Name: 小鼠静脉内膜氧化术 (视频) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-10-24T13:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 41 s
Description: 了解小鼠静脉-静脉体外膜肺氧合技术用于肺部疾病研究的方法。该技术通过颈静脉插管建立非插管自主呼吸模型，有助于研究急性及终末期肺病的分子机制和治疗策略。

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本项目由德国研究基金会（Deutsche Forschungsgemeinschaft）的KFO 311资助项目支持。

实验使用12周龄的雄性C57BL/6小鼠进行。本研究遵循德国动物保护法指南，实验方案编号为TSA 16/2250。
1. 材料准备
注意：所有步骤均在洁净但非无菌条件下进行。&#160;若动物在术后需继续存活，则必须采用无菌条件。
<ol>
	<li>在16倍显微镜下，使用手术刀在2-Fr聚氨酯管上开三个窗孔。 
	注意：所有窗孔必须位于插管的远端三分之一处，以确保最佳的血液引流。</li>
	<li>制备预充液（材料表）。加入30 IU/mL肝素和2.5% v/v的8.4% NaHCO3溶液。将此溶液在4 °C下冷藏，直至使用。用500 µL预充液对管路进行预充。</li>
	<li>将流出管插入预充液中，并启动蠕动泵以填充ECMO设备。以1 mL/min的流速持续循环预充液30分钟。</li>
	<li>向氧合器提供0.5 L/min的100%氧气。</li>
</ol>
2. 麻醉
<ol>
	<li>将动物放入充满2.5%（v/v）异氟烷/氧气混合气体的诱导室中。向蒸发器提供0.5 L/min的100%氧气。手术前，通过检测足底回缩和疼痛反射确认已达到完全麻醉状态。涂抹眼用凝胶以防止角膜干燥损伤。</li>
	<li>使用加热垫将动物体温维持在37 °C。</li>
	<li>使用异氟烷蒸发器进行面罩吸入麻醉，并皮下注射5 mg/kg的卡洛芬。</li>
	<li>定期观察自主呼吸情况，并调整异氟烷浓度，使其保持在1.3%至2.5%之间。</li>
</ol>
3. 手术
<ol>
	<li>使用精细剪刀在颈部左侧做一条长约4 mm的侧向皮肤切口，暴露左侧颈静脉。结合使用显微镊子和棉签进行锐性与钝性分离，并采用双极电凝处理小血管。</li>
	<li>暴露左侧颈静脉后，借助显微镊子，用8-0丝线结扎其远端部分。</li>
	<li>在静脉近端放置一个滑结。使用显微剪刀切开静脉的前壁。</li>
	<li>为实现充分肝素化，通过26 G Braunula针头向颈静脉内注射2.5 IU/g肝素。</li>
	<li>将动物垫头部抬高30°，以避免插管期间静脉出血过多。</li>
	<li>将一根2-Fr聚氨酯（PU）导管插入颈静脉近端，在推进过程中轻微旋转，插入深度约为4 cm；此时导管尖端将达到下腔静脉（IVC）的髂部分叉处。</li>
	<li>使用显微镊子以8-0丝线将导管固定。</li>
	<li>按照步骤3.1、3.2和3.3所述方法暴露右侧颈静脉。</li>
	<li>用一根1-Fr聚氨酯（PU）导管插管右侧颈静脉，并轻柔地向右心房方向推进约5 mm。</li>
	<li>重复步骤3.7。</li>
	<li>用另一根1-Fr聚氨酯（PU）导管插管左侧股动脉，用于侵入性血压监测以及血气分析（BGA）的采血。</li>
	<li>将连接至数据采集装置的心电图（ECG）针头皮下插入双侧前肢及左侧胸壁。</li>
	<li>插入连接至数据采集装置的直肠温度计。</li>
</ol>
4. 静脉-静脉体外膜肺氧合与血气分析
注意：完整的体外膜肺氧合（ECMO）管路示意图参见图1。
<ol>
	<li>通过以初始流速 0.1 mL/min 启动泵来在动物身上启动 ECMO。在接下来的 2 分钟内将泵的流速调整至 3–5 mL/min。</li>
	<li>如果经插管部位从流出道插管吸入空气，则降低流速，并通过空气捕集储液器向管路中加入 0.1 mL 预充液。</li>
	<li>在稳定流速下，通过数据采集装置持续以实时模式监测所有生命体征参数。</li>
	<li>持续观察静脉引流的回流情况，并监测空气捕集储液器中的血液液面水平。</li>
	<li>使用 24 G 套管针尖端将伤口渗出的任何血液收集至 1 cc 注射器中，并通过空气捕集储液器将其回输至 ECMO 管路中。</li>
	<li>进行 BGA 时，使用血液采样 cartridge 在以下时间点和以下位置采集约 75 µL 动脉血：
	<ol>
		<li>ECMO 启动后 10 分钟，通过氧合器前预置的额外管路从下腔静脉（IVC）采血，通过氧合器后类似额外管路&#160;（对照）以及直接从股动脉采血。</li>
		<li>ECMO 启动后 30 分钟，从股动脉采血。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>每 45 分钟额外给予 0.1 mL 预充液，以补偿血管内液体丢失，可通过空气捕集器或股动脉导管给入，或通过血液引流插管吸除气泡实现。</li>
	<li>进行 BGA 时，使用血液采样 cartridge 采集约 75 µL 动脉血：
	<ol>
		<li>ECMO 启动后 1 小时，从股动脉采血。</li>
		<li>ECMO 启动后 2 小时，通过氧合器前预置的额外管路从下腔静脉（IVC）采血，通过氧合器后类似额外管路（对照），&#160;以及直接从股动脉采血。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>2 小时后，在 5 分钟内逐渐降低泵上的流速，从而停止 ECMO。</li>
	<li>继续记录生命体征参数额外 10 分钟。</li>
	<li>通过放血处死动物，并采集血液和器官以结束实验。</li>
</ol>

<ol><li>Hill, J. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prolonged+Extracorporeal+Oxygenation+for+Acute+Post-Traumatic+Respiratory+Failure+%28Shock-Lung+Syndrome%29%5BTitle%5D)+AND+%22New+England+Journal+of+Medicine%22%5BJournal%5D)">Prolonged Extracorporeal Oxygenation for Acute Post-Traumatic Respiratory Failure (Shock-Lung Syndrome).</a> New England Journal of Medicine. 286 (12), 629-634 (1972).</li>
<li>Noah, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Referral+to+an+Extracorporeal+Membrane+Oxygenation+Center+and+Mortality+Among+Patients+With+Severe+2009+Influenza+A%28H1N1%29%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+American+Medical+Association%22%5BJournal%5D)">Referral to an Extracorporeal Membrane Oxygenation Center and Mortality Among Patients With Severe 2009 Influenza A(H1N1).</a> Journal of the American Medical Association. 306 (15), 1659(2011).</li>
<li>Maslach-Hubbard, A., Bratton, S. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Extracorporeal+membrane+oxygenation+for+pediatric+respiratory+failure%3A+History%2C+development+and+current+status%5BTitle%5D)+AND+%22World+Journal+of+Critical.+Care+Medicine%22%5BJournal%5D)">Extracorporeal membrane oxygenation for pediatric respiratory failure: History, development and current status.</a> World Journal of Critical. Care Medicine. 2 (4), 29-39 (2013).</li>
<li>Langer, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((%22Awake%22+extracorporeal+membrane+oxygenation+%28ECMO%29%3A+pathophysiology%2C+technical+considerations%2C+and+clinical+pioneering%5BTitle%5D)+AND+%22Critical+Care%22%5BJournal%5D)">"Awake" extracorporeal membrane oxygenation (ECMO): pathophysiology, technical considerations, and clinical pioneering.</a> Critical Care. 20 (1), 150(2016).</li>
<li>Esper, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Extracorporeal+Membrane+Oxygenation%5BTitle%5D)+AND+%22Advances+in+Anesthesia%22%5BJournal%5D)">Extracorporeal Membrane Oxygenation.</a> Advances in Anesthesia. 35 (1), 119-143 (2017).</li>
<li>Millar, J. E., Fanning, J. P., McDonald, C. I., McAuley, D. F., Fraser, J. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+inflammatory+response+to+extracorporeal+membrane+oxygenation+%28ECMO%29%3A+a+review+of+the+pathophysiology%5BTitle%5D)+AND+%22Critical+Care%22%5BJournal%5D)">The inflammatory response to extracorporeal membrane oxygenation (ECMO): a review of the pathophysiology.</a> Critical Care. 20 (1), 387(2016).</li>
<li>Lubnow, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Technical+complications+during+veno-venous+extracorporeal+membrane+oxygenation+and+their+relevance+predicting+a+system-exchange--retrospective+analysis+of+265+cases%5BTitle%5D)+AND+%22Public+Library+of+Science+One%22%5BJournal%5D)">Technical complications during veno-venous extracorporeal membrane oxygenation and their relevance predicting a system-exchange--retrospective analysis of 265 cases.</a> Public Library of Science One. 9 (12), e112316(2014).</li>
<li>Passmore, M. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inflammation+and+lung+injury+in+an+ovine+model+of+extracorporeal+membrane+oxygenation+support%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology+-+Lung+Cellular+and+Molecular+Physiology%22%5BJournal%5D)">Inflammation and lung injury in an ovine model of extracorporeal membrane oxygenation support.</a> American Journal of Physiology - Lung Cellular and Molecular Physiology. 311 (6), L1202-L1212 (2016).</li>
<li>Vaquer, S., de Haro, C., Peruga, P., Oliva, J. C., Artigas, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Systematic+review+and+meta-analysis+of+complications+and+mortality+of+veno-venous+extracorporeal+membrane+oxygenation+for+refractory+acute+respiratory+distress+syndrome%5BTitle%5D)+AND+%22Annals+of+Intensive+Care%22%5BJournal%5D)">Systematic review and meta-analysis of complications and mortality of veno-venous extracorporeal membrane oxygenation for refractory acute respiratory distress syndrome.</a> Annals of Intensive Care. 7 (1), 51(2017).</li>
<li>Houser, S. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+Models+of+Heart+Failure+A+Scientific+Statement+From+the+American+Heart+Association%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation+Research%22%5BJournal%5D)">Animal Models of Heart Failure A Scientific Statement From the American Heart Association.</a> Circulation Research. 111 (1), 131-150 (2012).</li>
<li>Russell, J. C., Proctor, S. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Small+animal+models+of+cardiovascular+disease%3A+tools+for+the+study+of+the+roles+of+metabolic+syndrome%2C+dyslipidemia%2C+and+atherosclerosis%5BTitle%5D)+AND+%22Cardiovascular+Pathology%22%5BJournal%5D)">Small animal models of cardiovascular disease: tools for the study of the roles of metabolic syndrome, dyslipidemia, and atherosclerosis.</a> Cardiovascular Pathology. 15 (6), 318-330 (2006).</li>
<li>Madrahimov, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Novel+mouse+model+of+cardiopulmonary+bypass%5BTitle%5D)+AND+%22European+Journal+of+Cardio-thoracic+Surgery%22%5BJournal%5D)">Novel mouse model of cardiopulmonary bypass.</a> European Journal of Cardio-thoracic Surgery. 53 (1), 186-193 (2017).</li>
<li>Madrahimov, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cardiopulmonary+Bypass+in+a+Mouse+Model%3A+A+Novel+Approach%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Cardiopulmonary Bypass in a Mouse Model: A Novel Approach.</a> J. Journal of Visualized Experiments. (127), (2017).</li>
</ol>

作者无任何利益冲突需要披露。

此前，我们描述了一种在小鼠中成功建立体外循环（CPB）的模型12,13。为了将该模型应用于急性或终末期肺部疾病的实验研究，我们开发了一种易于使用的静脉-静脉体外膜肺氧合（ECMO）回路，适用于小鼠。与CPB模型不同，静脉-静脉ECMO无需开胸及主动脉阻断等复杂的外科操作，从而降低了全身肝素化动物发生伤口出血的风险。为防止血液凝块导致氧合器栓塞，每只动物给予2.5 IU/kg的肝素。该剂量依据既往活化凝血时间（ACT）测定结果确定，可确保血液完全抗凝（ACT &#62; 800 秒）。由于微型氧合器未进行肝素涂层处理，我们的抗凝方案仍保持与CPB操作相似。
与体外循环（CPB）回路相比，我们通过减小空气捕集器和微氧合器的体积，将总体预充量减少至0.5 mL。此外，需要较慢的流速以维持动物充分的氧合。血管内血容量的丢失导致平均动脉压逐渐下降。向动物体内额外加入0.1 mL的预充液后，血压可升高超过20 mmHg，但在随后的30分钟内，动脉压始终呈现轻微的线性下降。如果经...

体外膜肺氧合（ECMO）是一种临时生命支持系统，可替代肺和心脏功能，以实现充分的气体交换和灌注。Hill 等人1于1972年首次描述了ECMO在患者中的应用；然而，直到2009年H1N1流感大流行期间成功应用后，ECMO才得到广泛使用2。如今，ECMO已成为终末期心肺疾病抢救治疗的常规手段3。静脉-静脉ECMO正 increasingly 被用于治疗难治性呼吸衰竭且清醒、未插管、自主呼吸的患者，作为有创机械通气的一种替代方案4。
尽管体外膜肺氧合（ECMO）已得到广泛应用，但已有多种并发症的报道5,6,7。接受ECMO治疗的患者可能出现的并发症包括出血、血栓形成、脓毒症、血小板减少、设备相关功能障碍以及空气栓塞。此外，临床上和实验研究中均已有充分描述，ECMO可引发全身性炎症反应综合征（SIRS），进而导致多器官损伤8,9。在接受长期ECMO治疗的患者中，脑梗死等神经系统并发症也常有报道。更为复杂的是，通常难以区分这些并发症究竟是由ECMO本身引起，还是源于急性或终末期疾病所伴随的基础疾病状态。
为了专门研究体外膜肺氧合（ECMO）对健康机体的影响，必须建立一个可靠的实验动物模型。目前关于在小型动物上实施ECMO的报道极少，且仅限于大鼠。迄今为止，文献中尚未描述过小鼠的ECMO模型。由于存在大量可获得的基因修饰小鼠品系，建立小鼠ECMO模型将有助于进一步探究与ECMO相关并发症的分子机制10,11。
基于我们先前描述的小鼠体外循环（CPB）模型12，我们建立了一种在未进行气管插管、自主呼吸小鼠中实施静脉-静脉体外膜肺氧合（ECMO）的稳定方法。ECMO管路（图1）包含流出道和回流导管、蠕动泵、氧合器以及除气储血器，其结构与我们此前报道的小鼠CPB模型12相似，但预充体积更小（0.5 mL）。本方案详细展示了成功实施ECMO操作所涉及的技术步骤、生理监测及血气分析方法。

<table><tbody><tr><td>斯特罗芬丁</td><td>B.Braun Petzold GmbH</td><td>PZN:8609189</td><td>与四联液按1:1混合</td></tr><tr><td>6% 四联液</td><td>B. Braun Melsungen AG</td><td>PZN: 05565416</td><td>与斯特罗芬丁按1:1混合</td></tr><tr><td>肝素钠 25,000</td><td>Ratiopharm GmbH</td><td>PZN: 3029843</td><td>预充液中每毫升含2.5 IU</td></tr><tr><td>8.4% 碳酸氢钠溶液</td><td>B. Braun Melsungen AG</td><td>PZN: 1579775</td><td>预充液中占3%</td></tr><tr><td>卡洛芬</td><td>Zoetis Inc., USA</td><td>PZN:00289615</td><td>5 mg/kg体重</td></tr><tr><td>1 Fr 聚氨酯导管</td><td>Instechlabs INC., USA</td><td>C10PU-MCA1301</td><td>颈动脉</td></tr><tr><td>2 Fr 聚氨酯导管</td><td>Instechlabs INC., USA</td><td>C20PU-MJV1302</td><td>颈静脉</td></tr><tr><td>8-0 编织丝线</td><td>Ashaway Line &amp;amp; Twine Co., USA</td><td>75290</td><td>结扎用</td></tr><tr><td>异氟烷</td><td>Piramal Critical Care GmbH</td><td>PZN:9714675</td><td>麻醉</td></tr><tr><td>弹簧剪 - 6 mm 刀头</td><td>Fine Science Tools GmbH</td><td>15020-15</td><td>器械</td></tr><tr><td>弹簧剪 - 2 mm 刀头</td><td>Fine Science Tools GmbH</td><td>15000-03</td><td>器械</td></tr><tr><td>哈尔斯特德-蚊式止血钳</td><td>Fine Science Tools GmbH</td><td>13009-12</td><td>器械</td></tr><tr><td>杜蒙特#55镊子</td><td>Fine Science Tools GmbH</td><td>11295-51</td><td>器械</td></tr><tr><td>卡斯特罗维耶霍微持针器 - 9 cm</td><td>Fine Science Tools GmbH</td><td>12060-02</td><td>器械</td></tr><tr><td>微血管夹</td><td>Fine Science Tools GmbH</td><td>18555-01</td><td>器械</td></tr><tr><td> bulldog 血管夹</td><td>Fine Science Tools GmbH</td><td>18050-28</td><td>器械</td></tr><tr><td>异氟烷麻醉蒸发器 Drager 19.1</td><td>Dr&amp;auml;gerwerk AG &amp;amp; Co. KGaA</td><td></td><td>麻醉浓度 1.3–2.5%</td></tr><tr><td>多通道数据采集系统，配备 ISOHEART 软件</td><td>Hugo Sachs Elektronik GmbH, 德国</td><td></td><td>有创血压、心电图、体温 t &amp;deg;C</td></tr><tr><td>i-STAT 便携式检测仪</td><td>Abbott Laboratories, Lake Bluff, Illinois, USA</td><td></td><td>血气分析</td></tr><tr><td>i-STAT CG4+ 和 CG8+ 检测盒</td><td>Abbott Laboratories, Lake Bluff, Illinois, USA</td><td></td><td>血气分析</td></tr><tr><td>C57Bl/6 小鼠，雄性，30 g，14 周龄</td><td>Charles River Laboratories</td><td></td><td>实验前饲养 1 周</td></tr></tbody></table>

小鼠静脉-静脉体外膜氧合

Veno-Venous Extracorporeal Membrane Oxygenation in a Mouse

近年来，体外膜肺氧合（ECMO）的使用显著增加。ECMO 已成为治疗急性及终末期肺部疾病的可靠且有效的疗法。随着临床需求的增加和 ECMO 使用时间的延长，操作流程的优化以及多器官损伤的预防变得至关重要。本方案旨在介绍一种在未进行气管插管、可自主呼吸的小鼠中实施静脉-静脉 ECMO 的详细技术。该方案展示了 ECMO 的技术设计及手术步骤。这一小鼠 ECMO 模型将有助于研究与 ECMO 相关的病理生理机制（例如，炎症、出血以及血栓栓塞事件）。由于存在大量基因修饰小鼠，也可借此深入解析 ECMO 相关并发症所涉及的分子机制。

本方案描述了小鼠静脉-静脉体外膜肺氧合（ECMO）的方法。该模型可靠且可重复，与我们先前报道的体外循环（CPB）伴呼吸和循环停止模型12,13相比，建立技术难度较低。
静脉系统中的ECMO血流维持在1.5至5 mL/min之间。通过向ECMO管路中添加额外的预充液，将平均动脉压维持在70至85 mmHg。通常，在ECMO期间向管路中添加0.1 mL预充液即可替代血容量。所有用于扩容或缓冲的溶液均通过股动脉或气泡捕集储液器给予。
每10分钟记录一次生理参数，代表性ECMO实验的数据见图2。成功的ECMO实验的血气分析数据见表1...

本文介绍了一种在未进行气管插管、可自主呼吸的小鼠中实施静脉-静脉体外膜肺氧合（ECMO）的技术方案。该小鼠ECMO模型可有效应用于急性及终末期肺部疾病的实验研究。

体外膜肺氧合（ECMO）的使用近年来显著增加。ECMO 已成为治疗……的一种可靠且有效的疗法。

该方法有助于解答肺部研究领域中的关键问题，例如与急性和慢性终末期肺部疾病的治疗相关的问题。该技术的主要优势在于，它有助于揭示在作为挽救生命措施的长期体外膜肺氧合过程中，多器官损伤的分子和病理机制的启动过程。在洁净但非无菌的条件下，使用手术刀和解剖显微镜，在16倍放大下，于一根2法式聚氨酯导管远端三分之一处制作三个穿孔。接下来，将流出管路插入预充液中，启动蠕动泵，以1毫升/分钟的流速为体外膜肺氧合（ECMO）设备预充管路。30分钟后，向氧合器中加入0.5升/分钟的100%氧气，并确认麻醉成年小鼠对足趾夹捏无反应。在动物眼睛上涂抹眼膏后，在颈部左侧做一道4毫米的侧向皮肤切口，以暴露颈静脉，并使用显微镊子和棉签进一步分离显露血管。使用8-0丝线结扎暴露静脉的远端，并在近端放置一个滑结。用显微剪刀切开静脉前壁，通过26G套管针向颈静脉注射每公斤2.5国际单位的肝素，在插入过程中将手术垫头端抬高30度，以避免插入期间失血过多。小心地将带侧孔的2法式聚氨酯导管插入颈静脉近端，边推进边轻微旋转导管，直至插入深度达4厘米，到达下腔静脉的髂部分叉处。推送套管时务必非常轻柔，但需持续进行，不可施加额外力量。若遇到阻力，应将套管回撤并重新插入。使用8-0丝线打结固定套管，并按照刚刚演示的方法暴露右侧颈静脉。用一根1 French的聚氨酯导管插管右侧颈静脉，轻柔地将导管向右心房方向推进5毫米，并用8-0丝线打结固定导管。用另一根1 French的聚氨酯导管插管左侧股动脉，用于有创血压监测和血气分析，并将连接至数据采集装置的心电图针电极皮下插入双侧前肢以及左侧胸壁。然后插入连接至数据采集装置的直肠温度计。启动静脉-静脉体外膜肺氧合时，将泵的初始流速设为0.1毫升每分钟。两分钟后，将流速调整至每分钟3至5毫升。在流速稳定的情况下，通过数据采集装置以实时模式监测生命体征参数，持续观察静脉引流的回流情况，并监测空气捕集器储液腔内的血液液面水平。使用配备24G套管针的一毫升注射器收集任何血液渗漏，并通过空气捕集储液器将血液回输至ECMO管路。在ECMO启动10分钟后，使用血液采样卡从氧合器前的下腔静脉、氧合器后的直接位置以及股动脉采集约75微升的动脉血，用于血气分析。在ECMO启动后30分钟和60分钟，仅从股动脉采集血液。启动后45分钟和90分钟，注入0.1毫升预充液，以补偿通过空气捕获器造成的血管内液体丢失。启动后2小时，从氧合器、下腔静脉和股动脉采集血液。最后一次采血后，在5分钟内逐步降低泵的流速，从而停止ECMO运行，同时继续记录生命体征参数10分钟。在典型的实验中，每10分钟记录一次动物的生理参数。在此项代表性实验中，血液学参数显示在体外膜肺氧合（ECMO）期间发生了明显的血液稀释，但无需输血以纠正中度贫血。氧合参数显示，在吸入氧分数为1.0的氧气-空气混合气体条件下，氧合器功能表现良好。此外，ECMO期间的代谢变化包括实验开始和结束时出现的呼吸性碱中毒。未进行额外的血液缓冲。重要的是采用正确的插管技术，以确保血液顺利通过ECMO管路，通过血气分析监测氧合参数，并通过补充额外的预充液来弥补采血造成的血液丢失。该技术为肺部疾病领域的研究人员提供了新的途径，通过使用80多种现有的基因敲入和基因敲除小鼠模型，可显著改进挽救生命疗法的治疗方案。

veno-venous-extracorporeal-membrane-oxygenation-in-a-mouse

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医学

小鼠静脉内膜氧化术

本视频展示了通过阻断小鼠右侧颈总动脉并将其暴露于低氧环境中，在小鼠模型中复制血栓性中风的操作过程。该过程会减少向大脑的血液和氧气供应，导致血栓形成及脑损伤。...

通过低氧与缺血在小鼠模型中诱导血栓性脑卒中

内皮糖萼/内皮表面层最适合通过活体显微镜进行研究。在肺等运动器官中，活体显微镜技术上具有挑战性。我们展示了如何结合明场与荧光显微镜技术，在自由运动的组织中估算内皮表面层厚度 体内...

in vivo 条件下小鼠肺血管内皮表面层的测量

本文介绍了如何在小鼠中实施体外循环。这一新型模型将有助于研究器官损伤相关的分子机制。...

小鼠模型中的心肺转流：一种新方法

通过穿透小鼠肾下腹主动脉的双层管壁进入下腔静脉，建立主动脉-下腔静脉瘘，随后通过部分结扎下腔静脉在其流出道处形成狭窄。该可重复模型可用于研究中心静脉狭窄。...

利用动静脉瘘合并流出道狭窄建立中心静脉狭窄的小鼠模型

本方案描述了一种通过门静脉灌注对完整小鼠肝脏进行切片以用于代谢研究的简便方法。...

Ex Vivo 小鼠门静脉肝脏灌注

本方案提供了在小鼠中进行多次静脉推注给药及有创血流动力学监测的逐步操作流程。研究人员可利用本方案开展未来针对肺动脉高压的治疗性化合物筛选。...

低氧诱导小鼠肺动脉高压模型中的多次静脉推注给药与侵入性血流动力学评估

一种小鼠手术模型，可在维持通气并避免缺氧的情况下建立左肺缺血再灌注（IR）损伤。...

一种经口插管小鼠模型及通气肺缺血-再灌注手术

常温的 离体 小鼠肝脏离体灌注

开发了一种双模成像系统，用于无接触评估皮肤组织氧合和血管功能。...

双模态成像技术用于皮肤组织氧合与血管功能检测

本文全面概述了构建口腔癌小鼠模型的技术，以及通过多光子显微镜对标记细胞进行舌内肿瘤侵袭的定量监测方法。该系统可作为评估抗侵袭性化合物分子机制及药物疗效的有用平台。...

多光子成像技术在口腔鳞状细胞癌原位小鼠模型中对肿瘤细胞侵袭的观察

了解小鼠静脉-静脉体外膜肺氧合技术用于肺部疾病研究的方法。该技术通过颈静脉插管建立非插管自主呼吸模型，有助于研究急性及终末期肺病的分子机制和治疗策略。

小鼠静脉-静脉体外膜氧合

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