Name: 应用短暂的中脑动脉闭塞小鼠模型评价甘草提取物的神经保护作用 (视频) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-12-09T13:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 53 s
Description: 了解短暂性中脑动脉闭塞小鼠模型的建立方法，用于评价甘草提取物GRex的神经保护作用。该方法可显著减少脑梗死体积，为脑卒中研究和天然化合物筛选提供可靠实验手段。

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所有涉及动物的实验程序均经釜山国立大学伦理委员会批准（批准编号：PNU-2016-1087）。本研究的图示概览见图1。
1. GRex 的制备与给药
注意：本研究中使用的 GR 来自一家商业制药公司。
<ol>
	<li>将200 g GR加入2,000 mL甲醇中，于室温（25 °C）孵育5天。</li>
	<li>使用厚度为0.26 mm、孔径为5 µm的滤纸过滤混合物，然后弃去上清液。向GR残留物中加入1,000 mL甲醇，再次过滤。</li>
	<li>合并两次上清液，经滤纸过滤，减压浓缩后冷冻干燥残余物，得到GRex。</li>
	<li>将GRex溶于二甲基亚砜（DMSO）中，用0.9%生理盐水稀释，并通过0.45 µm针式滤器过滤。然后将DMSO的终浓度调整至 &#60; 5%.</li>
	<li>在MCAO再灌注后1小时给予GRex（300 mg/kg体重） 通过 灌胃。仅对正常组和对照组分别给予生理盐水稀释的DMSO（10 mL/kg体重）。 
	注意：本实验中使用的GRex浓度是根据我们先前研究中显示具有活性的浓度确定的8.</li>
</ol>
2. 大脑中动脉阻塞小鼠模型
<ol>
	<li>使用6周龄、体重22-25 g的雄性C57BL/6小鼠。所有动物均可自由摄取标准饲料和水，并饲养于温度受控（22 ± 1 °C）且具有12小时光照/黑暗循环的环境中。
	<ol>
		<li>将小鼠分为每组6只的小鼠组，包括假手术正常组、对照组和GRex处理组。</li>
		<li>在对照组和GRex处理组中，使用体视显微镜进行MCAO手术（改良Koizumi等9的方法）。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>使用含2%异氟烷的70% N2O和30% O2混合气体诱导小鼠吸入麻醉。当小鼠对尾部施加的机械刺激无反应时，视为麻醉充分。使用连接体温计的保温毯将小鼠体温维持在36.5 ± 0.5 °C。</li>
	<li>先剃除小鼠胸部和颈部的毛发，再使用脱毛膏彻底去除残留毛发；用聚维酮碘溶液与酒精交替擦拭手术区域皮肤两次进行消毒；然后用手术刀在颈部中央做一条长约2 cm的切口。仔细分离左侧颈总动脉（LCCA）、颈外动脉以及颈内动脉分支周围的结缔组织。</li>
	<li>用手术缝线（4-0丝线，半结扎法）结扎颈外动脉和颈总动脉，以在手术期间暂时阻断血流进入颈内动脉。</li>
	<li>将一根硅胶包被的尼龙缝线（8-0单股，长11 mm）经颈内动脉插入至左侧大脑中动脉（MCA）起始部。调整缝线硅胶包被部分的直径至0.10–0.12 mm范围内。</li>
	<li>使用激光多普勒血流仪测量MCA区域相对脑血流量（rCBF）的下降情况。当缺血期间rCBF持续维持在静息状态值的&#60; 20%时，即可确认MCAO成功。</li>
	<li>在脑动脉闭塞期间，将插入的缝线固定于血管内2小时，随后小心撤出缝线以恢复血流，进行22小时的再灌注。用缝合线在5个位置缝合皮肤（3-0丝线，双半结扎法），并让每只小鼠从麻醉中自然苏醒。</li>
	<li>对于正常组，执行假手术操作，步骤同上（至第2.4步），但有以下例外：仅结扎颈总动脉，然后缝合切开的肌肉和皮肤。</li>
</ol>
3. 损伤脑组织体积的测量
<ol>
	<li>小鼠经 CO2 吸入法安乐死后，于大脑中动脉闭塞（MCAO）发作 24 小时后，使用虹膜手术剪和弯头镊子取出小鼠脑组织。
	<ol>
		<li>使用剪刀去除头部后，沿头部正中皮肤切开，将皮肤从颅骨上翻起。</li>
		<li>用弯头镊子敲开顶骨，同时剥离硬脑膜，然后小心地将脑组织从颅骨中分离出来。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>使用小鼠脑切片模具将取出的脑组织切成 1 mm 厚的切片，随后将切片浸入 2% 2,3,5-三苯基四氮唑氯化物（TTC）溶液中染色 17 分钟。</li>
	<li>将切片置于 10% 甲醛溶液中固定至少 2 小时，然后使用数码相机拍照。TTC 会将存活组织染成红色，而坏死区域则呈白色。</li>
	<li>使用 ImageJ 软件分析并量化每一切片的脑梗死面积。</li>
</ol>
4. 组织切片的苏木精和伊红（H&amp;#38;E）染色与焦油紫染色
<ol>
	<li>通过吸入 CO2 处死小鼠用于组织学研究，并经心脏灌注 10 mL 磷酸盐缓冲液（PBS），随后灌注 10 mL 4% 多聚甲醛（PFA）。采用与上述相同的方法（3.1）分离脑组织，并将脑组织浸入 10 mL 30% 蔗糖溶液中过夜。</li>
	<li>将脑组织包埋于最佳切割温度（OCT）包埋剂中，使用冷冻切片机冠状切片，厚度为 15 µm。将切片贴附于玻璃载玻片上，随后进行苏木精-伊红（H&amp;#38;E）或焦油紫染色。</li>
	<li>将玻璃载玻片浸入 80% 乙醇中 1 分钟，随后在苏木精染液中染色 5 分钟。
	<ol>
		<li>将载玻片浸入 1% 酸性乙醇中两次，再浸入饱和碳酸锂溶液中 30 秒，用自来水冲洗 30 秒，然后在伊红染液中复染 30 秒。</li>
		<li>用自来水冲洗载玻片，依次浸入 95% 乙醇和无水乙醇中。</li>
		<li>将载玻片自然晾干，用二甲苯透明至少 10 分钟，然后使用封片剂加盖盖玻片。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>将玻璃载玻片置于载玻片加热板上至少 1 小时，随后浸入用氯仿稀释的 50% 乙醇中过夜。
	<ol>
		<li>在 40 °C 干燥烘箱中用 0.1% 焦油紫染色 10 分钟。</li>
		<li>浸入 95% 乙醇中 30 分钟，然后在无水乙醇中脱水两次。</li>
		<li>用二甲苯透明两次，每次 5 分钟，待自然晾干后使用封片剂封片。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>使用显微镜观察 MCAO 诱导脑损伤后发生的组织学变化。</li>
</ol>
5. 统计分析
<ol>
	<li>使用数据分析软件，以单因素方差分析（ANOVA）结合 Tukey's post hoc 检验，将实验结果表示为均值 ± 标准差，并确定各组之间的统计学显著性。</li>
	<li>将统计学显著性设定为 p 值 &#60; 0.05。</li>
</ol>

<ol><li>Bejot, Y., Delpont, B., Giroud, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rising+stroke+incidence+in+young+adults%3A+more+epidemiological+evidence%2C+more+questions+to+be+answered%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+American+Heart+Association%22%5BJournal%5D)">Rising stroke incidence in young adults: more epidemiological evidence, more questions to be answered.</a> Journal of the American Heart Association. 11 (5), (2016).</li>
<li>Hadadha, M., Vakili, A., Bandegi, A. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+the+inhibition+of+hydrogen+sulfide+synthesis+on+ischemic+injury+and+oxidative+stress+biomarkers+in+a+transient+model+of+focal+cerebral+ischemia+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Stroke+and+Cerebrovascular+Diseases%22%5BJournal%5D)">Effect of the inhibition of hydrogen sulfide synthesis on ischemic injury and oxidative stress biomarkers in a transient model of focal cerebral ischemia in rats.</a> Journal of Stroke and Cerebrovascular Diseases. 24 (12), 2676-2684 (2015).</li>
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<li>O'Collins, V. E., Donnan, G. A., Howells, D. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((History+of+animal+models+of+stroke%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Stroke%22%5BJournal%5D)">History of animal models of stroke.</a> International Journal of Stroke. 6 (1), 77-78 (2011).</li>
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</ol>

作者无任何利益冲突需要披露。

随着慢性高血压、糖尿病和高脂血症等代谢性疾病发病率的不断上升，这些疾病作为脑卒中的主要危险因素，使得脑卒中的预防与治疗已成为医学研究的重要领域12,13。脑卒中后出现的语言和运动功能障碍与脑组织损伤程度密切相关14，严重影响患者及其家庭的生活质量15。为了评估药物治疗的效果，必须采用能够模拟人类疾病相同病理变化的合适动物模型。大脑中动脉闭塞（MCAO）模型通过阻断脑动脉血管来模拟血栓性脑卒中，因其具有较高的可重复性和较低的侵入性，被广泛应用于研究中16,17,18,19。
然而，比较不同研究人员报道的相同静息时间下诱导...

脑血流缺血和再灌注引起的脑损伤会导致神经细胞死亡和脑组织丧失。随着肥胖、高血压和糖尿病等代谢性疾病的蔓延，脑血管疾病的发病率不断上升，此类脑损伤的绝对数量也随之持续增加1,2。全球范围内，脑卒中老年患者的绝对人数显著增加，而这些患者常遗留长期残疾，其医疗照护成本已成为重大的社会负担。因此，应尽可能减轻继发性残疾，以降低经济负担1,2。
最常用的大脑梗死啮齿类动物模型是大脑中动脉（MCA）闭塞（MCAO）模型，该模型通过使用硅胶包被的外科缝合丝线闭塞大脑中动脉以阻断血流，从而引起缺血性脑卒中3,4。采用丝线作为闭塞材料，可通过调节丝线在血管内插入的持续时间，来控制闭塞的时间和永久性。
既往研究表明，即使采用相同的啮齿类动物MCAO模型，不同实验之间的脑梗死总体积仍存在差异，导致研究的可重复性较低。为提高可重复性，我们优化了实验中所用栓线的直径。对脑缺血时间与诱导梗死范围的初步研究结果显示，缺血时间超过60 min时，可观察并定量受损脑组织的体积区域。
甘草（GR），又称甘草根与根茎，由甘草（Glycyrrhiza uralensis）和光果甘草（G.&#160;glabra）的干燥根及根茎组成。其在中医和韩国传统医学中被广泛用于多种用途，包括作为食品添加剂以及药用5,6,7。
在之前的一项研究8中，预先使用人参甲醇提取物（GRex）处理显示出对MCAO小鼠具有抗凋亡作用，包括显著防止B细胞淋巴瘤2蛋白（Bcl-2）和Bcl超大蛋白（Bcl-xL）表达水平的下降。本研究旨在通过评估GRex在梗死后治疗中是否能有效减少MCAO诱导的脑损伤中的梗死体积，从而提高传统MCAO小鼠模型的可重复性。

<table><tbody><tr><td>甘草根与根茎</td><td>Gwangmyoung Pharmaceuticals Co., Korea</td><td></td><td>甘草根与根茎</td></tr><tr><td>定性滤纸</td><td>Advantec</td><td>Filter paper No. 2</td><td>定性滤纸</td></tr><tr><td>二甲基亚砜（DMSO）</td><td>Sigma</td><td>D8418-250ML</td><td>二甲基亚砜（DMSO）</td></tr><tr><td>注射器滤器（0.45 &amp;micro;m）</td><td>Sigma</td><td>CLS431220</td><td>注射器滤器（0.45 &amp;micro;m）</td></tr><tr><td>体视显微镜</td><td>Leica</td><td>M50</td><td>体视显微镜</td></tr><tr><td>体视显微镜</td><td>Nikon</td><td>SMZ745</td><td>体视显微镜</td></tr><tr><td>激光多普勒血流仪</td><td>Moor Instrument</td><td>moorVMS-LDF</td><td>激光多普勒血流仪</td></tr><tr><td>带N2O&amp;O2流量计系统的麻醉台架</td><td>Harvard Appratus</td><td>34-1352</td><td>带N2O&amp;O2流量计系统的麻醉台架</td></tr><tr><td>恒温监测系统</td><td>Harvard Appratus</td><td>55-7020</td><td>恒温监测系统</td></tr><tr><td>数码相机</td><td>Canon</td><td>Eos-M2</td><td>数码相机</td></tr><tr><td>冷冻切片机</td><td>Leica</td><td>CM3050S</td><td>冷冻切片机</td></tr><tr><td>显微镜</td><td>Carl Zeiss</td><td>Zeiss Axio</td><td>显微镜</td></tr><tr><td>数据分析软件</td><td>Systat Software Inc.</td><td>SigmaPlot version 12</td><td>数据分析软件</td></tr><tr><td>数据分析软件</td><td>NIH Image</td><td>ImageJ</td><td>数据分析软件</td></tr><tr><td>小鼠饲料</td><td>Doo Yeol Biotech</td><td>标准啮齿类动物饲料</td><td>小鼠饲料</td></tr><tr><td>异氟烷</td><td>JOONGWAE</td><td>A02104781</td><td>异氟烷</td></tr><tr><td>异氟烷</td><td>TROIKAA</td><td>ISOTROY 100</td><td>异氟烷</td></tr><tr><td>丝线缝合线（4-0黑色丝线）&amp;nbsp;</td><td>AILEE</td><td>SK47510</td><td>丝线缝合线（4-0黑色丝线）&amp;nbsp;</td></tr><tr><td>丝线缝合线（3-0白色丝线）&amp;nbsp;</td><td>Baekjae</td><td>57</td><td>丝线缝合线（3-0白色丝线）&amp;nbsp;</td></tr><tr><td>尼龙缝合线（8-0单股）&amp;nbsp;</td><td>AILEE</td><td>NB825</td><td>尼龙缝合线（8-0单股）&amp;nbsp;</td></tr><tr><td>2,3,5-三苯基氯化四氮唑（TTC）</td><td>Sigma</td><td>T8877-25G</td><td>2,3,5-三苯基氯化四氮唑（TTC）</td></tr><tr><td>福尔马林（甲醛溶液）</td><td>JUNSEI</td><td>69360-1263 20KG</td><td>福尔马林（甲醛溶液）</td></tr><tr><td>苏木精（Harris苏木精）</td><td>YD Diagnostics</td><td>EasyStain</td><td>苏木精（Harris苏木精）</td></tr><tr><td>伊红（1%伊红Y溶液）</td><td>MUTO PURE CHEMICALS</td><td>3200-2</td><td>伊红（1%伊红Y溶液）</td></tr><tr><td>焦油紫（醋酸盐）</td><td>Sigma</td><td>C5042-10G</td><td>焦油紫（醋酸盐）</td></tr><tr><td>多聚甲醛&amp;nbsp;</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>P6148-1KG</td><td>多聚甲醛&amp;nbsp;</td></tr><tr><td>蔗糖</td><td>JUNSEI</td><td>31365-0350 1KG</td><td>蔗糖</td></tr><tr><td>最佳切割温度（OCT）包埋剂</td><td>Scigen</td><td>4583</td><td>最佳切割温度（OCT）包埋剂</td></tr><tr><td>解剖刀</td><td>Fine Science Tools</td><td>10055-12</td><td>解剖刀</td></tr><tr><td>#4镊子</td><td>Fine Science Tools</td><td>11241-30</td><td>#4镊子</td></tr><tr><td>#5镊子</td><td>Fine Science Tools</td><td>11254-20</td><td>#5镊子</td></tr><tr><td>#6镊子</td><td>Fine Science Tools</td><td>11260-20</td><td>#6镊子</td></tr><tr><td>#7精细镊子</td><td>Fine Science Tools</td><td>11274-20</td><td>#7精细镊子</td></tr><tr><td>手术剪</td><td>Fine Science Tools</td><td>14001-12</td><td>手术剪</td></tr><tr><td>超精细波恩剪</td><td>Fine Science Tools</td><td>14084-08</td><td>超精细波恩剪</td></tr><tr><td>Moria Pascheff-Wolff弹簧剪</td><td>Fine Science Tools</td><td>15371-92</td><td>Moria Pascheff-Wolff弹簧剪</td></tr><tr><td>血管扩张镊</td><td>Fine Science Tools</td><td>18153-11</td><td>血管扩张镊</td></tr></tbody></table>

利用短暂性大脑中动脉闭塞小鼠模型评估甘草根及根茎提取物的神经保护作用

Assessing Neuroprotective Effects of Glycyrrhizae Radix et Rhizoma Extract Using a Transient Middle Cerebral Artery Occlusion Mouse Model

脑卒中后脑血流缺血再灌注会导致神经细胞死亡和脑组织丧失。研究脑卒中最常用的动物模型是大脑中动脉闭塞（MCAO）模型。既往研究报道，即使在相同实验动物种类和相似MCAO条件下，梗死体积仍存在差异。因此，我们建立了一种改进的实验方法以解决这一差异。采用尼龙线作为闭塞材料对小鼠实施MCAO，以模拟人类脑卒中情况，并通过优化尼龙线直径以获得更可重复的梗死体积。脑卒中诱导后给予甘草根及根茎甲醇提取物（GRex）处理的小鼠，其总梗死体积显著减小，存活细胞数量较未治疗对照组明显增加。该改良实验方案成功且可重复地证明了GRex对缺血性脑卒中的保护作用。

在假手术正常组中，未观察到脑梗死，而在对照组中，观察到较广泛的损伤区域。在大脑中动脉阻塞（MCAO）模型组中给予300 mg/kg GRex的小鼠，其损伤区域显著减小，差异具有统计学意义（图2）。
通过苏木精-伊红（H&amp;E）或焦油紫染色对缺血性脑组织切片进行染色，以观察其组织学变化。H&amp;E 染色可提供细胞的结构信息及特定功能信息10，而焦油紫染色则用于估算海马区神经元的总数11。因此，使用 ImageJ 软件测得的 H&amp;E 或焦油紫染色强度（图 3A）可作为细胞存活的指标。与正常组相比，对照组的 H&amp;E 和焦油紫染色强度显著降低（图 ...

本研究通过建立大脑中动脉闭塞（MCAO）小鼠模型，改进了现有的实验方法，以获得更可重复的实验结果。在诱导脑卒中后口服甘草根及根茎（GR）甲醇提取物（GRex），与未治疗的对照组相比，显著降低了总体梗死体积。

中风后脑血流发生缺血并继而再灌注，可导致神经细胞死亡和脑组织丧失。最常用的……

该方法有助于回答神经科学和传统口腔医学研究领域中的关键问题，即针对该模型筛选具有神经保护作用的天然化合物。该技术的主要优势在于，感染体积的可重复性更高，且与缺血的时间剂量相一致。该方法的可视化演示至关重要，因为通常需要在无菌显微镜下将一种非常细小的器械插入到小脑中动脉的起始部位。演示该实验操作的是在我实验室学习的中学生李世恩（Se-Eun Lee）。制备甘草根与根茎提取物（Glycyrrhizae Radix et Rhizome extract，简称GRex）时，首先将200克甘草根与根茎（Glycyrrhizae Radix et Rhizome，简称GR）加入2升甲醇中，在室温下孵育5天。孵育结束后，使用孔径为5微米、厚度为0.26毫米的滤纸过滤溶液。将GR残渣加入一升新鲜甲醇中，再次过滤溶液。合并两次滤液，并通过新的滤纸进行过滤。然后在减压条件下浓缩提取物，再经冷冻干燥得到GRex。为准备GRex的给药，将冻干产品溶解于二甲基亚砜中，并用0.9%生理盐水稀释混合物。随后通过0.45微米注射器滤器过滤溶液，并将DMSO的最终浓度调整至低于5%。为建立小鼠大脑中动脉闭塞模型（MCAO），首先确认一只6周龄、体重22至25克的雄性C57BL/6小鼠在麻醉后对尾部刺激无反应，然后将其置于连接体温计的36.5摄氏度恒温保温毯上。使用剃毛和脱毛膏彻底清除小鼠胸部和颈部的毛发后，将小鼠置于体视显微镜下，在颈部中央做一道2厘米长的皮肤切口。仔细分离左侧颈总动脉、颈外动脉以及颈内动脉的分支，使其与周围结缔组织分开，使用4.0丝线缝合线以半结方式结扎颈外动脉和颈总动脉，暂时阻断血流进入颈内动脉。将一根厚度为0.1至0.12毫米、长度为11毫米、表面涂有硅胶的8.0单丝4.0丝线缝合线经颈内动脉插入至左侧大脑中动脉起始处，并使用激光多普勒血流仪测量脑血流的相对下降。在脑动脉闭塞期间，将插入的缝合线固定于血管上持续两小时。在阻塞期结束时，小心撤出缝线以恢复血流，进行22小时的再灌注。使用3.0丝线缝合线，在五个位置以两个半结结扎法缝合皮肤。然后将小鼠放回笼中，使其从麻醉中恢复。再灌注结束后1小时，仅通过口服灌胃向实验动物给予300毫克/千克体重的GRex。MCAO开始后24小时，对每只实验动物头部中线皮肤做切口，用弯头镊子击穿顶骨，并剥离硬脑膜。小心地将脑组织从颅骨中分离，使用小鼠脑组织切片模具将切除的组织切成1毫米厚的切片。根据标准操作规程，将切片置于2%TTC溶液中染色17分钟。染色后，用10%福尔马林固定切片至少2小时，然后使用数码相机对样本进行成像。随后使用ImageJ分析并定量每张切片的脑梗死面积。在MCAO术后适当的实验时间点，对每只实施安乐死的实验动物进行经心脏灌注，先灌注10毫升PBS，随后灌注10毫升4%多聚甲醛。按照上述方法分离脑组织后，将获取的器官浸泡

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应用短暂的中脑动脉闭塞小鼠模型评价甘草提取物的神经保护作用

大脑中动脉（MCA）结扎是一种用于在动物模型中研究局灶性脑缺血的技术。该方法通过开颅暴露大脑中动脉，并采用电凝法进行结扎。与其他现有方法相比，该技术可获得高度可重复的梗死体积，并提高术后存活率。...

小鼠永久性大脑中动脉结扎的应用

来源：Zheng, Y., 等．研究酸性后处理对脑缺血神经保护作用的实验模型．J. Vis. Exp.

评估酸性后处理在脑缺血小鼠模型中的神经保护作用

来源：Lee, S. E., 等。利用短暂性大脑中动脉闭塞小鼠模型评估甘草根及根茎提取物的神经保护作用。J. Vis. Exp.

评估测试化合物在小鼠大脑中动脉闭塞模型中的神经保护作用

本方案描述了重复性缺氧预处理，即短暂暴露于全身性缺氧，可减少小鼠短暂性大脑中动脉闭塞后脑梗死体积及血脑屏障的破坏。同时，本文还详细说明了脑卒中后脑梗死体积与血脑屏障破坏的双重定量方法，以评估神经血管保护作用的疗效。...

重复性缺氧预处理及小鼠短暂性大脑中动脉闭塞后神经血管保护作用的量化

为了理解脑卒中的病理生理学机制，使用可靠的模型至关重要。本文将介绍小鼠中最常用的脑卒中模型之一，即大脑中动脉闭塞（MCAo）模型（也称为血管内丝线或缝线模型），并包含再灌注过程。...

小鼠大脑中动脉闭塞与再灌注诱导脑卒中的手术方法

远端大脑中动脉分支的手术阻塞（MCAo）是实验性卒中研究中常用的一种模型。本文描述了永久性MCAo的基本技术，并结合了侧颅窗的植入，从而为小鼠的长期活体显微成像提供了可能。...

侧向慢性颅窗制备可实现小鼠远端大脑中动脉闭塞后体内观察

我们描述了一种通过使用硅胶包被的缝合线阻塞大脑中动脉来诱导小鼠脑卒中的模型。该方案可用于诱导永久性阻塞，或诱导短暂性缺血后进行再灌注。...

采用大脑中动脉阻塞技术诱导小鼠缺血性卒中与缺血-再灌注及梗死区域的可视化

本文介绍了一种通过暂时性双侧颈总动脉结扎并结合夹闭法建立的小鼠视网膜缺血模型。该模型有助于理解由心血管异常引发的视网膜缺血的病理机制。...

一种通过短暂双侧颈总动脉阻塞诱导的缺血性视网膜损伤小鼠模型

本方案展示了一种具有中等大小梗死灶且存活率极佳的独特小鼠卒中模型。该模型可使临床前卒中研究者延长缺血时间、使用老龄小鼠，并评估长期功能学结果。...

一种改良的经颅大脑中动脉阻塞模型用于研究老年小鼠的中风结局

本文介绍了一种通过经颅电凝法在C57BL/6J小鼠中建立远端大脑中动脉阻塞（dMCAO）模型的实验方案，并对随后的神经行为学表现及组织病理学特征进行评估。...

采用远端中动脉阻塞技术诱导小鼠急性缺血性脑卒中

了解短暂性中脑动脉闭塞小鼠模型的建立方法，用于评价甘草提取物GRex的神经保护作用。该方法可显著减少脑梗死体积，为脑卒中研究和天然化合物筛选提供可靠实验手段。

利用短暂性大脑中动脉闭塞小鼠模型评估甘草根及根茎提取物的神经保护作用

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