Name: 研究矿物对有机热液转化影响的实验协议 (视频) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-08-08T15:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 50 s
Description: 探索矿物对有机热液转化影响的实验方法，使用硝基苯和磁铁矿在硅管中进行反应。该技术成本低、操作简便，可研究深海热液系统中的有机-矿物相互作用，适用于绿色化学领域。

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我们感谢亚利桑那州立大学的 H.O.G. 团队开发了这些热液实验的初始方法，特别感谢 I. Gould、E. Shock、L. Williams、C. Glein、H. Hartnett、K. Fecteau、K. Robinson 和 C. Bockisch 提供的指导和帮助。Z. Yang 和 X. Fu 的研究得到了 Z. Yang 从奥克兰大学获得的启动资金支持。

1. 准备水热实验样品
<ol>
	<li>选择石英或二氧化硅玻璃管的尺寸， 例如， 2 mm 内径（ID）× 6 mm 外径（OD）或 6 mm 内径（ID）× 12 mm 外径（OD），并确定所用有机化合物和矿物质的用量。本研究中，硝基苯和磁铁矿（Fe3O4）以装入硅胶管（例如， 内径2 mm、外径6 mm的样品体积和质量分别为3.0 µL和13.9 mg。 
	注意：大直径试管便于材料装填，但需要更费力地进行封管。</li>
	<li>使用管状切割器将洁净的石英玻璃管切割成约30 cm长的小段。使用配备合适火焰头的氢氧焰火炬将其中一端密封封闭。 
	警告：使用氢氧焰喷灯时，请遵循相应的安全操作规程。</li>
	<li>使用0.1 mg精度的天平称取预定量的起始有机化合物（若为固体），并用称量纸将其转移至石英玻璃管中。若该化合物为液体（例如，此处为硝基苯），使用微量注射器（例如， 10 µL）转移至小型硅胶管中。通过巴斯德移液管将称量好的矿物质加入硅胶管内，随后加入去离子且脱氧的水（例如，0.3 mL）。使用18.2 MΩ·cm的去离子水，并通过超声处理去除氧气。</li>
	<li>将石英管连接至带有关闭阀门的真空管线（约1 cm内径）。将石英管浸入装有液氮的杜瓦瓶中约3分钟，直至有机物和水完全冻结。 
	警告：转移和使用液氮时应遵循安全操作规程。</li>
	<li>当试管仍浸没在液氮中时，打开真空阀，抽除试管顶空中的空气。 
	注意：此过程应持续至真空泵的压力计显示压力降至100 mtorr以下。</li>
	<li>关闭阀门，将试管从液氮中取出，并使其升温至室温。轻轻敲击试管底部，使溶液中残留的气泡释放至顶空。</li>
	<li>重复上述冷冻-抽气-解冻循环两次，然后将试管保持在液氮中，再密封试管的另一端。关闭真空系统，使用氢氧焰将整个试管完全封闭。 
	注意：当试管进行水热实验时，由于液态水膨胀，试管的顶空体积会减小。例如，水的密度从室温升至300 °C时约降低30%。密封试管时应计算并预留足够的顶空体积。</li>
</ol>
2. 设置水热实验
<ol>
	<li>密封步骤完成后，将石英管放入一根小型钢管（长约30 cm，直径约1.5 cm）中，钢管两端使用松动的螺帽封闭，以防止管内压力积聚或石英管破裂造成损坏。</li>
	<li>将管道置于温度可控性良好的炉子或烘箱中，并加热至所需温度（例如， 150 °C（本研究中）。在烘箱内使用热电偶监测水热反应过程中的温度。</li>
	<li>反应时间一到（例如， 2 h（本研究中），将硅管迅速放入冰水浴中以淬灭。 
	注意：淬灭过程在不到1分钟内即可冷却至室温，从而避免可能的逆向反应。</li>
</ol>
3. 实验后分析样品
<ol>
	<li>使用管状切割器打开二氧化硅管，并迅速转移全部产物（例如使用巴斯德移液管将小石英管中的样品（约0.3 mL）转移至10 mL玻璃小瓶中。</li>
	<li>用含有8.8 mM十二烷（作为气相色谱GC内标物）的3 mL二氯甲烷（DCM）溶液萃取有机产物。盖紧小瓶，手动振摇2分钟，再涡旋震荡1分钟。 
	注意：这有助于将有机产物萃取到有机相中。同时，用二氯甲烷（DCM）冲洗转移用移液管和硅管内壁，以确保产物回收完全。对于矿物质含量较高的样品，将其在DCM溶液中进行超声处理，以实现更充分的萃取。</li>
	<li>让矿物颗粒在提取液中沉降即，用十二烷的二氯甲烷溶液处理5分钟。使用巴斯德吸管小心地从二氯甲烷层转移约1 mL样品（即， 将下层液体转移至气相色谱小瓶中。</li>
	<li>使用带有聚毛细管柱的气相色谱法分析有机产物分布（例如， 5% 二苯基/95% 二甲基硅氧烷）和火焰离子化检测器。设置气相色谱程序：初始温度50 °C，保持8 min，以10 °C/min升温至220 °C，保持10 min，再以20 °C/min升温至300 °C，保持5 min。进样口温度设为300 °C。 
	注意：根据所分析的有机化合物类型，需要调整气相色谱程序。</li>
	<li>通过绘制分析物与内标物的峰面积比相对于分析物浓度的曲线，建立气相色谱校准曲线。</li>
	<li>根据反应前后起始有机原料的浓度计算反应转化率， 即，转化率%&#160;=&#160;（[初始值] – [最终值]）⁄ [初始值] × 100%。利用该换算公式判断矿物是促进还是抑制水热条件下的有机质转化。</li>
</ol>

<ol><li>Yang, Z., Gould, I. R., Williams, L. B., Hartnett, H. E., Shock, E. L. <a target="_blank" href="https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0016703717307330">Effects of iron-containing minerals on hydrothermal reactions of ketones.</a> Geochimica et Cosmochimica Acta. 223, 107-126 (2018).</li>
<li>Seewald, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Organic-inorganic+interactions+in+petroleum-producing+sedimentary+basins%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Organic-inorganic interactions in petroleum-producing sedimentary basins.</a> Nature. 426 (6964), 327-333 (2003).</li>
<li>Sogin, M. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microbial+diversity+in+the+deep+sea+and+the+underexplored+%22rare+biosphere%22%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences%22%5BJournal%5D)">Microbial diversity in the deep sea and the underexplored "rare biosphere".</a> Proceedings of the National Academy of Sciences. 103 (32), 12115(2006).</li>
<li>McCollom, T. M. <a target="_blank" href="https://pubs.geoscienceworld.org/msa/rimg/article-abstract/75/1/467/140977/laboratory-simulations-of-abiotic-hydrocarbon">Laboratory Simulations of Abiotic Hydrocarbon Formation in Earth's Deep Subsurface.</a> Reviews in Mineralogy and Geochemistry. 75 (1), 467-494 (2013).</li>
<li>Foustoukos, D. I., Seyfried, W. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hydrocarbons+in+Hydrothermal+Vent+Fluids%3A+The+Role+of+Chromium-Bearing+Catalysts%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Hydrocarbons in Hydrothermal Vent Fluids: The Role of Chromium-Bearing Catalysts.</a> Science. 304 (5673), 1002(2004).</li>
<li>Bell, J. L. S., Palmer, D. A. 10.1007/978-3-642-78356-2_9. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aBell%2C+JLS+%22Organic+Acids+in+Geological+Processes%22">Organic Acids in Geological Processes</a>. Pittman, E. D., Lewan, M. D. , Springer. Berlin Heidelberg. 226-269 (1994).</li>
<li>Palmer, D. A., Drummond, S. E. <a target="_blank" href="https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/0016703786903571">Thermal decarboxylation of acetate. Part I. The kinetics and mechanism of reaction in aqueous solution.</a> Geochimica et Cosmochimica Acta. 50 (5), 813-823 (1986).</li>
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<li>McCollom, T. M., Ritter, G., Simoneit, B. R. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lipid+Synthesis+Under+Hydrothermal+Conditions+by+Fischer-+Tropsch-Type+Reactions%5BTitle%5D)+AND+%22Origins+of+life+and+evolution+of+the+biosphere%22%5BJournal%5D)">Lipid Synthesis Under Hydrothermal Conditions by Fischer- Tropsch-Type Reactions.</a> Origins of life and evolution of the biosphere. 29 (2), 153-166 (1999).</li>
<li>Bell, J. L. S., Palmer, D. A., Barnes, H. L., Drummond, S. E. <a target="_blank" href="https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/0016703794902712">Thermal decomposition of acetate: III. Catalysis by mineral surfaces.</a> Geochimica et Cosmochimica Acta. 58 (19), 4155-4177 (1994).</li>
<li>Yang, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hydrothermal+Photochemistry+as+a+Mechanistic+Tool+in+Organic+Geochemistry%3A+The+Chemistry+of+Dibenzyl+Ketone%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Organic+Chemistry%22%5BJournal%5D)">Hydrothermal Photochemistry as a Mechanistic Tool in Organic Geochemistry: The Chemistry of Dibenzyl Ketone.</a> The Journal of Organic Chemistry. 79 (17), 7861-7871 (2014).</li>
<li>Yang, Z., Hartnett, H. E., Shock, E. L., Gould, I. R. <a target="_blank" href="https://pubs.acs.org/doi/abs/10.1021/acs.joc.5b02109">Organic Oxidations Using Geomimicry.</a> The Journal of Organic Chemistry. 80 (24), 12159-12165 (2015).</li>
<li>Venturi, S., et al. <a target="_blank" href="https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0377027317303165">Mineral-assisted production of benzene under hydrothermal conditions: Insights from experimental studies on C6 cyclic hydrocarbons.</a> Journal of Volcanology and Geothermal Research. 346, 21-27 (2017).</li>
<li>Lemke, K. H., Rosenbauer, R. J., Bird, D. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Peptide+Synthesis+in+Early+Earth+Hydrothermal+Systems%5BTitle%5D)+AND+%22Astrobiology%22%5BJournal%5D)">Peptide Synthesis in Early Earth Hydrothermal Systems.</a> Astrobiology. 9 (2), 141-146 (2009).</li>
<li>Byrappa, K., Yoshimura, M. <a target="_blank" href="https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/B9780815514459500040">Handbook of Hydrothermal Technology</a>. , William Andrew Publishing. (2001).</li>
<li>Johnson, J. W., Oelkers, E. H., Helgeson, H. C. <a target="_blank" href="https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/009830049290029Q">SUPCRT92: A software package for calculating the standard molal thermodynamic properties of minerals, gases, aqueous species, and reactions from 1 to 5000 bar and 0 to 1000°C.</a> Computers & Geosciences. 18 (7), 899-947 (1992).</li>
</ol>

作者无任何利益冲突需要披露。

在本研究中，我们以硝基苯与矿物磁铁矿为例，演示如何评估矿物对水热有机反应的影响。尽管实验是在小型石英玻璃管中进行的，磁铁矿实验仍表现出高度可重复的结果。 即， 30.3 ± 1.4% 的硝基苯转化率，表明该水热实验方案具有有效性和可靠性。在无矿物实验中，硝基苯的转化率为 5.2 ± 2.1%，其重现性低于含矿物实验。无矿物实验中相对较高的不确定性可能是由于起始物料转化率较低，考虑到小反应管中所用样品体积仅为 µL（或质量为 mg）量级。为提高低转化反应的重现性，建议使用内体积更大的石英管。该方案特别适用于样品量有限或化学品成本较高的小规模实验。本方案可同时用于含矿物和不含矿物的水热实验。
如前所述，该水热法相较于其他传统方法具有一些优势，例如反应管成本低、操作简便，以及催化效应低或可忽略不计11,14。然而，由于矿物强度和稳定性有限，石英管在温度高于450 °C或压力高于400 bar时可能发生破裂15</sup...

水热环境（即高温高压下的水相介质）在地球上广泛存在。有机化合物的水热化学在多种地球化学环境中起着至关重要的作用，例如有机沉积盆地、石油储层以及深部生物圈1,2,3。水热体系中有机碳的转化不仅发生在纯水相介质中，还可能伴随溶解态或固态的无机物质（如地壳中丰富的矿物）共同发生。1,4,5 研究发现，矿物可显著且选择性地影响多种有机化合物的水热反应活性，但在复杂的水热体系中如何准确识别矿物效应仍是一个挑战。本研究旨在提供一种相对简单的实验方案，用于研究矿物对水热有机反应的影响。
水热反应的实验室研究传统上使用由金、钛或不锈钢制成的坚固反应器6,7,8,9。例如，金袋或金胶囊因其良好的延展性而被广泛使用，它可通过外部加压水来控制样品压力，从而避免样品内部产生气相。然而，这些反应器成本较高，且可能存在金属催化效应的风险10。因此，迫切需要为这类水热实验开发一种低成本但高可靠性的替代方法。
近年来，石英或熔融石英玻璃制成的反应管在水热实验中的应用日益广泛11,12,13与昂贵的金或钛相比，石英或二氧化硅玻璃价格显著更低，但同样是一种坚固的材料。更重要的是，石英管在水热反应中表现出极低的催化效应，其惰性可与金相媲美。11,14在本方案中，我们描述了一种在厚壁石英管中进行小规模水热有机-矿物实验的通用方法。我们以一种模型化合物为例，展示了一个具体的实验过程。即， 硝基苯）在有/无氧化铁矿物存在下的情况即， 磁铁矿）置于150 °C的水热溶液中，以展示矿物效应并证明该方法的有效性。

<table><tbody><tr><td>&lt;strong&gt;化学品：&lt;/strong&gt;</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>二氯甲烷</td><td>VWR</td><td>BDH23373.400</td><td></td></tr><tr><td>十二烷</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>297879</td><td></td></tr><tr><td>硝基苯</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>252379</td><td></td></tr><tr><td>Fe&lt;sub&gt;2&lt;/sub&gt;O&lt;sub&gt;3&lt;/sub&gt;</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>310050</td><td></td></tr><tr><td>Fe&lt;sub&gt;3&lt;/sub&gt;O&lt;sub&gt;4&lt;/sub&gt;</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>637106</td><td></td></tr><tr><td>&lt;strong&gt;耗材：&lt;/strong&gt;</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>硅胶管</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>真空泵</td><td>WELCH</td><td>2546B-01</td><td></td></tr><tr><td>真空管线</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>烘箱</td><td>Hewlett Packard</td><td>5890</td><td></td></tr><tr><td>热电偶</td><td>BENETECH</td><td>GM1312</td><td></td></tr><tr><td>气相色谱仪</td><td>Agilent</td><td>7820A</td><td></td></tr></tbody></table>

一种研究矿物对有机物热液转化影响的实验方案

An Experimental Protocol for Studying Mineral Effects on Organic Hydrothermal Transformations

有机质与矿物的相互作用广泛存在于热液环境中，例如陆地上的温泉、间歇泉以及深海热液喷口。在许多热液有机地球化学过程中，矿物起着关键作用。传统的热液实验方法通常使用金、钛、铂或不锈钢制成的反应器，但这类方法往往成本较高，或会引入不期望的金属催化效应。近年来，越来越多的研究倾向于采用成本较低且化学性质惰性的石英或熔融二氧化硅玻璃管进行热液实验。本文提供了一种在二氧化硅管中开展有机质-矿物热液实验的方案，并详细描述了样品制备、实验装置搭建、产物分离及定量分析等关键步骤。我们还通过一个模型有机化合物——硝基苯的实验，展示了含铁矿物磁铁矿在特定热液条件下对其降解过程的影响。该技术可用于在相对简单的实验室体系中研究复杂的有机质-矿物热液相互作用。

为展示如何利用该方法研究热液条件下有机物与矿物的相互作用，本文采用模型化合物硝基苯，在150 °C、5 bar、反应2小时的热液条件下，与磁铁矿（Fe3O4）进行了一个简单的实验。为对比矿物的影响，在相同热液条件下还开展了不含矿物的硝基苯对照实验。如图1a所示，按照热液实验前的既定方案制备了两根石英管。未添加矿物的密封管保持透明，而含磁铁矿的石英管内部呈现黑色矿物颜色。两组实验中硝基苯的初始浓度均为0.1 M（溶于0.3 mL去离子且脱氧的水中），加入的磁铁矿质量为13.9 mg。热液反应结束后，未添加矿物的石英管未发生颜色变化，而含磁铁矿的石英管变为棕色（图1b），表明磁铁矿可能发生了氧化反应生成赤铁矿（Fe2O3）。根据气相色谱分析结果，通过比较两组实验中硝基苯的转化率揭示了磁铁矿的作用（图2）。在不含矿...

在天然热液系统中，地球富含的矿物起着重要作用。本文介绍了一种可靠且经济高效的方法，用于在热液条件下实验研究有机物与矿物之间的相互作用。

有机质-矿物相互作用广泛存在于热液环境中，例如陆地上的温泉、间歇泉以及深海热液喷口……

该方法有助于解答有机化学领域的一些关键问题，例如，地壳中丰富的矿物如何影响深海热液系统中的有机分子。该技术的主要优势在于成本低、操作简便且结果可靠。尽管该方法可用于研究天然热液系统中有机物与矿物之间的相互作用，也可应用于其他领域，例如有机面筋的水热处理，或绿色化学中的生物融合水热合成。本实验操作将由我实验室的Dr.Xuan Fu进行演示。开始此操作前，请根据文本方案中所述内容，选择合适尺寸和材质的管子，并确定所用有机化合物和矿物的用量。本演示实验将采用硝基苯和磁铁矿，装入内径为2毫米、外径为6毫米的硅胶管中进行。使用管子切割器将管材切成约30厘米长的小段。然后，使用带有合适火焰头的氢氧火炬将管的一端熔封封闭。如果起始的有机化合物中有液体，应使用微升注射器将其转移至管中。使用巴斯德移液管加入预先称重的材料。然后加入去离子且脱氧的水。将试管连接至带有闭合阀门的真空管线。使用夹具牢固地夹住试管，并将其浸入装有液氮的杜瓦瓶中。将试管在液氮中保持约三分钟，直至有机物和水完全冻结。在试管仍浸于液氮中的同时，打开真空阀，以抽除试管顶空中的空气。此后，关闭阀门。将试管从液氮中取出，并使其升温至室温。当试管升温后，轻轻敲击试管底部，以释放溶液中残留的任何气泡进入顶空。重复此冷冻、抽气、解冻循环再两次。然后，在试管仍浸于液氮中时，关闭真空管路，并使用氢氧焰喷灯将试管的开口端熔封。试管密封后，将其转移至带有螺纹帽的小型钢管中。将螺口盖轻轻拧紧，以防止因压力积聚或管体破裂造成损坏。将反应管放入控温炉或烘箱中，并加热至所需温度。在烘箱内使用热电偶监测整个水热反应过程中的温度。一旦达到反应时间，立即从烘箱中取出反应管，并将试管放入冷水中以终止实验。首先，配制含有8.8微摩尔十二烷（作为气相色谱内标物）的二氯甲烷萃取溶液。取3毫升该萃取溶液转移至10毫升玻璃小瓶中。然后，使用管子切割器打开试管，并用巴斯德移液管迅速将全部产物转移至玻璃小瓶中。接着，将溶液涡旋振荡一分钟。静置五分钟，使矿物颗粒沉淀。此后，使用巴斯德移液管小心地从二氯甲烷层中转移约一毫升样品至气相色谱小瓶中。按照文本方案所述，采用聚毛细管柱和火焰离子化检测器，通过气相色谱分析产物分布。建立气相色谱校准曲线，并利用其对有机产物进行定量。然后，根据文本方案中所述的方法计算反应转化率。利用这些转化率来确定矿物是促进还是抑制了水热条件下的有机转化。本文以硝基苯与磁铁矿在150摄氏度、5巴的水热条件下反应两小时为例，展示了研究水热条件下有机物-矿物相互作用的这一方法。水热反应后，不含磁铁矿的试管未显示颜色变化，而含有磁铁矿的试管则变为棕色。这表明发生了氧化反应，磁铁矿被转化为赤铁矿。随后通过气相色谱分析，测定磁铁矿对硝基苯转化的影响程度。在无矿物实验中，硝基苯的计算转化率为5.2%。然而，在磁铁矿存在下，硝基苯的转化率达到30.3%，提高了六倍。这表明磁铁矿在所采用的水热条件下可显著促进硝基苯的反应。在进行该操作时，务必牢记遵循使用氢氧焰炬的标准操作程序。因此，按照此方案，还可进行其他分析方法，如扫描电子显微镜和气相色谱-质谱联用分析，以回答更多问题，例如矿物的形貌是否发生变化，以及未知有机产物的分子质量是多少。该技术建立后，为从事水热有机化学领域的研究人员探索天然水热体系中有机物与矿物相互作用开辟了道路。

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