兔子骨增增的千叶模型,用于骨代材料骨生长和新血管化的评估

在这里，我们提出了一个兔子的手术方案，目的是评估骨替代材料的骨再生能力。这种兔子钙质模型的原理是垂直生长在头骨皮质部分上的新骨组织。该模型允许在骨生长支持和新血管化支持方面评估口腔和颅面骨再生的骨替代材料。

该模型在测量成熟骨骼上方新骨组织的异位生长时，对评估骨骼再生非常重要。与传统模型相比，新骨骼再生以填补人工创建的缺陷，最终回到初始水平。通过使用固定在兔子头骨上的大圆柱体，骨诱导，骨引，骨发生，和血管发生诱导的材料，可以评估对活体或牺牲的动物。

演示这个程序的将是劳林·玛格，我们实验室的副研究员，还有我自己。给动物下部后，将静脉注射的血管从耳朵放入边缘静脉，并关闭，直到插管完成。将兔子放在容易的位置，并保持其头部垂直延伸。

通过喷洒10%利多卡因，局部麻醉气管。将小直径的气管滑入兔子的气管，直到管中可以听到气流。这将打开喉部，并方便插入最终管。

接下来，将导轨插入管子，将管子的位置固定到气管中。拆下小直径管，滑动导轨上的确定气管。拆下导轨，将气囊充气在气管末端，以密封并阻止设备进入气管。

持续大量使用芬太尼诱导镇痛。每公斤二到四毫克的异丙酚诱导麻醉，每小时每公斤四毫升的醋酸环环酯来维持异光条件。立即用 3% 的在纯氧中给动物通风。

首先，将兔子放在手术台上设定为39摄氏度的加热垫上，然后放置直肠温度探头。剃头皮。用10%的碘擦洗皮肤，以消毒现场。

然后，用无菌的手术窗帘将兔子披上，切掉头骨的进入区域。第二次用10%的碘消毒手术现场。首先，在局部麻醉，在头骨上注射利多卡因。

使用手术刀沿着钙质下垂线沿皮肤从轨道到外部腹膜突出，确保腹膜被倾斜。使用前置电梯轻轻提升切口两侧的周环。用无菌盐水冲洗现场。

首先，定位头骨上的介质和冠状缝合线。请注意，这些解剖线形成十字。气缸将放置在横孔定义的每个象限中，确保圆柱线的边缘不在缝合线上。

将第一个气缸放在左上象限上，使设备尽可能平整。用强手压和螺钉固定气缸的位置，直到感觉到阻力。确保螺钉盖与气缸卡舌齐平。

固定气缸的其他卡舌，以同样的方式将气缸紧贴在头骨上。确保圆柱体密封固定在骨骼上。然后重复整个过程，将圆柱体固定到其他三个象限上。

首先，在盐水灌溉下钻一个内孔，在圆柱体所围区中心骨上用圆毛刺。确保出现出血。接下来，沿轴钻两个中间孔，穿过气缸内边缘的两个卡舌螺钉。

沿着垂直轴，在圆柱体内边缘钻两个中间孔。对其他三个气缸重复此钻孔过程。然后，用材料样品将第一个气缸填充到边缘。

通过安装盖来关闭气缸。对其他三个气缸重复此加注过程。用间歇性不可松吸的缝合线关闭气缸上方的皮肤，并在伤口上涂抹可喷敷料。

在此之后，停止镇痛和麻醉供应，并检查自主呼吸的恢复。一旦动物恢复自主呼吸，停止通风。在完全觉醒之前，将动物保持在纯氧下。

注射盐酸的溴化物皮。手术后镇痛，每六小时重复一次注射，为期三天。让动物完全清醒，然后再将其转移到其通常的外壳与水和完整的喂养。

本视频中描述的模型专门用于评估骨代生、骨电导管、骨质生成和骨代用品的新血管化。手术后，可以通过对活的动物使用骨断层扫描，在不同的时间点监测骨骼生长。额外的分析需要牺牲动物。

安乐死后，样品被分切，气缸被小心地拆下。然后用PBS中4%甲醛溶液进行活检。在此之后，微断层扫描可用于评估骨骼生长。

样品也可以处理组织染色。然后，可以更具体地完成理论形态分析和特定的染色。由于此协议是手术方法，因此所有步骤都至关重要，必须正确遵循。

重要的是要接受动物实验的训练，特别是在兔子处理和麻醉方面。除了所述方法外，也可以使用流式细胞学更具体地分析细胞。例如，也可以使用纳米缩进来评估材料进化、骨组织成熟和力学。

在这个模型的辅助下，进行了许多评估。例如，对于钛或陶瓷笼、GBM膜、骨质因子、新生儿替代物或骨再生过程中的新血管化机制。