真空采血系统和眼镜放大镜从非麻醉小鼠尾静脉中修饰采血

这项研究报告使用带眼镜放大镜的真空提取管系统从小鼠尾静脉抽取血液。我们的方法易于练习，可用于小鼠的重复血液采样。首先将鼠标放入塑料约束支架中。

用70%乙醇清洗和擦拭尾巴。然后，操作员佩戴眼镜放大镜，以改善鼠标尾部的查看效果。然后将蝴蝶针尖插入扩张的横向尾静脉之一，通过蝴蝶针的橡胶端将血液收集到真空收集管中。

最后，针头被取出，血液采集过程完成。尾静脉是血液采样的首选位置。这种血液采样方法与小鼠的损伤最小有关，然而小鼠的尾静脉非常细，有时难以穿刺，本文用真空提取管系统对实验鼠进行了简单的尾静脉血液采样方法。

这种方法简单高效，可用于在小鼠中反复获得所需血液。我们的实验室的两位成员，刘晓燕和武松Zou开始，我们把一个塑料约束架，真空管橡胶塞，双尖针，眼镜放大镜无菌表面。接下来，将鼠标放入塑料约束支架中。

鼠标的前爪和后爪应处于舒适位置。要获得血液样本，用温水洗尾20至30摄氏度，用70%乙醇饱和棉球擦拭尾部，扩大静脉。选择右尾静脉或左尾静脉进行血液采样。

轻轻地抓住尾巴的下部，在采集血液样本时保持尾巴笔直。佩戴眼镜放大镜，改善观看效果，方便刺破尾静脉。将 22 量蝴蝶针尖插入一个横向尾静脉，从尾部尖端以大约 10 度的角度从尾部尖端到一半远端，向尾部底部移动，以进行多个样本。

通过将蝴蝶针的橡胶端插入真空收集管，将血液收集到真空收集管中。根据批准的协议，老鼠的尾巴可以根据需要多次进行血液收集。用传统方法从小鼠的细流和低血流尾静脉获得足够的血量并不总是容易的。

我们的方法简单而高效，可用于在小鼠中反复获得足够的血量。据报道，每两周可以安全地从健康动物身上取出高达10%的血液，因此每次采集大约175个微升小鼠血液样本，按照伦理原则进行采集。第二，在血液采样过程中，延长尾部以避免其运动至关重要。

为了避免针头中的血液凝固，如果血液停止流出超过 15 秒，应选择另一个穿刺位置。成功采集血液被定义为每次获得175微升血液。最大穿刺时间被设置为三个试验。

如果第三次穿刺后的总血量低于175微升，则被定义为血液收集失败。收集足够的样品量后，从静脉中取取针头，并短暂地向插入位点施加压力以阻止出血。要收集血浆，请使用含有 EDTA 的管子，一种抗凝剂，轻轻反转管几次，将抗凝剂与血液混合，将样品垂直放在冰上。

在冷冻离心机中旋转整个血液样本收集管10分钟。提取血浆，注意不要干扰红白血球层。要收集素，请使用无抗凝剂的管子。

这两种类型的样品可以立即使用或在80摄氏度以下储存长达一年。本研究旨在通过真空血液采集系统和眼镜放大镜，研究小鼠尾静脉重复采集血液样本的优越性。实验组与常规血液采样方法比较。

常规组分别由初学者和专家组成，两组专家的血量和采样持续时间相似，但与常规组相比，实验组的血量和采样时间也有所增加。与初学者的传统组相比，实验组的成功率也更高。这种血液采样方法易于掌握，成功率高。

穿刺失败的数量可以减少到使用传统方法的比数。此外，这个程序只对小鼠造成最小的伤害，它只是不需要麻醉剂的小鼠的尾带，可以避免麻醉剂中应激反应对血液样本的影响。