通过电生理场记录研究跨体海马CA1的长期突触可塑性

长期突触可塑性，特别是长期增效和长期抑郁症，已经沿着海马体的横向被广泛研究。它也沿纵向方向观察。然而，当涉及到纵向方向时，对海马体的纵向CA1轴在突触可塑性方面的关注很少。

我们实验室的一份先前出版物显示，海马体的CA1金字塔神经元形成关联连接，可以支持突触可塑性。为了进一步理解此协议，建议您参考上一个出版物，并给出以下引用。注射聚氨酯麻醉小鼠。

将完全麻醉的鼠标放在设置为 37 摄氏度的加热垫上。涂抹眼凝胶滋润眼睛。用眼夹牢牢固定鼠标的头骨。

眼夹为实验者在外科手术期间提供了自由的移动性。而且，它对于涉及听觉皮层的实验也特别有用。然而，必须注意获得精确的立体税坐标。

用手术刀分离小鼠腹间骨和腹骨的皮下组织和肌肉。用棉签擦干杜拉物质。然后你刺穿西斯特纳磁石排出脑脊液。

连接棉签，不断排出脑脊液。切除头皮上的皮肤，保持暴露区域干燥。使用维尼亚卡钳的辅助标记与海马区域对应的点。

在显微镜下观察时，使用手术刀或高速钻头，在海马的后体区域上方的头骨上切开切口。通过应用生理盐水或惰性油，保持暴露的脑组织湿润。将刺激和记录电极牢固地固定并定位在立体税支架中。

调整CA1后海马体上方的刺激和记录电极。在立体轴坐标中使用小鼠大脑作为定位后向纵向CA1海马区域坐标的指南。对于使用多通道电极进行录制，请首先使用第一通道定位 CA1 海马区域的立体轴坐标。

放置剩余的电极，使刺激和记录电极的角度在 30 度到 60 度范围内，相对于中线从啤酒点。此角度对应于 CA1 海马区域的纵向方向。打开录制系统。

打开用于记录和数据采集的神经软件。使用微操纵器缓慢降低记录和刺激电极，直到它只接触大脑表面。当电极接触大脑表面时，观察阻抗的增加。

这可以在屏幕上显示的红色通道中观察到。缓慢地将电极降到与CA1海马区选择的立体轴坐标对应的近似深度。给予刺激，直到观察到稳定的唤起刺激后兴奋性电位。

执行输入输出曲线以检测最大刺激强度。使用输入输出曲线设置基线强度，并设置激发高频刺激或低频刺激的刺激强度。在高频刺激或低频率刺激后一小时内记录局部全部潜力。

导出数据并使用首选软件进行分析。差400毫升已经准备的切片溶液到一个单独的烧瓶和氧酸盐约20分钟。缺氧切片溶液200毫升差。

盖上副膜，转移到80度冰柜约20分钟，使泥浆。在脑片保持室中余下200毫升切片溶液，在32摄氏度的水机器人中连续冒泡。在烧杯中拿出冷冻切片溶液和约 50 ml 的差。

斩首麻醉小鼠。切开覆盖小鼠头骨的皮肤，沿着中线切开头骨到腹骨。用钝钳打开头骨。

用铲子轻轻挖出大脑，放在烧杯中的冰镇溶液中。用手术刀刀片将两个大脑半球沿中线分开。用铲子轻轻分离海马从皮层中分离出来，从而隔离海马。

切掉分离的海马体的隔膜和时间端。在切片板上涂抹少量胶水。对于纵向 CA1 海马切片，用胶水将海马体的 CA3 区域连接到切片板上。

对于横向切片，它将作为控制，将海马的腹端连接到振动体的切片板。放在切片室中。设置振动器参数。

用振动器切开附的海马。一个好的纵向CA1海马脑切片将有一层CA1，和两层凹陷陀螺。此外，CA1 区域的地层和地层半径也存在。

或者，横向海马脑切片将有凹陷的陀螺CA3和CA1区域在机智。将大脑切片转移到水机器人中的大脑切片保持室。在32摄氏度的温度下孵育20分钟，使室温恢复。

以每分钟 2 ml 的速度连续将 ACS 农奴注入录音室。将大脑切片转移到记录室中，用钝钳调整脑片的位置，用 hap 将其保持到位。打开软件进行数据采集。

纵向脑片。对于纵向切片，将刺激和记录电极定位在层或层中。将刺激电极放在大脑切片的隔膜或时间侧，并记录在同一层。

或者，将刺激电极定位在层半径中，将刺激电极放在脑片的隔膜或时间侧。对于横向切片作为控制，将刺激电极定位在CA3沙弗辅助通路区域，将记录电极定位在CA1区域。打开隔离器刺激发生器并给予刺激。

调整记录电极深度，直到观察到稳定的激发兴奋后充满电位。执行输入输出曲线以检测最大刺激强度。使用输入输出曲线设置基线记录唤起高频刺激或低频率刺激的刺激强度。

有关诱导单期强位或长期抑郁症的参数，请参阅随附的 PDF。由于体内高频刺激，激发的兴奋后突触电位增加。这表明纵向海马CA1支持长期强权。

对于纵向海马CA1脑片，在地层和地层弧度体的隔膜和时间侧观察到对高频刺激的反应增加。这表明沿纵向海马CA1区域诱导的突触可塑性不是线性的或方向特异性的。使用已经建立的长期抑郁症治疗方案，在体内和体外均无长期抑郁症。

作为一个结论，我们已经告诉你如何研究长期突触可塑性在纵向海马CA1区域在体内和体外。有关协议的更多详细信息，请参阅此视频随附的 PDF，以帮助您调查您自己的实验室中纵向海马 CA1 区域的长期突触可塑性。