胸脊髓截断手术和大鼠开放场运动评估

大鼠胸腔脊柱切除术是单侧脊髓损伤的宝贵且可重复的模型,用于研究运动运动恢复和治疗效果的神经机制。本文包括详细的分步指南,用于执行截断过程和评估运动在露天竞技场中的性能。

脊柱半身分产生可量化和理想的可重复性运动缺陷，可以用我们开发的机车规模捕获。这种技术的主要优点是病变的选择性和可重复性，这导致动物之间行为表型的变异性降低。在确认麻醉成年大鼠对手趾捏没有反应后，在剃光的皮肤上切口2.5厘米，覆盖T-6至T-10椎骨，并使用钝剪刀收回皮肤和肤浅脂肪。

使用钝解剖剪刀和自我保留的缩回器分离准椎肌肉，插入T-7至T-9椎骨的后面，并使用细钳和棉尖施用器脱毛和清除任何剩余的组织，以暴露旋转过程和椎骨裂解。将速率放在立体显微镜下，并使用精致的骨修剪器小心地在 T-7 和 T-8 椎骨上双边切割面。使用手术刀在T-8和T-9椎骨的骨质肉之间进行1毫米的表面切口，注意不要伤害下肢，并使用骨修剪器去除T-8椎骨的旋转过程。

在 T-7 旋转过程中小心地夹紧弯曲的止血钳，将 T-8 层骨的骨端稍微旋转约 20 度，并将骨修剪器插入 T-8 层下。使中线切口沿着层延伸，通过重复椎骨层中侧左右侧的切口到横向过程以暴露脊髓，继续拉明切除术。将 100 微升 2% 利多卡因滴入暴露的脊柱管，并使用精细钳子和 iridectomy 剪刀去除覆盖 T-8 脊髓段的 dura。

将利多卡因给线的利多卡因内方式重复，通过可视化在外露的 T-7 到 T-9 椎骨之间的旋转过程之间创建的中心线来识别线中线。使用细钳来稳定脊髓，使用解剖刀将脊髓从中线向动物的一侧切开，注意不要切开腹侧前脊髓动脉。使用虹膜切除术剪刀，小心地切开脊髓病变侧的任何剩余组织，以确保腹侧象限适当地转开，将一个无菌的、约六到两毫米的盐水浸湿的止血海绵放入脊髓上方的外露腔中。

然后，使用 4-O 多糖蛋白 910 缝合线关闭切口部位周围的肌肉层和皮肤，将大鼠放在热灯下的温暖环境中，并进行监测，直到完全恢复。在适当的行为测试实验时间点，在老鼠习惯进入竞技场后，开始录像，并在昏暗的光线条件下将大鼠放在竞技场中心，以鼓励运动活动。让大鼠探索至少四分钟，将老鼠移动回竞技场中心时，它保持静止超过20秒，以促进运动。

然后，对记录的测试会话的运动性能进行评分。对于关节肢体运动，在脚踝、膝盖和臀部的自发运动中，分别对后肢关节运动进行评分，如正常、轻微或不存在。对于体重支持，评估后肢拉伸肌肉收缩和支持加载的体重的能力时，肢体在地面上，当大鼠静止，以及在活动运动期间。

对于数字位置，在大鼠静止和运动期间评估后肢数字的位置。只有当大鼠在踏步过程中能够支撑其体重时，才能完成步进参数，在初始接触时和从地面抬起后肢爪的位置方向，以及步进过程中摆动相位的流动性。只有在测试期间连续出现四个步骤并且四肢可以主动支撑体重时，才能完成前肢/后肢协调参数。

在运动过程中将尾部位置评估为向上或向下。然后添加每个参数的单个分数，以提供每个后接的总计到最多 20 分。为了评估和比较实验组之间的病变大小，病变的最大面积占脊髓总横截面的百分比可以很容易地计算与脊髓部分的组织学染色。

例如，这种代表性的左半角病变与大鼠之间共享的最大病变面积比例的叠加表明，平均病变大小约为横截面线面积的 47%。在左侧下半身切除术后头五周，运动运动表现的这些代表性变化表明，在手术后前三周，动物左后肢的运动有显著损伤。在手术后两周，右后肢的运动水平有所改善。

需要记住的最重要的事情是，准确识别脊柱中线进行下切和适当的手术后动物护理和监测对于成功的方案至关重要。此行为评估提供了一个理想的协议，用于筛选上部皮质指数，以补充专门测试，以解决对运动恢复感兴趣的具体问题。