Isolation of Stem-like Cells from 3-Dimensional Spheroid Cultures

Wen-Yang Hu; Dan-Ping Hu; Lishi Xie; Lynn A. Birch; Gail  S. Prins

doi:10.3791/60357

JoVE Journal
Cancer Research

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JoVE Journal Cancer Research

Isolation of Stem-like Cells from 3-Dimensional Spheroid Cultures

从3维球体培养中分离出类似干细胞的细胞

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09:06 min

December 13, 2019

DOI: 10.3791/60357-v

Wen-Yang Hu¹, Dan-Ping Hu¹, Lishi Xie¹, Lynn A. Birch¹, Gail S. Prins^1,2,3

¹Department of Urology, College of Medicine,University of Illinois at Chicago, ²Department of Pathology, College of Medicine,University of Illinois at Chicago, ³University of Illinois Cancer Center, College of Medicine,University of Illinois at Chicago

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

我们使用人类原发性前列腺上皮细胞，报告一种新的无生物标记方法，通过基于球体的标签保留测定，对干细胞进行功能表征。介绍了 BrdU、CFSE 或远红色 2D 细胞标记的分步协议;三维球形形成;通过免疫细胞化学进行标签保留干细胞鉴定;和隔离由FACS。

干细胞分离仍然是一个主要的挑战，因为使用当前方法共同隔离祖先细胞。我们开发了一种新型无生物标志物的检测方法，从混合祖体中分离出静态干细胞。这种基于球形的标签保留分析的主要优点是，它可以利用CFSE或远红标签，通过FACS从其子祖先中扩展和分离活干细胞。

虽然传统疗法可以根除大多数前列腺癌细胞，但癌症干细胞仍然由于治疗阻力而存在，从而推动疾病进展。干细胞样细胞分离将允许识别新的基因，这些基因可以在治疗上共同定位，以有效缓解疾病。我们的标签保留测定适用于从各种组织和细胞中分离的正常干细胞，以及癌症干细胞研究。

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