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Verbesserung der Genauigkeit der zytometrischen Bewertung des mitochondrialen Membranpotenzials in hämatopoetischen Stamm- und Vorläuferzellen durch die Hemmung von Efflux-Pumpen
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JoVE 杂志 生物学
Improving the Accuracy of Flow Cytometric Assessment of Mitochondrial Membrane Potential in Hematopoietic Stem and Progenitor Cells Through the Inhibition of Efflux Pumps
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Verbesserung der Genauigkeit der zytometrischen Bewertung des mitochondrialen Membranpotenzials in hämatopoetischen Stamm- und Vorläuferzellen durch die Hemmung von Efflux-Pumpen

DOI:
10.3791/60057-v

•

07:17 min

•

July 30, 2019

•

, ,
1Ruth L. and David S. Gottesman Institute for Stem Cell and Regenerative Medicine Research,Albert Einstein College of Medicine, 2Departments of Cell Biology and Stem Cell Institute,Albert Einstein College of Medicine, 3Department of Medicine,Albert Einstein College of Medicine, 4Albert Einstein Cancer Center and Diabetes Research Center,Albert Einstein College of Medicine

Chapters

  • 00:04Title
  • 00:43Bone Marrow Isolation
  • 02:22Immunostaining for Detection of Hematopoietic Stem Cells
  • 03:28TMRM Staining
  • 04:17Flow Cytometry
  • 05:38Results: Flow Cytometry Analysis of Mitochondrial Membrane Potential
  • 06:33Conclusion

Summary

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Xenobiotische Efflux-Pumpen sind hochaktiv in hämatopoetischen Stamm- und Vorläuferzellen (HSPCs) und verursachen die Extrusion von TMRM, einem mitochondrialen Membranpotenzial fluoreszierender Farbstoff. Hier stellen wir ein Protokoll zur genauen Messung des mitochondrialen Membranpotenzials in HSPCs durch TMRM in Gegenwart von Verapamil, einem Efflux-Pumpeninhibitor, vor.

Tags

Flow CytometryMitochondrial Membrane PotentialHematopoietic Stem CellsProgenitor CellsEfflux PumpsTMRMVerapamilBone Marrow IsolationLineage CocktailCD135

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