在微RNA的Vivo抑制下，降低小鼠的肿瘤生长

我们进行第一种治疗，基于甲状腺癌模型中的微RNA抑制剂。这些开发疗法为治疗这种疾病显示出希望。这种类型的正畸模型，使用系统的治疗传递途径，有助于验证新的微RNA药物。

虽然我们使用正畸模型将人类甲状腺癌细胞植入小鼠甲状腺，但这些模型对于其他癌症类型可能是全身的。与朱莉娅·拉米雷斯-莫亚和阿德里安·阿库纳一起展示手术过程将是拉克尔·阿罗查·里埃斯科。她是我们研究所的技术员

建立CAL-62人甲状腺癌细胞系不完全介质后，在4摄氏度的PBS的50微升中悬浮1倍10至第6细胞等同物，并混合与同等体积的地下室膜基质的细胞。将细胞装入1毫升注射器，配备27根量具半英寸针，皮下将100微升样品注射到6周大免疫缺陷阀C裸鼠的左侧侧翼。注射两周后，在1点5毫升管中加入160微升室温中室温的缓冲液或控制治疗缓冲液。

并立即涡流溶液10秒，以确保混合物的复合。在50摄氏度下孵育治疗溶液30分钟，随后在微型离心机中短暂离心。然后，用新鲜的PBS和彻底的混合稀释沉淀处理复合物六倍。

将整个200微升的治疗直接注射到肿瘤中。每周向每个实验动物注射50微升，每升40毫克D-路西芬基质溶液皮下2次。确保确认在异氟麻醉后对手趾捏缺乏反应。

将动物放在体内生物发光成像系统的腔室中，根据标准协议使用体内成像软件对生物发光信号进行成像。然后分析肿瘤的生长。使用 T 检验比较两种治疗方法并确定显著性与生长差异。

对于正畸甲状腺肿瘤细胞接种暂停在PBS的5微升中释放CAL-62细胞，并在皮下将100微升镇痛剂和100微升抗生素注射到7周大的瓣膜C裸鼠中。在确认对手趾捏没有反应后，将动物置于解剖显微镜下，用碘多莫酮对动物的脖子进行消毒。接下来，在皮肤上做一个大约2厘米的切口，并取代唾液的格兰斯暴露颈部。

使用解剖钳和/或剪刀解剖带状肌肉以暴露气管和甲状腺，并使用 10 微升注射器，将 5 微升体积的肿瘤细胞注入位于十分软骨一侧的右甲状腺球。当所有细胞都已交付，重新定位唾液的牙，并使用丝绸编织，涂层，不可吸收的缝合线关闭切口。然后将碘多莫酮涂抹到伤口区域，将鼠标放在热毯上进行监测，直到完全恢复。

在甲状腺内细胞注射两到三周后，如所证明的，准备治疗方案，通过麻醉甲状腺肿瘤携带动物静脉鼻窦的逆轨道注射，静脉注射。在这个具有代表性的实验中，肿瘤内注射无微RNA146B抑制剂的生长在负对方面受到显著抑制。与控制性肿瘤相比，在低水平、抗肿瘤治疗的肿瘤中，也观察到一些增殖标记的肿瘤内表达水平。

此外，可以通过分析肿瘤提取的RNA或蛋白质来研究微RNA靶点的恢复。共同揭示个体微RNA的体内抑制是有效的，可用于甲状腺癌的治疗。如证明，对小鼠建立的甲状腺肿瘤进行组织学分析，可对肿瘤周围的上皮细胞进行染色，揭示肿瘤组织的甲状腺毛囊结构。

值得注意的是，将微RNA146B抑制剂静脉注射到小鼠体内，与经过控制治疗的动物相比，肿瘤体积显著下降。此外，新描述的微RNA 146B靶在原发性肿瘤中的表达，在抗微RNA146B治疗后增加，进一步突出了抑制非原性微RNA表达的潜力，从而恢复其靶基因作为甲状腺癌的治疗。这项技术，以及随后的利平结果，为探索基于非固化RNA治疗甲状腺癌的新疗法提供了可能性。