经颈静脉穿刺作为大鼠采血的替代方法

锁骨下静脉穿刺作为大鼠采血的替代方法。全身麻醉后，将大鼠置于仰卧位，用75%乙醇对锁骨下区域进行消毒。穿刺前确定胸骨上窝位置。

确定穿刺部位，位于同侧锁骨外三分之一段的尾侧。针头方向应朝向胸骨上窝，且几乎与锁骨平行，紧靠其后方。采血后，按压穿刺部位一至两分钟，以止血。

在动物实验中，始终需要采集足够体积的血液。大鼠尾静脉采血是一种常用方法，相较于眶后静脉丛采血等侵入性较强的采血方式，该方法对动物的应激较小。然而，该方法的局限性在于成功率较低。

本文介绍了从锁骨下静脉采集所需血量的方法。我们的结果显示，该方法安全且实用，在尾静脉采血失败的情况下可予以考虑。首先，准备胶带、脱毛剂、75%乙醇、采血管、2.5 mL注射器、剃毛器、电子天平、肝素和生理盐水。

在标准条件下饲养的家鼠，可自由获取食物和饮用水，笼具面积为530平方厘米，垫料为木屑。在穿刺前，通过腹腔注射对所有动物实施全身麻醉。将大鼠置于仰卧位，后肢固定于舒适位置，前肢平行于身体并紧靠躯干固定。

清洁锁骨下区域的两侧，去除毛发和任何可见的污物。用75%乙醇擦拭颈部和胸部皮肤，并用纱布保持该区域清洁干燥。双侧锁骨下静脉均适合穿刺，此处选择右侧进行穿刺。

用操作者左手拇指确定右侧锁骨的位置和方向，并用食指轻柔地定位胸骨上窝。用每毫升10单位的肝素溶液冲洗注射器。确定穿刺点，位于右侧锁骨外侧三分之一区域远端0.5毫米处。

将注射器轻柔地刺入穿刺部位的皮肤。一旦针头进入锁骨下皮肤，操作者右手需施加主动压力。针头方向应朝向胸骨上窝，并几乎与锁骨平行，位于锁骨后方紧邻处。

通常，沿此方向进针约两毫米即可到达锁骨下静脉。一旦针头进入静脉，血液将在主动压力作用下流入注射器。此后必须持续保持主动压力，直至抽取到足够的血量。

采血后，取下穿刺针，按压穿刺部位一到两分钟以止血。注意：按压力度必须非常轻柔，以防堵塞。将血液样本转移至含EDTA的抗凝真空管中，以1600G离心10分钟，收集血浆。

吸弃上清液以重新清洁离心管，并在-18摄氏度下保存。为比较熟练操作者与初学者的成功率，将20只SD大鼠随机分为两组。结果显示，通过右锁骨下静脉，熟练组中有9只大鼠成功，初学者组中有8只大鼠成功。

随后，从其余三只大鼠的左侧成功采集了血液。这两组之间的成功率无显著差异。但这两组的时间进程略有不同。

操作过程中及操作后未发生气胸、血气胸和出血等严重并发症。所有动物在采血后均存活。为了说明学习穿刺操作的难度，我们进一步比较了熟练组与初学者组之间的退针次数。

如表二所示，熟练组的平均穿刺次数略少于初学者组，但差异无统计学意义。综上所述，我们的结果表明，采用锁骨下静脉穿刺法在大鼠中进行采血是安全且可行的。该方法具有重要应用价值，尤其适用于需要采集大量血液样本的场合。

如果常规采血失败，该方法可能是一种理想的替代方案。