在小鼠中纳入可存活的肝脏活检程序评估非酒精性脂肪性肝炎 (NASH) 的解决方法

在临床环境中, 肝脏活检用于评估非酒精性脂肪性肝炎 (脂肪变性、炎症、肝细胞膨胀和纤维化) 的各个阶段。在这里, 我们说明了小鼠的可存活肝活检, 可用于组织学分析, 以便能够以更符合临床试验的方式评估治疗药物。

这种在患有非酒精性脂肪性肝炎（NASH）的小鼠中可存活的肝脏活检程序，既允许排除没有NASH的动物，也允许准确测量对干预措施的反应。这个程序密切模仿NASH研究的临床试验设计，比较肝脏的治疗后病理与治疗前病理学，并允许对药物疗效进行更准确的评估。暴露肝叶可能具有挑战性在第一。

练习先用手指或棉质施用器暴露组织，以找到最适合您的组织。在确认对手趾捏没有反应后，做一到两厘米的纵向腹部皮肤切口立即对西腓过程和稍微到麻醉小鼠左侧。使用钳子和剪刀钝解剖皮肤，直到腹壁暴露，肝脏可以可视化在肌肉组织下面。

使用无菌手术刀刀片，在腹壁上做一到两厘米的切口，以暴露肝脏的左面叶，并在左侧叶下放置一个无菌棉签，轻轻地提取通过切口暴露的部分。将无菌盐水浸泡的纱布放在暴露的叶下，并使用无菌剪刀从提取的肝脏中切除一块30至50毫克的楔形组织。切一块可吸收的明胶压缩海绵，大小与肝脏的楔形片相似，并使用无菌钳子将海绵插入肝脏的切割部分。

用钳子将海绵放在位上，直到明胶粘附在肝脏表面，并在将肝脏活检放入适当的容器进行下游分析之前达到血性。轻轻地将肝脏返回到腹腔，注意不要打扰海绵，并启动和结束一个完整的方结，用5-0涂层可吸收缝合腹壁缝合。然后，用七毫米伤口夹关闭皮肤，确认放置后完全闭合，然后将鼠标返回到加热表面上的清洁保持架，并进行监测，直到完全恢复。

在这个具有代表性的实验中，118只小鼠在29周后通过高脂肪、果糖和高胆固醇的定制饮食进行活检，以诱导NASH。然后对每次活检的纤维化和停滞水平进行评分。小鼠被排除在研究基于低或高纤维化和异常体重减轻或伤口愈合，其余小鼠治疗与车辆或胰高血糖素样肽-1受体激动剂利拉鲁肽六个星期。

在车辆处理组中，一只小鼠表现出纤维化增加，四只小鼠表现出NASH活性得分增加。利拉鲁肽治疗与纤维化的整体改善有关，17%的治疗组改善，83%保持不变。同样，利拉鲁肽治疗提高了NASH的整体得分，66%的组表现出改进的NASH活动得分，33%保持不变。

此外，利拉鲁肽治疗改善了炎症，75%的组在治疗后炎症评分较低，而车辆治疗的动物则经历炎症增加。性病没有受到激动症治疗的影响，在干预之前和之后两组患者保持不变。注意不要过度损坏切除的肝脏，以确保可以适当分析您的需要。

这个程序可以用来模仿临床试验设计，通过比较新疗法对NASH肝脏的治疗前和治疗后的影响。