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DOI: 10.3791/58928-v
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
在这里,我们提出一个协议,收集花香挥发物从盛开的花朵,使用无损采样程序。
由于花香对于吸引授粉者至关重要,因此此方法可用于更好地了解甚至增强本地花卉品种的授粉。使用这种方法,使用易运输的机器使用无损方法对挥发性挥发性化合物进行采样。这种方法采用快速采样,将采样时间从2小时到3小时削减至10分钟。
这些方法提供了一种快速采样花卉产生的挥发性挥发性,并可用于从其他标本(如昆虫信息素)中取样挥发性。首先,选择最初未开封的花,用标记胶带标记花,以确保重复采样同一朵花。将烤箱袋煮入水中30分钟,去除残留的塑料化合物。
要干燥,在175摄氏度的烤箱中烘烤60分钟。一旦袋子干燥,在烤箱袋的封闭端的每个角落加入聚丙烯隔壁结合。用75%乙醇冲洗所有袋子和管子,让它们风干。
然后,在低热的烤箱中烘烤袋子和管子,在74至85摄氏度之间烤30分钟。根据开花时间,如果可能,在开花后至少等待 24 小时收集样品。用烤炉袋盖住选定的花。
将袋子与花下方的塑料拉链紧密地合起来,以防止不需要的空气流入袋子。戴着无菌氯丁橡胶手套,从收集设备的出风口安装一根管子,并将其连接到烤箱袋上的一个舱壁工会。另一个舱壁结合上,连接一个装有多孔聚合物吸附剂的玻璃滤芯。
将第二根管连接到真空输入上的收集设备。将第二管的末端连接到玻璃挥发性收集滤芯上。同时打开空气泵和真空,并设定为每分钟 0.05 升。
花的头部空间充满了空气,但并没有过度膨胀。系统将空气从袋子中拉过过滤器,捕获花卉挥发性。让机器运行 10 分钟。
然后关闭空气泵和真空。拆卸管子和玻璃滤芯。将过滤器放入玻璃瓶中,并拧在盖子上。
用 PTFE 管螺纹胶带密封小瓶。将样品存放在冰柜中,直到 GCMS 分析。使用空烤箱袋重复此过程,以收集空白空气样本作为控制。
对于相同挥发性成分的一致复制,每天在同一时间重复采集样品,因为有些花在一天中会产生不同的香味水平。首先,从冰柜中取出玻璃滤芯,并将其放入喷油器端口的 GCMS 中。为了释放从吸附剂中收集的多孔聚合物吸附剂上收集的头部空间挥发性,在氦气流量为每分钟1.2毫升时,将热收集陷阱加热至220摄氏度8分钟。
比较收集的挥发性波动的色谱图,以确定常见的复发峰值。识别峰值挥发性挥发性后,使用 Pherobase 确定它们以前是否被花香描述过。在这项研究中,来自GCMS的代表性数据显示为色谱图。
10 至 15 分钟之间的峰值为花卉挥发性。在Pherobase中引用了收集的挥发性,以确定它们以前是否被用花香描述过。例如,保留时间为 10.311 的化合物 21 已被确定为苯甲醛。
苯甲醛在Pherobase上可搜索,并列出所有花卉品种,由植物家族组织,从中确定了这种香料化合物。兰花品种显示在这里,从其中苯甲醛已确定存在于花香。以前的方法每个样本需要两到四个小时。
使用溶剂从过滤器中去除样品将导致 GCMS 上的溶剂峰值。这将隐藏从零到3.5分钟的化合物。此方法允许看到所有化合物。
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