Quantification of Efferocytosis by Single-cell Fluorescence Microscopy

Kyle Taruc; Charles Yin; Daniel G. Wootton; Bryan Heit

doi:10.3791/58149

JoVE Journal
Immunology and Infection

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JoVE Journal Immunology and Infection

Quantification of Efferocytosis by Single-cell Fluorescence Microscopy

单细胞荧光显微镜定量 Efferocytosis 的研究

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06:15 min

August 18, 2018

DOI: 10.3791/58149-v

Kyle Taruc¹, Charles Yin¹, Daniel G. Wootton^2,3, Bryan Heit¹

¹Department of Microbiology and Immunology and the Center for Human Immunology,University of Western Ontario, ²Institute of Infection and Global Health,University of Liverpool, ³Department of Respiratory Research,Aintree University Hospital NHS Foundation Trust

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Efferocytosis, 凋亡细胞的吞噬去除, 是需要保持动态平衡, 并由受体和信号通路, 以允许识别, 吞没和内化的凋亡细胞的促进。在此, 我们提出了一个荧光显微镜协议的量化 efferocytosis 和 efferocytic 信号通路的活动。

该方法可用于回答胞吐作用领域的关键问题，例如信号分子在介导凋亡细胞摄取中的作用。该技术的主要优点是它提供了凋亡细胞摄取的明确定量，包括部分或零碎的凋亡细胞摄取，这在其他方法中并不总是很明显。虽然这种方法可以深入了解免疫细胞的胞吐作用，但它也可以应用于其他细胞类型，例如上皮细胞或癌细胞。

通常，由于难以优化显微镜采集设置，刚接触这种方法的人会遇到困难。制备人巨噬细胞和凋亡的 Jurkat 细胞后，使用血细胞计数器对凋亡细胞进行计数。然后将足够量的凋亡细胞转移到 1.5 mL 微量离心管中。

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