大型与小型动物狂犬病尸检技术

用于狂犬病检测的组织采集既存在明显的危险，也存在潜在的危险。技术人员必须采用最安全的方法，并穿戴适当的个人防护装备。这些操作规程提供了安全的剖检技术，无需使用电动工具或锯子，从而最大限度地减少气溶胶的产生。

大型动物实验方案也可在野外进行。在野外采用大型动物样本采集方法，可避免将重达45公斤以上的动物头部运输至实验室的困难。该大型动物方法与用于可传播性海绵状脑病样本采集的欧洲方案相似，适用于任何需要使用脑干和小脑的研究。

采用腹侧法获取小脑和脑干时，将标本腹侧朝上放置，鼻部朝向生物安全柜后方。用优势手持骨科锤，另一只手握凿子，将凿子以45度角放置，凿尖对准颞骨与枕骨右侧之间的V形开口处。用锤子敲击凿子顶端，直至两块颅骨分离。

在基蝶骨旁进行切割。按照刚刚演示的方法，分离标本左侧的颞骨和枕骨。使用凿子将颅骨的V区向下弯曲，以充分暴露脑部的菱脑区域。

然后使用剪刀和镊子挖出脑干和小脑，必要时清除颅骨中残留的任何组织碎片。如果标本不允许腹侧取出位置，则将样本置于背侧，使鼻部朝向生物安全柜后方。使用肿瘤抓钳夹住左侧颞肌，并用抓钳的齿部固定。

捏紧手柄，使齿部夹住组织，然后使用锋利的雕刻刀将颞肌切至颅骨。用持针钳和刀具将标本旋转180度，对另一侧颞肌重复切开操作，以暴露颅骨。将头部恢复至原始方位，将凿子以45度角放置，凿尖对准颅骨顶部顶骨与间顶骨接合处的中心位置。

用锤子敲击凿子的顶端，直至在颅骨顶骨的上半部分形成一个水平开口。将标本旋转180度，按照刚才演示的方法在颅骨的对侧制作一个开口。根据需要调整头部位置，将凿子尖端插入第一道切口的末端，使其与水平开口呈90度角，然后敲击凿子，直至开口延伸至枕骨。

以相同方法卷动标本，在对侧枕骨上形成开口。颅骨上的开口应呈倒U形。将有齿镊的齿插入U形底部的颅骨内，向后牵拉骨片，以暴露大脑的尾端和小脑。然后用剪刀作为铲子，从颅腔内撬出整个小脑。

使用组织镊子从枕骨大孔中分离出脑干。对于大型动物小脑和脑干的取材，将样本放置成颅骨背侧接触解剖台面，颅骨尾侧及枕骨大孔朝向生物安全柜前方。

用镊子夹住脑干。将改良的探针刀尽可能深入地插入脊髓与脊膜之间的枕骨大孔，并在脊髓周围刮擦，以分离小脑和脑干与脊膜的连接。然后，用镊子将脑干从枕骨大孔中拉出。

当刀具穿过枕骨大孔后，轻柔地调整刀片角度，尽可能沿颅骨内壁推进，并插入带有足够长手柄的金属解剖刀或刀具，使其到达脑组织下方，置于神经组织与脊髓脑膜之间的间隙。探查小脑周围区域，确保与脊髓脑膜的连接已被切断。当脑膜完全切断后，将解剖刀向前上方推进，挑起并取出小脑。

然后用刮勺取出小脑。所有在2019年1月31日至2019年2月28日期间随头骨提交的陆地样本，均收集了有关颈部是否存在以及剖检方法的信息。在此期间，共对170个头颅进行了剖检，涉及18个物种。

52% 的样本被正确去头。其余样本至少带有一个椎骨，其中包括三个完整身体标本。75% 的情况下采用腹侧方法。

其中，49个样本保留有颈部。共提交了3只大型动物，其中有两例采用了大型动物操作方案。另有一只松鼠因颅骨压碎，仅需剪除外皮即可暴露脑组织，因此未使用本视频所示的任何方法。

在处理多个动物样本时，用于制作显微镜载片或通过分子方法提取的组织，应使用新的手套、器械和清洁的工作区域，以避免交叉污染。进行这些操作时需谨慎，因为样本可能感染狂犬病病毒或其他人畜共患病。请注意，样本中可能含有锐利物体。