些响亮的拍手声表现出惊吓反应。

请观察这两只大鼠在拍手前后的差异。未能成功诱导传导性听力损失。未能诱导传导性听力损失的原因可能是一侧或双侧耳朵出血。

在此情况下，应实施安乐死。这表明剪刀未接触到鼓膜。操作过程中无爆裂声。

没有爆裂声表明传导性听力损失手术操作不佳且不彻底。没有爆裂声意味着你的显微剪刀未与鼓膜直接接触。耳镜观察。

如果通过耳镜观察时，鼓膜外观正常，则表明未发生传导性听力损失。对响亮拍手声测试有反应。这表明未发生传导性听力损失，且该啮齿类动物不存在传导性听力障碍。

当大鼠跳跃或因突然的响亮拍手声受到惊吓时，就会发生这种情况。我们所描述方法的主要优点在于其非侵入性操作、通过耳镜验证传导性听力损失，以及通过拍手惊吓反应进行验证。完成该实验操作后，您可以在啮齿类动物模型中诱导传导性听力损失，并探究这种听力障碍的行为学和心理物理学表现。