胎盘硫酸软骨素 A (plCSA) 靶向脂质高分子纳米粒的合成与表征

这种方法可以帮助回答药物输送领域的关键问题，例如有针对性地向人类癌症和胎盘细胞细胞提供治疗。该技术的主要优点是，合成其他颗粒中结合的肽是一种简单易重复的方法。首先，在无菌的10毫升离心管中加入3毫米的4%乙醇。

然后，加入90微克大豆卵磷脂库存溶液、210微克的DSPE-PEG-碳氧酸库存溶液和750微克的DEX库存溶液。使用一毫升注射器移液两毫克的PLGA库存溶液。将离心管放在超声波处理器上的冰浴中，并发出两分钟的声波。

然后，将 PLGA 库存溶液滴入离心管。要净化 DNP，请使用离心过滤器在 0.1 摩尔 MES 缓冲液中清洗溶液。然后，在 1000 G 下将溶液离心，在 4 摄氏度下将溶液离心 3 分钟。

要开始酯激活，请向一毫升的 DNP 中加入 0.4 毫克 EDC。然后，在反应中加入0.24毫克的NHS。然后，让反应在黑暗中室温下发生长达一小时。

在此之后，彻底混合反应部件，将反应放在摇床上。要开始胺反应，请使用PBS将缓冲pH值从7.2提高至7.5。然后，在反应溶液中加入0.5毫克的pICSA靶向肽。

将溶液混合好，放在摇床上。然后，让反应在黑暗中一夜之间在四摄氏度下继续。第二天，用结合溶液填充透析袋。

在黑暗中用 PBS 缓冲液在室温下用 PICSA DNP 净化 24 小时。根据文本协议培养细胞后，取出介质，添加一毫升新鲜、冷介质，并加入 5% FBS 和 pICSA DNP 或 DNP。然后，在4摄氏度下孵育细胞和纳米粒子混合物一小时。

在此之后，取出介质，用 PBS 清洗细胞三次。然后，加入一毫升新鲜介质，在37摄氏度下孵育细胞30分钟。在此之后，取出介质，用 PBS 清洗细胞三次。

然后，加入两毫升的冷，百分之四的PFA，并在室温下孵育混合物10分钟。取出PFA，用两毫升PBS清洗细胞。然后，添加一毫升的PBS与DAPI核染色。

让混合物在室温下孵育10分钟。最后，添加安装介质，用荧光显微镜对荧光进行成像。使用此协议，DNP 已成功编写并结合到 pICSA BP 中。结合后，初级 DNP 的直径增加到大约 109 纳米。

DNP 和 pICSA DNP 的 TEM 图像表明，这些粒子分布良好，一般表现出球形形态。纳米粒子的泽塔电位为负20.1和29.9毫伏，表明纳米粒子高度稳定。JEG3细胞吸收测定表明，在30分钟内，与JEG3细胞绑定的pICSA DNP。

因此，pICSA BP与表面有效结合。在尝试此过程时，在添加 PLGA 之前，必须记住对混合物进行一到两分钟的声波化。按照此过程，可以执行 HPLC 测定等方法，以便更准确地确定结合效率。

该技术开发后，为生殖生物学领域的研究人员探索妊娠并发症胎盘靶向治疗的可能性铺平了道路。