新生儿小猪体内胸腺菌的活体力学试验方法

该技术复制了小猪中胸围的体内生物力学拉伸测试，作为高度相关的临床大型新生儿动物模型。这些方法不仅有助于理解拉伸损伤机制，还可以报告新生儿胸围丛内功能和结构缺陷的伤害阈值。演示这个程序的将是雷切尔·马吉，一个研究生从我的实验室。

在确认缺乏苍白和戒断反射后，将麻醉猪放在手术台上的上肢位置，用上肢诱拐暴露在轴部区域。在动物的披肩上放置一个窗帘，并使用编号10的手术刀刀片在标记的皮肤上做切口。中线切口将气管覆盖到胸骨的上三分之一，暴露了脊柱两侧的胸膜丛情结。

为了暴露动物胸丛的一侧，从中线切口的上端（对应于C3）到上臂，从中线切口的下端（对应于T3）到上臂进行上部切口。使用切口两侧的钳子将组织从锁骨边缘的上部切口分离至上臂，同时避免头足静脉和罗勒静脉。使用剪刀、钳子和钝解剖，释放优越的皮瓣以进入胸腔丛的宫颈区域，而下层皮瓣进入胸腔丛的胸腔区域。

对表面肌肉进行钝解剖，以暴露胸肌。然后仔细检查丛，以找到分叉，并确定分叉下方的胸围区，靠近手臂，作为绳索和神经以及分叉上方的区域，靠近脊柱，作为根或躯干。要设置生物力学测试装置，请将设备底座连接到推车上，并使用大型 C 形夹将机电执行器连接到底座上。

将 200 牛顿称重传感器连接到执行器上，用填充有机玻璃拧入夹子，以防止应力集中在夹紧位置。使用三脚架，连接一个摄像机，该摄像机以 658 x 492 像素的分辨率每秒录制多达 100 帧，并将摄像机、执行器和加载单元的 USB 电缆连接到计算机，以集成和同步安装程序的所有组件。然后将计算机、执行器和称重传感器插入电源。

要在记录施加的负载之前校准称重传感器，请使用可调节手柄将执行器设置为 90 度角，以便垂直对齐并使用量角器检查角度。打开称重传感器软件，然后单击”开始”以显示电压的实时读出。接下来，以 100 克的增量将夹具的重量从夹具中悬挂为零到 1，000 克的重量，记录每个负载的测量电压。

当记录了所有 10 个权重的电压时，计算斜率和截距以确定电压和权重的线性方程。对于分离的胸膜丛神经的生物力学测试，使用细剪刀切割神经，并使用自定义夹子夹住神经的切割侧。用黑色丙烯酸漆标记夹紧的神经段，并在动物内部放置一厘米尺，以设置数据分析的刻度。

在相机软件中，将摄像机视野直接放在测试段上，以便监控标记的运动和/或位移，并确定特定时间点的实际组织应变。记录基线测量值，例如神经从表插入身体的高度、表上的夹子高度、执行器的角度和组织的完整长度。打开编程软件，然后单击”运行”。

输入文件名和位移，然后单击初始化和 TARE。单击”开始”可拉伸胸面丛段。组织将按每分钟500毫米的指定速率拉扯，直到神经组织的任何部分发生完全失败。

然后保存视频文件、应用的拉伸载荷、组织的位移和测试持续时间，并记录故障点作为组织破裂的片段。在四个胸围段的代表性测试中，获得的故障载荷为8.3牛顿，新生儿神经组织样本在伸展时的平均应变失败为35%。神经的一些区域承受的应变高于其他区域，表明神经长度存在非一视损伤。

摄像机数据允许识别此实验中的失败位置与前人近在一起。重要的是要确保动物被深度麻醉，没有疼痛或不适的迹象，第二，校准称重细胞，第三，牢固地夹住组织。这种体内动物模型可用于研究不同程度的伸展后胸丛组织中的功能和组织学变化，并研究复杂的分娩情景。