Induction and Scoring of Graft-Versus-Host Disease in a Xenogeneic Murine Model and Quantification of Human T Cells in Mouse Tissues using Digital PCR

Amara Seng; Mary  A. Markiewicz

doi:10.3791/59107

在异种性鼠模型中的移植-无源疾病的诱导和评分,以及使用数字PCR对小鼠组织中人类T细胞的定量

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Immunology and Infection

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Induction and Scoring of Graft-Versus-Host Disease in a Xenogeneic Murine Model and Quantification of Human T Cells in Mouse Tissues using Digital PCR

在异种性鼠模型中的移植-无源疾病的诱导和评分,以及使用数字PCR对小鼠组织中人类T细胞的定量

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06:06 min

May 23, 2019

DOI: 10.3791/59107-v

Amara Seng¹, Mary A. Markiewicz¹

¹Department of Microbiology, Molecular Genetics, and Immunology,University of Kansas Medical Center

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

在这里,我们提出了一个协议,以诱导和评分疾病在异种移植-宿主疾病(xenoGVHD)模型。xenoGVHD为研究人类T细胞的免疫抑制提供了一个体内模型。此外,我们介绍如何使用数字PCR检测组织中的人类T细胞,作为量化免疫抑制的工具。

该协议概述了如何诱导异种移植与宿主疾病，或异种GVHD，以及如何盲目和标准化临床评分，以确保一致的结果。XenoGVHD模型提供了一种体内方法，用于测试针对人类而非穆林T细胞的免疫抑制疗法，从而改进了这些研究的转化过程。演示这个程序的将是阿马拉·森，一个研究生，从我的实验室。

注射前一天，将8至12周大、非肥胖的糖尿病scid伽玛（NSG）小鼠放在灭菌馅饼笼中，并在一个分量为150百分源的铀-137源中照射小鼠，并缓慢旋转以确保均匀的辐照。然后，将老鼠放入无菌生物安全柜中过夜的清洁笼中。第二天早上，收集足够的健康人类血液，每只小鼠分离1.1倍至7个外周血单核细胞（PBMC），并在PBS中以2%的相同体积稀释肝素化血液，即FBS。

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