重建显微外科缺血再灌注损伤研究的临床前大鼠模型

缺血-再灌注损伤是重建显微外科皮瓣衰竭的主要原因。本视频描述了用于研究这种病理生理学的临床前动物模型。这种基于大鼠表面的果皮表皮瓣模型可能允许评估不同的疗法和化合物，以抵消缺血-再灌注损伤相关的损伤。

显微外科重建是各种缺陷的理想的选择。然而，这些程序确保一个强制性的缺血期，然后重新灌注。这一时期通常耐受性良好，微手术手术的成功率超过90%，但是，只有73.7%的皮瓣需要手术修复是完全安全的。

此外，在手指外伤的再植的情况下，成功率约为60%，在复合组织再移植的情况下，由于损伤激活先天免疫，患缺血-再灌注损伤的投影百分比增加。因此，研究这种病理生理现象是十分利应的。要开始此过程，请使用手术标记绘制一个三厘米的六厘米的皮瓣，确保六厘米的边之一与腹部中线匹配。

接下来，在腹部中线做一个六厘米的皮肤切口，两个垂直的三厘米切口，以及一个与第一个切口平行的六厘米。要开始解剖指定的皮瓣，请使用剪刀和Adson钳子提高皮瓣。轻轻地将皮瓣从颅骨区域拉向颅骨区域。

在不接触皮瓣或尽可能少地抓住皮瓣皮瓣的情况下，尽可能少地去解剖皮瓣，以免损坏船壁。使用 8-0尼龙缝合线通过连结遮挡的萨芬体、横向环形股骨和近体骨股骨。夹住血管皮囊，然后切开，开始八小时缺血期。

使用肝素盐水溶液对皮瓣进行洗除，然后从微循环中去除滞留的血液。使用 10-0 尼龙缝合线进行显微手术。在八个小时的缺血后，通过取出微血管夹重新注入皮瓣，并检查血管的光度。

首先，使用中转时间超声波流量计和微显外科探针评估血流。将目标容器放在流量探头的超声波传感窗口中，以量化流量。当实现良好的耦合，并且容器放置在声学窗口中时没有任何张力，请单击显示屏上的记录按钮以存储数据。

在此之后，使用4-0可吸收的缝合线关闭皮肤。要评估活门的微循环，请使用激光斑点对比度分析。通过单击文件、新记录，对每个样本和每个后续研究进行新的记录。

将打开一个显示设置面板的新窗口。在这里，编辑项目名称、主题、运算符和记录名称的信息。通过相对于组织移动激光来调整工作距离。

将激光头放大或缩小，朝向感兴趣的组织。在图像设置中，通过输入所需的宽度和高度来标准化测量区域。将点密度设置为高。

在图像捕获设置中，选择录制的帧速率和持续时间。然后，单击记录按钮开始录制。设置面板由录制面板替换，数据将自动保存。

在过程中拍摄快照以进行进一步比较。在此之后，使用 ImageJ 软件测量生存和坏死区域，首先在活门点放置一把尺子，并拍摄控制照片进行宏观测量。在 ImageJ 工具箱中，选择直线并在标尺的一厘米上绘制一条线。

单击分析，设置比例，并在已知距离的文本框中输入一厘米的值。单击多边形选择工具，在活门上绘制多边形线以计算可行区域。单击分析，测量以获取面积值。

然后，在壳体前对动物进行术后敷料，以防止自残。手术后七天，拍摄手术区域，以便对皮瓣生存和坏死区域进行宏观测量。使用前面描述的激光斑点对比度分析技术，可视化和量化灌注差异，以评估活门的微循环。

宏观分析后，取出4-0缝合线，提高皮瓣，并使用传递时间超声波重新评估血管球型血流。通过纵向将活门分成两个部分进行组织采样，测量 1.5 厘米和 6 厘米。在微手术性麻醉后，我们立即获得了比文献中建议的最小流量更高的血流量值。

因此，所有显微手术的麻醉机在手术后一周都获得专利。利用激光斑点对比分析技术，可以观察缺血侮辱期间血流的微循环退化。这包括皮瓣再灌注和内膜灌注期间的即时灌注，灌注较少的不同区域有较高的术后皮瓣坏死风险，在研究结束后七天确实坏死。

8小时缺血后皮瓣生存面积及其随后的再灌注约为40%之前公布的结果显示，当该模型与没有缺血侮辱的皮瓣进行比较时，其统计显著差异。记得在不接触皮瓣皮囊的情况下解剖皮瓣，或尽可能少地抓住皮瓣，以避免损坏血管壁，并执行适当的显微手术性神经性血管，以避免因手术技术引起的并发症。术中，过渡时间超声技术使我们能够量化微手术性神经性血管的血流量，从而预测皮瓣灌注。

术后，激光斑点对比度分析允许自由活门内流动的半连续性实时映射。这是一个很有前途的技术，但还需要进一步的研究。本视频描述了一个合适的模型，用于评估治疗剂，以抵消缺血-再灌注损伤在重建显微外科领域的协议。