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改良异位异体下肢骨皮瓣模型在大鼠转化血管化复合同种异体移植研究中的应用
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Modified Heterotopic Hindlimb Osteomyocutaneous Flap Model in the Rat for Translational Vascularized Composite Allotransplantation Research

改良异位异体下肢骨皮瓣模型在大鼠转化血管化复合同种异体移植研究中的应用

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09:36 min

April 26, 2019

DOI:

09:36 min
April 26, 2019

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成績單

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少数血管化复合异体移植在临床上需要一个可靠的,可重复的动物模型,以研究移植排斥的根本原因。临床相关的组织,如皮肤,肌肉和骨都存在于模型中。此外,与 VCA 的正向模型相比,我们的模型的非功能性允许更快的手术速度,减少皮瓣的缺血时间,并降低发病率。

在手移植接受者中,供体血管的血管病变可导致血管完全关闭,对移植的手造成缺血性损伤。此模型是研究这些血管病变事件发展的工具。在尝试这种手术模型之前,主外科医生应熟悉并精通大血管外科技术。

这是一个复杂而漫长的过程。视觉演示将帮助其他实验室进行相应的准备,并了解手术的步骤。首先,首先在腹股沟凹口做皮肤切口,露出股骨血管,首先收获捐赠大鼠的后肢。

做一个腹皮切口,这将有助于解剖的皮囊。在膝盖和脚踝分离后,进行后体皮肤切割,转切皮科以释放移植物,并立即将移植物运送到接受方手术台,在那里提前为接受动物的手术地点做好准备,以尽量减少移植物的缺血时间。在受援动物上,暴露和解剖股骨血管,然后对移植物进行原子化,静脉端对岸,动脉端到端。

将嫁接物插入内古口袋,并倒置。最后,缝合皮肤。要开始手术,剃一个麻醉的捐赠鼠,然后使用脱毛霜。

在擦伤区域注射30个单位的肝素皮。将动物苏皮放在加热垫上,通过准备、擦洗和拖曳手术区域(包括腿部的背侧)来产生一个无菌手术场。使用手术刀刀片15,使3厘米的皮肤切口在捐赠大鼠的腹股沟凹凸。

使用虹膜剪刀横向反射内脂垫。使用棉签钝解剖,暴露常见的股骨血管,然后放置一个带弹性带的线钩来缩回腹部肌肉。在放大高达40倍的解剖显微镜下,使用微剪刀、三号直珠宝钳和五号45度角钳,从内缘韧带下常见的股骨出现到点体上,并直接将光石血管汇入移植物中。

使用微夹和双极珠宝机,将大动脉和静脉分支进行压合和分割,以调动主要的股骨容器。使用精细的双极钳烧灼任何小树枝。使用虹膜剪刀使皮肤切口从以前的皮肤切口沿后肢的腹侧到脚踝区域。

以垂直方式切割其下方的gracilis肌肉和其他加法器肌肉,以暴露和收缩中近角血管、深枝小血管和坐骨神经。此时,在单独的手术台上,其他外科医生应插管和麻醉接受动物,以准备接受者手术现场的时间移植放置,并尽量减少移植的缺血时间。在膝盖和脚踝的水平做圆周皮肤切口,消除膝盖和脚踝,并去除多余的肌肉和组织。

在后肢的后侧做一个垂直的皮肤切口,以释放由腓骨和头骨组成的移植物,现在仅由皮囊连接。将小夹子尽可能近地放在股动脉和静脉上,并尽可能切开骨骼,靠近内侧韧带。使用 27 量冲流钝管将肝素盐水注射到股动脉中,以冲洗血液的移植物。

将分离的移植物包裹在温暖的盐水浸泡纱布中,并立即与接受动物一起运送到餐桌上,手术现场已经为血管性血管性肿瘤做好准备。对受接受大鼠进行深入麻醉,用2.5至3%蒸发异氟,以每分钟1升的氧气平衡。将动物的苏皮放在加热垫上,擦洗并覆盖手术场所。

当第一个外科医生正努力从捐赠动物中释放移植物时,使用15号手术刀在麻醉接受大鼠的腹股沟凹凸中做一个三厘米长的皮肤切口。使用虹膜剪刀横向反射内脂垫。在与捐赠动物以相同的方式暴露常见的股骨血管后,放置一个带弹性带的线钩来缩回腹部肌肉。

然后,将墨菲分支分开。使用10-0尼龙中断缝合,阿纳糖供体。通过静脉端对面技术接收容器。

然后通过端到端技术进行动脉瘤病。逐渐松开夹子后,监测止血的止血位点,并根据需要添加额外的缝合线。为了保证有效的移植再灌注,目视评估血管性肿瘤。

然后插入移植物到内嵌口袋,并上下定向,脚踝关节优越,膝盖关节低劣。使用缝合线固定移植到相邻肌肉。最后,通过中断的水平床垫皮肤可吸收的4-0缝合线关闭皮肤,并继续术后护理,如手稿中所述。

大鼠VCA异位性后体骨质皮瓣模型允许在免疫抑制下长期进行同位素生存。皮瓣隐藏在腹股沟区域,对动物的发病率和不适程度最低。当免疫抑制治疗停止时,移植物被拒绝。

多普勒图像的 allograft 显示从最小血液大量立即后 VCA, 到完全重新血管化的皮瓣在 64 天.第45天合成异体移植的皮肤活检显示皮肤成分的正常形态,而在每天以低剂量免疫抑制剂治疗的第75天,异体移植中出现萎缩和单核细胞渗透。第45天合成异体移植的肌肉活检显示正常形态,而肌肉萎缩和单核细胞渗透在第98天异体移植中明显,每天用低剂量的免疫抑制剂进行治疗。

第45天合成同源体毛骨的股动脉活检显示动脉的正常形态,与第98天异体同源体动脉的排斥相比,每天用低剂量的免疫抑制剂进行治疗。该模型提供了一个工具,以测试急性排斥,慢性排斥和环境因素,如感染和手术侮辱对血管病的发展的影响。免疫抑制药物是移植物的长期生存所需的。

这些药物具有化学危害性,应谨慎处理,并安装适当的人员防护设备。

Summary

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血管化复合同种异体移植为移植受者提供了改变生活的益处, 但移植排斥反应和血管病变的生物学原因仍然鲜为人知。这里介绍的啮齿类动物手术模型提供了一个可重复的, 临床相关的移植模型, 使研究人员能够评估排斥事件和潜在的治疗策略, 以防止其发生。

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