Name: 血管化异位脾移植小鼠模型在脾细胞生物学和移植免疫研究中的应用 (视频) | JoVE Journal
Uploaded: 2019-06-11T15:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 4 s
Description: 学习血管化异位脾移植小鼠模型的手术操作，用于研究脾细胞动态和移植免疫。该方案利用同系小鼠追踪脾细胞命运，为炎症性疾病和免疫耐受机制提供重要研究工具。

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作者感谢西北大学综合移植中心和范伯格医学院研究核心项目提供的资源和资金支持。&#160;具体而言，流式细胞术服务由西北大学流式细胞术核心设施提供，组织学服务由小鼠组织学与表型分析实验室提供，这两个核心设施均得到授予罗伯特·H·卢里综合癌症中心的美国国家癌症研究所 P30-CA060553 项目的支持。我们感谢 Nate Esparza 先生对本文稿的校对。

本研究中的所有操作和动物使用均按照美国西北大学机构动物护理和使用委员会（IACUC）批准的方案进行。在本研究中，使用8至10周龄的雄性CD45.2和CD45.1小鼠（均来自Jackson实验室，BALB/c背景）分别作为脾脏供体和受体，以建立同基因型脾脏移植模型。所有动物均饲养于西北大学动物设施的无菌环境中。所有小鼠在麻醉后均使用眼用润滑剂以防止角膜干燥。
1. 手术准备、麻醉与镇痛方案
<ol>
	<li>将无菌一次性手术单（45.7 cm × 66 cm）铺在手术台上。轻轻抓取小鼠，腹腔注射（i.p.）给予氯胺酮（50 mg/kg）和赛拉嗪（10 mg/kg）进行麻醉，并皮下注射0.05 mg/kg丁丙诺啡以镇痛。</li>
	<li>通过夹捏脚趾法确认麻醉深度，用剃刀剃除整个腹部区域的毛发，并将小鼠置于手术显微镜下（放大倍数为6–10倍）的无菌手术台上。</li>
</ol>
2. 供体脾脏采集
<ol>
	<li>用酒精消毒棉片对腹部进行消毒，用手术胶带固定四肢，然后用剪刀从耻骨至剑突处沿中线做一条3-4 cm的纵向皮肤切口。</li>
	<li>使用回形针制成的无菌拉钩牵开腹壁，用无菌棉签将肠管移至腹部右侧（术者左侧）以暴露脾脏。使用无菌低温电凝器凝固附着于脾脏的胃短静脉（图1A）。将一块浸有37 °C生理盐水的无菌纱布覆盖在脾脏上以保持其湿润（图1B）。</li>
	<li>通过结扎门静脉的分支（胰十二指肠上静脉和胃右静脉），将门静脉从胰腺组织中分离并游离出来（图1C）；在远离脾静脉的位置用缝线环绕门静脉（图1D）。</li>
	<li>将脾脏翻转至右侧，以暴露腹主动脉、腹腔干及脾动脉（图1E）。通过结扎肝动脉和胃动脉，解剖并游离腹主动脉-腹腔干-脾动脉；在腹腔动脉近端的腹主动脉处放置缝线（图1F-G）。</li>
	<li>向下腔静脉（IVC）注射100国际单位（IU）肝素，以实现全身肝素化，并等待3分钟确保肝素起效。结扎腹腔动脉近端的腹主动脉，横断门静脉，然后从腹腔干远端的腹主动脉以10 mL肝素化冷生理盐水（4 °C）进行全身灌注（10 mL/20 s）（图1H）。</li>
	<li>将脾脏移植物连同相关的腹主动脉-腹腔干-脾动脉段、门静脉、一段脾静脉以及少量胰腺组织整块切取。移植前将移植物保存于5 mL、4 °C的生理盐水中。通过颈椎脱位法处死小鼠。</li>
</ol>
3. 受体脾切除术与脾脏移植物植入
<ol>
	<li>将加热垫放置在手术平台上，并将温度调节至 37 °C。在加热垫上覆盖一张无菌手术巾（45.7 cm × 66 cm），以构建无菌手术区域。重复步骤 2.1 和 2.2 进行手术准备和麻醉处理。按照步骤 2.1 和 2.2 所述，做一条 3–4 cm 的腹正中切口，并牵开腹壁。</li>
	<li>使用无菌棉签将小鼠肠道轻柔移至右侧，以暴露受体脾脏。结扎脾静脉和脾动脉后，切除脾脏。</li>
	<li>将小鼠肠道轻柔移至左侧，并用浸有无菌 37 °C 生理盐水的湿纱布覆盖肠道。解剖并结扎肾下腹主动脉和下腔静脉的腰支；使用两个 4 mm 的微血管夹对肾下腹主动脉和下腔静脉进行交叉夹闭。</li>
	<li>在肾下腹主动脉处穿入一根 11-0 尼龙缝线（贯穿全层），并向外牵拉，随后用显微剪刀做一次完整剪切，形成椭圆形主动脉切口（长度应与供体主动脉直径相匹配，图 2A）。使用 30 G 针头穿刺下腔静脉，形成椭圆形静脉切口，再用显微剪刀将开口延长至与供体门静脉长度相匹配（图 2A）。</li>
	<li>使用 500 μL 肝素化生理盐水（10 单位/mL）冲洗主动脉和下腔静脉管腔内的血液或血凝块。</li>
	<li>将脾脏移植物置于受体小鼠腹部右侧；仔细辨认供体主动脉袖和供体门静脉。确认血管无扭曲后，用浸有冷（4 °C）生理盐水的纱布覆盖脾脏移植物。</li>
	<li>使用两根固定缝线（11-0 尼龙缝线，以下相同）将供体主动脉袖与受体主动脉切口的近端和远端顶点连接（图 2B、C）。在供体主动脉袖与受体主动脉切口之间（前壁）采用 2–3 针连续 11-0 尼龙缝线完成吻合（图 2D）。将脾脏移植物翻转至受体左侧；在供体主动脉袖与受体主动脉切口之间（后壁）完成吻合（图 2E）。</li>
	<li>在下腔静脉内侧采用 4 至 5 针连续缝合，将供体门静脉与受体下腔静脉后壁吻合，随后在下腔静脉外侧收拢缝线完成闭合（图 2F、G）。</li>
	<li>松开血管夹，使用无菌棉签压迫止血，直至脾脏颜色恢复（图 2H）。</li>
	<li>采用 5-0 合成可吸收缝线（Vicryl）连续缝合关闭腹腔。采用 5-0 尼龙缝线间断缝合关闭皮肤层。 
	注意： 对于步骤 4.7–4.8，可选择先完成供体门静脉与受体下腔静脉的吻合（步骤 4.8）；然后在腹主动脉内侧使用 2 至 3 针连续缝合，将供体主动脉袖与受体主动脉切口后壁吻合，并在腹主动脉外侧收拢缝线完成闭合。</li>
</ol>
4. 动物恢复
<ol>
	<li>关闭腹腔后，通过4个不同部位皮下注射1 mL温热生理盐水（每个部位0.25 mL）。</li>
	<li>术后最初几小时内将小鼠置于温度可控的培养箱（30 °C）中，监测小鼠直至其意识充分恢复，然后将其转移至装有常规食物和水的新洁净笼具中，并在笼具下方放置加热垫（30 °C）。术后将小鼠单独饲养于一个笼具中。</li>
</ol>
5. 术后疼痛管理
<ol>
	<li>术后24小时和48小时，皮下注射0.05 mg/kg的丁丙诺啡以维持镇痛方案。</li>
</ol>

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<li>Tian, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+spleen+contributes+importantly+to+myocardial+infarct+exacerbation+during+post-ischemic+reperfusion+in+mice+via+signaling+between+cardiac+HMGB1+and+splenic+RAGE%5BTitle%5D)+AND+%22Basic+Research+in+Cardiology%22%5BJournal%5D)">The spleen contributes importantly to myocardial infarct exacerbation during post-ischemic reperfusion in mice via signaling between cardiac HMGB1 and splenic RAGE.</a> Basic Research in Cardiology. 111 (6), 62(2016).</li>
<li>Jang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cutting+Edge%3A+Check+Your+Mice-A+Point+Mutation+in+the+Ncr1+Locus+Identified+in+CD45.1+Congenic+Mice+with+Consequences+in+Mouse+Susceptibility+to+Infection%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Immunology%22%5BJournal%5D)">Cutting Edge: Check Your Mice-A Point Mutation in the Ncr1 Locus Identified in CD45.1 Congenic Mice with Consequences in Mouse Susceptibility to Infection.</a> Journal of Immunology. 200 (6), 1982-1987 (2018).</li>
</ol>

作者无任何利益冲突需要披露。

有力的证据表明，脾脏来源的单核细胞在无菌性炎症过程中发挥着重要作用，例如动脉粥样硬化19、急性缺血性脑损伤20或肺损伤18，以及心肌缺血/再灌注（I/R）损伤和重塑21,22,23。这些研究强调了脾脏在多种慢性疾病中尚未被充分认识的作用，其中心血管疾病尤为重要（尤其是考虑到它是全球首要死因）。脾脏移植小鼠模型为揭示脾脏来源免疫细胞在各种疾病中的作用及其在脾脏内的活化机制提供了重要机会。例如，Swirski 等人利用脾脏移植小鼠模型发现，在心肌缺血损伤发生后，脾脏来源的单核细胞会增强其迁移能力，从脾脏迁移至外周，黏附于受损组织，并参与伤口修复过程17。此外，该模型还有助于研究成熟免疫细胞在脾脏中的存续时间及其潜在机制，并探索脾脏移植的治疗潜力。
<p cla...

脾脏是人体最大的继发性淋巴器官，在免疫系统和造血系统中具有关键作用。其功能主要由两个形态上不同的区域执行，即红髓和白髓1。红髓由静脉窦和脾索构成，形成一个三维网状结构，其中包含网状纤维、网状细胞以及相关的巨噬细胞。这种独特的结构使红髓能够有效地过滤血液，清除外来物质以及衰老或受损的红细胞。白髓包括淋巴滤泡、边缘区和动脉周围淋巴鞘（PALS），是抗原捕获与处理、淋巴细胞归巢、转化、增殖和成熟的重要场所2。尽管如此，脾脏通常被认为是一个可有可无的器官，因为其他淋巴器官（如淋巴结）也能部分执行其功能，且脾脏缺失通常不会导致死亡。因此，脾切除术已被广泛用于治疗脾损伤或良性血液系统疾病的患者3。然而，脾切除患者面临多种长期并发症。细菌感染是脾切除术后最广为人知的并发症4,5。近年来，暴发性脾切除后脓毒症被确认为一种严重的术后并发症，具有较高的死亡率6。此外，近期的流行病学研究表明，脾切除可能与心血管疾病的发生相关，提示脾脏的其他生理功能仍有待进一步探索7,8。
自体脾移植和异体脾移植均已应用于临床。目前，通过将脾组织片段植入大网膜内形成的囊袋中进行自体脾移植，被认为是创伤性脾切除术后保留脾功能的唯一可行方法9,10。然而，该手术的有效性尚存争议，因为术后可能出现脾组织无菌性坏死以及由术后粘连引起的小肠梗阻等并发症11。异体脾移植通常作为多脏器移植的一部分进行12。来自多脏器移植的临床证据表明，异体脾移植可能在不引发移植物抗宿主病（GVHD）的情况下，对小肠移植物排斥反应起到保护作用12。然而，关于异体脾移植作为多脏器移植组成部分的有益效应，目前文献报道仍有限，其潜在机制尚待阐明。2006年，Yair Reisner 等人报道，将不含T细胞的猪胚胎脾组织移植至小鼠体内，可治愈甲型血友病（一种遗传性疾病）且不引发GVHD13，这一结果支持脾移植在某些疾病中具有治疗潜力。因此，有必要进一步研究脾移植的治疗潜能。
脾脏移植的动物模型对于探索脾源性免疫细胞在疾病进展中的未被充分认识的功能，以及评估脾脏移植的潜在治疗效果具有重要价值。自20世纪初以来，已有文献记录实验性全脾移植模型，Cohen14对此进行了综述。1969年，Coburn Richard J. 和 Lee 等人详细描述了大鼠脾脏移植的技术15,16。近年来，Swirski FK 等人报道了一种小鼠脾脏移植模型17。与大鼠模型相比，小鼠脾脏移植模型因其多种内在优势而更具吸引力。例如，利用小鼠模型，我们可以获得大量在大鼠模型中无法获得的试剂。此外，通过使用同源近交系小鼠（如CD45.1/CD45.2背景的小鼠），同基因型脾脏移植使得追踪脾细胞的命运、存续时间及其功能成为可能18。在Swirski FK 等人17工作的基础上，我们进一步建立了一种简化且优化的小鼠脾脏移植操作流程。下述方案以标准化方式结合了可靠性和可行性，可作为研究脾脏生物学及移植免疫学的工具。

<table><tbody><tr><td>氯胺酮</td><td>Wyeth</td><td>206205-01</td><td></td></tr><tr><td>赛拉嗪</td><td>Lloyd Laboratories</td><td>139-236</td><td></td></tr><tr><td>肝素溶液</td><td>Abraxis Pharmaceutical Products</td><td>504031</td><td></td></tr><tr><td>注射级生理盐水</td><td>Hospira Inc.</td><td>NDC 0409-4888-20</td><td></td></tr><tr><td>70% 乙醇</td><td>Pharmco Products Inc.</td><td>111000140</td><td></td></tr><tr><td>ThermoCare 小动物重症监护系统</td><td>Thermocare, Inc.</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Adson 镊子</td><td>Roboz Surgical Instruments</td><td>RS-5230</td><td></td></tr><tr><td>Derf 持针器</td><td>Roboz Surgical Instruments</td><td>RS-7822</td><td></td></tr><tr><td>超细显微解剖剪</td><td>Roboz Surgical Instruments</td><td>RS-5881</td><td></td></tr><tr><td>微型夹</td><td>Roboz Surgical Instruments</td><td>RS-5420</td><td></td></tr><tr><td>7-0 丝线</td><td>Braintree Scientific</td><td>SUT-S 103</td><td></td></tr><tr><td>11-0 尼龙线，带 4 mm (3/8) 针</td><td>Sharpoint DR4</td><td>AK-2119</td><td></td></tr><tr><td>小鼠 CD45.2 抗体</td><td>BD Bioscience</td><td>553772</td><td></td></tr><tr><td>小鼠 CD45.1 抗体</td><td>BD Bioscience</td><td>553776</td><td></td></tr><tr><td>小鼠 CD11b 抗体</td><td>BD Bioscience</td><td>557657</td><td></td></tr><tr><td>小鼠 B220 抗体</td><td>BD Bioscience</td><td>553089</td><td></td></tr><tr><td>小鼠 Ly6C 抗体</td><td>eBioscience</td><td>48-5932-80</td><td></td></tr><tr><td>小鼠 Ly6G 抗体</td><td>BD Bioscience</td><td>561236</td><td></td></tr><tr><td>小鼠 F4/80 抗体</td><td>BD Bioscience</td><td>565614</td><td></td></tr><tr><td>小鼠 CD11c 抗体</td><td>BD Bioscience</td><td>558079</td><td></td></tr><tr><td>小鼠 CD3 抗体</td><td>eBioscience</td><td>48-0032-82</td><td></td></tr><tr><td>小鼠 CD4 抗体</td><td>BD Bioscience</td><td>552051</td><td></td></tr><tr><td>小鼠 CD8 抗体</td><td>BD Bioscience</td><td>563786</td><td></td></tr><tr><td>LIVE/DEAD&amp;trade; 可固定紫红色死细胞染色试剂盒</td><td>Thermo Fisher</td><td>L34955</td><td></td></tr></tbody></table>

用于研究脾细胞生物学与移植免疫的带血管异位脾移植小鼠模型

A Mouse Model of Vascularized Heterotopic Spleen Transplantation for Studying Spleen Cell Biology and Transplant Immunity

脾脏是一种独特的淋巴器官，在免疫系统和造血系统的稳态中发挥关键作用。无论原因为何，接受脾切除术的患者均易发生严重的术后感染，并面临深静脉血栓形成及恶性肿瘤风险升高的问题。近期流行病学研究表明，脾切除术可能与心血管疾病的发生相关，提示脾脏的生理功能尚未被充分认识。本文介绍一种带血管的异位脾脏移植小鼠模型，该模型不仅可用于研究不同生物学过程中脾脏免疫细胞亚群的功能与行为特征，还可作为评估脾脏移植在特定疾病中治疗潜力的有力工具。该模型的主要手术步骤包括供体脾脏的切取、受体自身脾脏的切除以及脾移植物的血管重建。利用同源近交系小鼠（例如具有 CD45.1/CD45.2 背景的小鼠），我们观察到，在同基因移植后，供体来源的脾淋巴细胞和髓系细胞早在术后第1天即开始从移植物中迁移出来，同时伴随多种受体来源细胞的流入，从而形成一种独特的嵌合体。&#160;尽管该技术操作相对复杂，但手术成功率可超过&#62;90%。该模型允许在稳态条件下以及脾脏移植后的疾病状态下，追踪脾细胞的命运、存续时间及其功能，为揭示脾源性免疫细胞在不同疾病过程中的独特作用提供了重要研究机会。

经验丰富的显微外科医生可在90分钟内完成小鼠脾脏移植的全部操作。本实验室已成功开展超过100例小鼠脾脏移植手术，手术成功率超过90%，以受体小鼠及移植脾脏在术后第1天（POD 1）或术后第7天（POD 7，本研究终点）均存活为判定标准。移植脾脏的存活状态通过大体形态观察及脾细胞的流式细胞术分析加以确认。根据我们的经验，流式细胞术分析（活/死细胞活力检测）对判断移植脾脏是否存活极为敏感，因为一旦移植脾脏发生坏死，其中绝大多数脾细胞将死亡。表1总结了该手术的技术难点、常见并发症及其处理方法。
为检测移植后移植物的形态，对BALB/c小鼠脾脏同基因移植片在术后第1天（POD 1）和术后第7天（POD 7）进行了苏木精-伊红（H&amp;E）染色。代表性图像见图3。脾脏同基因移植片在术后第一周内结构保持完整，红髓、白髓及边缘区仍清晰可辨。为研究脾脏移植后的细胞迁移情况，于POD 1和POD 7...

本方案详细描述了小鼠带血管异位脾脏移植模型的手术步骤。该模型技术难度较高，可作为研究脾细胞命运与存活时间、不同脾细胞群体在疾病进展中的作用机制以及移植免疫的有力工具。

脾脏是一种独特的淋巴器官，在免疫系统和造血系统的稳态中发挥着关键作用。已接受……的患者

脾脏移植的小鼠模型为揭示脾脏细胞在炎症性疾病中调节局部和全身免疫反应的作用提供了重要机会。该方案的主要优势在于，通过使用同源小鼠，脾脏移植能够追踪脾脏细胞的命运、存续时间及其功能。在开始操作前，将无菌的一次性手术单覆盖在手术平台上，并确认麻醉后的供体小鼠对脚趾夹捏无反应。剃除小鼠整个腹部区域的毛发，将小鼠置于手术显微镜下（放大倍数为6至10倍）的无菌手术平台上。使用酒精消毒棉片对暴露的皮肤进行消毒，并用手术胶带固定四肢。从耻骨至剑突沿中线作一个3至4厘米长的垂直皮肤切口，进入腹腔。电凝皮肤血管，并将切口向两侧侧腹部延伸以获得更好的暴露。使用无菌棉签将肠管移至腹部右侧，暴露脾脏，再使用无菌低温电凝设备凝固附着于脾脏的胃短静脉。将一块浸有37摄氏度生理盐水的无菌纱布覆盖于脾脏表面以保持其湿润，分离并游离门静脉与胰腺组织。结扎门静脉的分支，操作如图所示。在远离脾静脉的门静脉处放置缝线，并将脾脏翻转至右侧，以暴露腹腔干上的腹主动脉和脾动脉。游离并游动腹主动脉-腹腔干-脾动脉分支，并在腹腔动脉近端的腹主动脉处放置缝线。向下腔静脉（IVC）注入100国际单位肝素，以实现全身肝素化。三分钟后，在腹腔动脉近端的主动脉处结扎肝动脉和胃动脉。横断门静脉，并从腹腔干远端的腹主动脉灌注10毫升4°C的含肝素生理盐水，进行全身灌注。取脾脏移植物，并连同腹腔动脉脾段、门静脉中的脾静脉段以及少量胰腺组织一并切除。随后将移植物保存在5毫升4°C的生理盐水中。在手术区域按供体准备方式处理后，通过腹正中切口进入受体腹腔，结扎受体脾静脉和脾动脉，切除受体自体脾脏。用37摄氏度的生理盐水浸湿的纱布覆盖肠组织，并小心地将肠管移至左侧。解剖并结扎下腔静脉内肾下主动脉的腰动脉分支，使用两个四毫升的微血管夹在下腔静脉内对肾下主动脉进行交叉夹闭。将一根11-0尼龙缝线穿过肾下主动脉并牵拉血管，以便使用显微剪刀制作椭圆形主动脉切口。使用30号针头穿刺下腔静脉（IVC），形成椭圆形静脉切口，并将切口延伸至供体门静脉的长度。用500微升肝素化生理盐水冲洗主动脉和下腔静脉，以清除血管内的管腔血液或血栓，随后将供体脾脏移植物置于受体腹部右侧。仔细辨认供体主动脉袖口和门静脉。确认血管无扭曲后，用4摄氏度的生理盐水浸湿的纱布覆盖脾脏移植物。使用两根11-0固定缝线，将供体主动脉袖与受体主动脉切口的近端和远端顶点连接，并在供体主动脉袖与受体主动脉切口前壁之间用2至3针连续的11-0尼龙缝线完成吻合。将脾脏移植物转向受体左侧，完成供体主动脉袖与受体主动脉切口后壁之间的吻合。使用连续缝合线，在供体门静脉与受体下腔静脉之间进行静脉吻合，每侧缝合4至5针。先在血管腔内缝合后壁，然后用同一根缝线闭合前壁。在下腔静脉外侧的下角处打结完成吻合。现在松开血管夹，使用无菌棉签压迫止血，直至脾脏颜色恢复。用5-0合成可吸收Vicryl缝线连续缝合腹腔，并用5-0尼龙缝线间断缝合皮肤层。随后，在四个不同部位皮下分别注射250微升温热生理盐水，并将小鼠置于30°C温控培养箱中，在术后最初几小时内进行监测，直至动物意识充分恢复，可转移至饲养笼具。移植后第1天和第7天的脾脏同基因移植物苏木精-伊红染色显示，脾脏同基因移植物的结构在术后第一周内保持完整。通过流式细胞术分析移植后供体脾细胞的迁移情况，结果显示移植后第1天约50%的脾细胞来源于供体，约46%来源于受体。移植后第7天，来源于供体的白细胞约占脾脏总细胞数的32%，而来源于受体的细胞比例上升至约53%。供体脾源性白细胞在移植后第1天即已迁移至淋巴结、血液和骨髓，并持续存在至少至第7天，形成一种独特的嵌合体，对脾细胞迁移研究具有重要价值。使用基因修饰的基因敲入小鼠作为脾脏供体，将有助于研究脾细胞来源的介质或关键信号通路在疾病过程中的作用。该模型可成为探索脾细胞群体在应对病原体、损伤、炎症或移植排斥反应时机制的有力工具。

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血管化异位脾移植小鼠模型在脾细胞生物学和移植免疫研究中的应用

小鼠异位心脏移植模型已被众多研究者证实为研究排斥反应和免疫应答机制的重要方法。然而，相关技术操作仍具挑战性。通过改进标准技术，我们已成功完成超过1000例移植手术。...

小鼠异位心脏移植

该视频演示了一种建立血管化异位脾移植小鼠模型的外科手术方法。通过外科手术打开麻醉供体小鼠的腹腔以摘除脾脏。识别下腔静脉和肾下主动脉，结扎其腰支，在受体小鼠体内建立异位移植位点用于移植同系供体小鼠的脾脏。完成血管吻合并恢复移植脾脏的血流后，关闭切口并监测小鼠的恢复情况。...

一种带血管异位脾脏移植的小鼠模型

本视频展示了一种构建双人源化小鼠模型的方法，该模型同时具有人免疫系统和人肝细胞。该方法包括将人肝细胞和造血干细胞与祖细胞移植到转基因免疫缺陷小鼠体内。...

开发含有人肝细胞和免疫细胞的人源化小鼠模型

通过半脾注射技术建立的肝转移瘤的临床前小鼠模型。...

一种肝转移的临床前小鼠模型

我们描述了一种小鼠主动脉移植术的实验方案。该方案的目的是提供一种可用于研究动脉中与同种免疫反应相关的病理过程及治疗策略的模型，以及由此引发的动脉改变，这些改变是导致器官移植失败的重要因素。...

异体免疫诱导的血管排斥反应与移植性动脉硬化的鼠类模型

为了研究联合实体器官与血管化复合异体移植，我们描述了一种新的小鼠异位整块胸壁、胸腺和心脏移植模型，该模型采用颈部无缝合套管技术。...

一种用于小鼠异位整块胸壁、胸腺和心脏移植的新型显微外科模型

这种新型的小鼠原位下肢移植模型采用无缝合套管技术进行超显微血管吻合，为 在 体内...

小鼠原位下肢移植

小鼠心脏移植模型是研究移植免疫学的重要研究工具。本方案详细介绍了小鼠异位颈部心脏移植技术，该技术涉及在受体的颈总动脉和供体的肺动脉干上放置套管，以实现层流血流。...

利用血管套环的小鼠异位颈部心脏移植

本文介绍了一种将脾脏细胞在半固体基底膜基质中进行聚集和包封的实验方案。基底膜基质构建物可用于三维培养，以研究类器官的发育，或用于 体内...

基底膜基质包埋细胞聚集体用于研究小鼠脾脏组织形成

我们介绍一种可重复的小鼠异位后肢至颈部血管化复合组织异体移植模型。该超显微外科手术方案涉及0.3-0.5...

小鼠异位后肢至颈部移植：血管化复合异体移植的超显微外科模型

本方案介绍了一种简化的、端对侧缝合吻合技术，用于小鼠颈部心脏移植，为研究移植免疫学提供了一个稳定且可重复的模型。...

采用端侧吻合技术进行颈部异位小鼠心脏移植以研究移植免疫学

学习血管化异位脾移植小鼠模型的手术操作，用于研究脾细胞动态和移植免疫。该方案利用同系小鼠追踪脾细胞命运，为炎症性疾病和免疫耐受机制提供重要研究工具。

用于研究脾细胞生物学与移植免疫的带血管异位脾移植小鼠模型

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