Name: 考达尔静脉葡萄糖注射剂在益生菌小鼠中检测共享血液供应的建立 (视频) | JoVE Journal
Uploaded: 2020-02-06T12:30:00.000+00:00
Duration: 6 min 27 s
Description: 学习一种通过尾静脉葡萄糖注射检测联体小鼠血液嵌合状态的非致死性方法。该技术使用C57BL/6雄性小鼠，可安全快速地验证血液循环共享，为活体生理病理研究提供可靠模型。

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

本工作得到国家自然科学基金（81570399 和 81773735）、国家重点研发计划——中医药现代化研究项目（2017YFC1702003）以及黑龙江省杰出青年科学基金（JC2017020）的资助。

所有涉及动物及其护理的操作均经哈尔滨医科大学机构动物护理和使用委员会批准。
注意：本方法所需的工具和设备列在材料表中。
1. 材料与动物的准备
<ol>
	<li>从标准实验动物供应商处订购体重在 20 g–25 g 之间的 C57BL/6 雄性小鼠。</li>
	<li>将小鼠饲养在 12 小时光照：12 小时黑暗循环、24−26 °C 的环境中，并可自由获取水和食物。</li>
</ol>
2. 连体共生
<ol>
	<li>通过腹腔注射20 g/L的2,2,2-三溴乙醇进行小鼠麻醉，剂量为0.1 mL/10 g。通过肌肉松弛、呼吸缓慢而平稳、皮肤刺激反射消失以及角膜反射消失等指标确认麻醉效果良好。</li>
	<li>使用棉签涂抹眼膏，防止眼睛干燥。</li>
	<li>按照先前所述方法进行联体共生手术5。
	<ol>
		<li>将小鼠置于仰卧位。使用电动剃毛器，分别从一只小鼠左侧和另一只小鼠右侧的肘关节上方约1 cm处至膝关节下方1 cm处进行剃毛。再使用脱毛膏彻底清除剃毛区域的残余毛发。</li>
		<li>用碘伏擦拭剃毛区域。将小鼠置于覆盖无菌垫的加热垫上。</li>
		<li>使用锐利剪刀，在每只小鼠剃毛侧的皮肤上，从肘关节上方0.5 cm处至膝关节下方0.5 cm处，沿纵轴方向剪开皮肤。</li>
		<li>沿切口方向轻柔地将皮肤与皮下筋膜分离。</li>
		<li>使用3-0缝线将联体小鼠的鹰嘴突与膝关节固定连接。</li>
		<li>使用连续缝合技术，以5-0缝线缝合剃毛区域的皮肤。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>每只小鼠皮下注射0.5 mL的0.9% NaCl，以防止脱水。</li>
	<li>每只小鼠肌肉注射曲马多（10 mg/25 g/天），以缓解疼痛。</li>
</ol>
3. 循环嵌合体的验证
<ol>
	<li>葡萄糖波动法 
	注意：在连体手术后的第10天，使用葡萄糖波动法（无需禁食）验证连体动物之间血液循环嵌合构建成功。
	<ol>
		<li>通过腹腔注射20 g/L 2,2,2-三溴乙醇，按每10 g体重0.1 mL的剂量对连体动物进行麻醉。</li>
		<li>将供体小鼠固定在静脉可视化小鼠尾部固定器中。</li>
		<li>用浸有70−75%酒精的棉球擦拭其中一只连体动物尾部侧面的尾静脉，以清洁尾部并扩张血管。</li>
		<li>右手持含有葡萄糖的1.0 mL注射器，使针头与静脉平行（角度小于15°）。</li>
		<li>在距离尾尖约2−4 cm的位置插入针头。</li>
		<li>在10秒内向供体尾静脉注射100 µL葡萄糖（1.2 g/kg）。 
		注意：“供体”指通过尾静脉接受葡萄糖注射的连体动物；“受体”指另一只未直接接受葡萄糖的连体动物。</li>
		<li>用碘伏清洁脚趾，使用剪刀剪去供体和受体小鼠的脚趾，并在葡萄糖注射后的不同时间点（1分钟、5分钟、10分钟、15分钟、20分钟、30分钟、40分钟、50分钟和60分钟）采集血滴。每次采血时清除血凝块，以避免造成更多损伤。 
		注意：每次检测所需血量为10–25 µL，总采血量为90–225 µL。</li>
		<li>将血液滴加至血糖仪试纸的中心区域，用于检测血糖水平。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>使用伊文思蓝复染剂作为阳性对照3。
	<ol>
		<li>向供体小鼠腹腔注射200 µL 0.5%伊文思蓝复染剂。</li>
		<li>2小时后，通过腹腔注射20 g/L 2,2,2-三溴乙醇（每只小鼠按0.2 mL/10 g体重）处死连体动物，并通过心脏穿刺采集两只连体动物的血液。</li>
		<li>将血液样本在916 × g 条件下离心15分钟。</li>
		<li>从上清液中收集血清。</li>
		<li>用0.9% NaCl将血清按1:50比例稀释。</li>
		<li>使用分光光度计在620 nm波长下测定稀释后血清样本的吸光度。</li>
	</ol>
	</li>
</ol>

<ol><li>Baruch, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Aging-induced+type+I+interferon+response+at+the+choroid+plexus+negatively+affects+brain+function%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Aging-induced type I interferon response at the choroid plexus negatively affects brain function.</a> Science. 346 (6205), 89-93 (2014).</li>
<li>Zhang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Positional+cloning+of+the+mouse+obese+gene+and+its+human+homologue%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Positional cloning of the mouse obese gene and its human homologue.</a> Nature. 372 (6505), 425-432 (1994).</li>
<li>Torres, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Parabiotic+model+for+differentiating+local+and+systemic+effects+of+continuous+and+intermittent+hypoxia%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Applied+Physiology+%281985%29%22%5BJournal%5D)">Parabiotic model for differentiating local and systemic effects of continuous and intermittent hypoxia.</a> Journal of Applied Physiology (1985). 118 (1), 42-47 (2015).</li>
<li>Loffredo, F. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Growth+differentiation+factor+11+is+a+circulating+factor+that+reverses+age-related+cardiac+hypertrophy%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Growth differentiation factor 11 is a circulating factor that reverses age-related cardiac hypertrophy.</a> Cell. 153 (4), 828-839 (2013).</li>
<li>Kamran, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Parabiosis+in+mice%3A+a+detailed+protocol%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Parabiosis in mice: a detailed protocol.</a> Journal of Visualized Experiments. (80), e50556(2013).</li>
<li>Conboy, M. J., Conboy, I. M., Rando, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Heterochronic+parabiosis%3A+historical+perspective+and+methodological+considerations+for+studies+of+aging+and+longevity%5BTitle%5D)+AND+%22Aging+Cell%22%5BJournal%5D)">Heterochronic parabiosis: historical perspective and methodological considerations for studies of aging and longevity.</a> Aging Cell. 12 (3), 525-530 (2013).</li>
<li>Eggel, A., Wyss-Coray, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+revival+of+parabiosis+in+biomedical+research%5BTitle%5D)+AND+%22Swiss+Medical+Weekly%22%5BJournal%5D)">A revival of parabiosis in biomedical research.</a> Swiss Medical Weekly. 144, w13914(2014).</li>
<li>Brack, A. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ageing+of+the+heart+reversed+by+youthful+systemic+factors%21%5BTitle%5D)+AND+%22EMBO+Journal%22%5BJournal%5D)">Ageing of the heart reversed by youthful systemic factors!</a> EMBO Journal. 32 (16), 2189-2190 (2013).</li>
<li>Wu, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Circulating+cells+contribute+to+cardiomyocyte+regeneration+after+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation+Research%22%5BJournal%5D)">Circulating cells contribute to cardiomyocyte regeneration after injury.</a> Circulation Research. 116 (4), 633-641 (2015).</li>
<li>Kaiser, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((%27Rejuvenation+factor%27+in+blood+turns+back+the+clock+in+old+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">'Rejuvenation factor' in blood turns back the clock in old mice.</a> Science. 344 (6184), 570-571 (2014).</li>
<li>Rando, T. A., Finkel, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cardiac+aging+and+rejuvenation--a+sense+of+humors%3F%5BTitle%5D)+AND+%22New+England+Journal+of+Medicine%22%5BJournal%5D)">Cardiac aging and rejuvenation--a sense of humors?</a> New England Journal of Medicine. 369 (6), 575-576 (2013).</li>
<li>Heidt, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Differential+contribution+of+monocytes+to+heart+macrophages+in+steady-state+and+after+myocardial+infarction%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation+Research%22%5BJournal%5D)">Differential contribution of monocytes to heart macrophages in steady-state and after myocardial infarction.</a> Circulation Research. 115 (2), 284-295 (2014).</li>
<li>McPherron, A. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Through+thick+and+thin%3A+a+circulating+growth+factor+inhibits+age-related+cardiac+hypertrophy%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation+Research%22%5BJournal%5D)">Through thick and thin: a circulating growth factor inhibits age-related cardiac hypertrophy.</a> Circulation Research. 113 (5), 487-491 (2013).</li>
<li>Villeda, S. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Young+blood+reverses+age-related+impairments+in+cognitive+function+and+synaptic+plasticity+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Medicine%22%5BJournal%5D)">Young blood reverses age-related impairments in cognitive function and synaptic plasticity in mice.</a> Nature Medicine. 20 (6), 659-663 (2014).</li>
<li>Katsimpardi, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vascular+and+neurogenic+rejuvenation+of+the+aging+mouse+brain+by+young+systemic+factors%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Vascular and neurogenic rejuvenation of the aging mouse brain by young systemic factors.</a> Science. 344 (6184), 630-634 (2014).</li>
<li>Starzl, T. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+lost+chord%3A+microchimerism+and+allograft+survival%5BTitle%5D)+AND+%22Immunology+Today%22%5BJournal%5D)">The lost chord: microchimerism and allograft survival.</a> Immunology Today. 17 (12), 577-584 (1996).</li>
<li>Coleman, D. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+historical+perspective+on+leptin%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Medicine%22%5BJournal%5D)">A historical perspective on leptin.</a> Nature Medicine. 16 (10), 1097-1099 (2010).</li>
<li>Salpeter, S. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Systemic+regulation+of+the+age-related+decline+of+pancreatic+beta-cell+replication%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetes%22%5BJournal%5D)">Systemic regulation of the age-related decline of pancreatic beta-cell replication.</a> Diabetes. 62 (8), 2843-2848 (2013).</li>
<li>Sheldon, R. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gestational+exercise+protects+adult+male+offspring+from+high-fat+diet-induced+hepatic+steatosis%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Hepatology%22%5BJournal%5D)">Gestational exercise protects adult male offspring from high-fat diet-induced hepatic steatosis.</a> Journal of Hepatology. 64 (1), 171-178 (2016).</li>
<li>Martineau, M. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+metabolic+profile+of+intrahepatic+cholestasis+of+pregnancy+is+associated+with+impaired+glucose+tolerance%2C+dyslipidemia%2C+and+increased+fetal+growth%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetes+Care%22%5BJournal%5D)">The metabolic profile of intrahepatic cholestasis of pregnancy is associated with impaired glucose tolerance, dyslipidemia, and increased fetal growth.</a> Diabetes Care. 38 (2), 243-248 (2015).</li>
<li>Wang, F., Liu, Y., Yuan, J., Yang, W., Mo, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Compound+C+Protects+Mice+from+HFD-Induced+Obesity+and+Nonalcoholic+Fatty+Liver+Disease%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Endocrinology%22%5BJournal%5D)">Compound C Protects Mice from HFD-Induced Obesity and Nonalcoholic Fatty Liver Disease.</a> International Journal of Endocrinology. 2019, 3206587(2019).</li>
</ol>

作者无任何利益冲突需要披露。

异种共生（parabiosis）是指通过实验手段将两只活体动物进行外科手术连接，以建立共同的血液循环系统6,7,8。该模型的优势在于，单个个体产生的物质可同时作用于两只动物。因此，异种共生模型可用于探究某种物质或因子在相关疾病中的作用，从而得出许多有意义且具创新性的结论。鉴于其重要的应用价值，该模型已显著促进了人们对心血管系统疾病8,9,10,11,12,13、神经系统疾病14,<sup cl...

异种共生是一种将两个生物体通过手术连接在一起的建模方法，二者共同发育形成一个具有共享循环系统的单一生理系统1。由于个体产生的物质可通过共用的循环系统同时作用于两个生物体，这类模型已被广泛用于生理学研究。自19世纪中期Paul Bert首次开展异种共生实验以来2，构建异种共生模型的方法已逐步标准化。然而，长期以来一直缺乏一种直接且便捷的方法来验证血液嵌合状态是否成功建立。已有研究报道，可通过向其中一个共生体腹腔注射0.5%伊文思蓝染料，随后使用酶标仪测定两个共生体血液中伊文思蓝的吸光度，从而评估交叉循环情况3。另一种方法则需要使用特定品系的小鼠，使每只共生体分别携带CD45.1+和CD45.2+标记的单核细胞，再通过流式细胞术检测脾脏或血液中单核细胞上两种标记物的频率，以确定血液嵌合状态4。然而，这些方法往往对动物具有致死性或操作繁琐，因此迫切需要一种安全、简便且能快速可靠验证异种共生模型的方法。在本研究中，我们建立了一种新的验证方法，并在小鼠异种共生模型中进行了验证。该方法通过血糖仪检测从小鼠尾静脉采集的血液样本中的葡萄糖浓度，通过观察供体与受体小鼠血糖水平变化的模式来判断循环系统的嵌合情况。我们将此方法命名为&#34;葡萄糖波动法&#34;。该验证方法的应用不仅限于小鼠，还可推广至除严重葡萄糖代谢紊乱以外的多种病理模型。该操作流程简单、省时且安全。

<table><tbody><tr><td>弯头镊</td><td>JZ surgical Instruments, China</td><td>J31340</td><td></td></tr><tr><td>精细剪刀</td><td>JZ surgical Instruments, China</td><td>WA1030</td><td></td></tr><tr><td>持针器</td><td>JZ surgical Instruments, China</td><td>60017961</td><td></td></tr><tr><td>2.5 mL 注射器</td><td>Agilent, USA</td><td>5182-9642</td><td></td></tr><tr><td>三溴乙醇</td><td>Sigma-Aldrich, USA</td><td>T48402-5G</td><td></td></tr><tr><td>青霉素</td><td>Solarbio, China</td><td>IP0150</td><td></td></tr><tr><td>曲马多</td><td>Yijishiye, China</td><td>YJT712520</td><td></td></tr><tr><td>血糖仪</td><td>Roche Diabetes Care, Indiana</td><td>Accu-Chek Active test strips</td><td></td></tr><tr><td>伊文思蓝复染剂</td><td>Solarbio, China</td><td>G1810</td><td></td></tr><tr><td>脱毛膏</td><td>Nair, USA</td><td>LL9161</td><td></td></tr><tr><td>加热垫（保温毯）</td><td>Kent Scientific Corp, USA</td><td>TP-22G</td><td></td></tr><tr><td>电动剃须刀</td><td>Codos, China</td><td>CP-5000</td><td></td></tr><tr><td>3-0,5-0&lt;br/&gt; 外科缝合线</td><td>上海医用缝合针厂, 中国</td><td>SYZ 3-0#, SYZ 5-0#</td><td></td></tr></tbody></table>

通过尾静脉葡萄糖注射检测联体小鼠间共享血液供应的建立

Detecting Establishment of Shared Blood Supply in Parabiotic Mice by Caudal Vein Glucose Injection

异种共生是一种通过手术将两只动物沿身体纵轴并列连接的实验方法。本文介绍了一种通过尾静脉注射葡萄糖来检测异种共生体血液嵌合成功建立的方案。构建了异种共生小鼠模型，通过尾静脉向供体小鼠注射葡萄糖，并在不同时间点使用血糖仪测量两只小鼠的血糖水平变化。结果显示，注射葡萄糖后，供体小鼠的血糖水平在1分钟后迅速升高，随后缓慢下降；而受体小鼠的血糖水平在注射后15分钟达到峰值。使用伊文思蓝作为葡萄糖的阳性对照，也获得了类似结果。血糖水平的同步波动表明，两只小鼠之间的血液循环已成功建立。

在六只供体小鼠中，血糖水平急剧升高至 26.5 µmol/L （增加173%）在注射后平均1分钟时 100 µL 通过尾静脉注射葡萄糖（1.2 g/kg）后，逐渐降低至 13.3 µmol/L 60分钟时。在接受注射的小鼠中，血糖在注射后缓慢上升，在15分钟时达到第一个峰值水平（升高47%） 12.2 µmol/L）。根据上述结果，循环嵌合体的标准设定如下：1）血糖水平急剧升高（至少升高100%或以上）； &gt;20 µmol/L供体小鼠在注射葡萄糖后1分钟内出现，以及受体小鼠在注射后15分钟内血糖水平显著升高（至少升高37%）（图1).
伊文思蓝染料在连体动物血清中的浓度也表明血液循环嵌合体构建成功（图2）。我们在测量血糖后，使用5 mL 2,2,2-三溴乙醇（20 g/L）对连体动物实施安乐死。连体动物之间的皮下血管连接清晰可见...

本文介绍了一种通过尾静脉注射葡萄糖来检测两个连体共生小鼠成功建立共享血液循环的新方法，该方法造成的损伤极小，且不会导致连体共生小鼠死亡。

异种共生是一种实验方法，通过手术将两只动物沿身体纵轴并列连接。本文介绍了一种……的实验方案。

本方案为循环嵌合体的验证提供了一种改进的方法，同时提供了一种用于生物医学研究的高效异种共生模型构建方法。与现有用于检测异种共生体中血液嵌合状态的方法相比（这些方法通常具有致死性或操作繁琐），本方案安全且简便，可实现快速而可靠的验证。尽管该方法主要用于异种共生模型中血液嵌合状态的检测，但也可应用于任何涉及异种共生操作的生物医学研究。最具挑战性的步骤是葡萄糖注射。因此，在进行实验操作之前，务必先练习尾静脉注射，或使用静脉可视化小鼠尾部固定装置。确认小鼠对足底反射无反应后，将两只20至25克的麻醉C57黑6雄性小鼠置于仰卧位，并使用电动剃毛器，分别从小鼠肘关节上方约1厘米处至膝关节下方1厘米处，彻底剃除第一只小鼠的左侧和第二只小鼠的右侧体表毛发。在每只动物的去毛皮肤上进行纵向皮肤切口前，使用脱毛膏去除残留毛发，切口从肘关节上方0.5厘米处开始，至膝关节下方0.5厘米处结束，然后轻柔地将皮肤与皮下筋膜分离。用3-0缝线连接异种共生体的鹰嘴突与膝部，并用连续的5-0缝线缝合剃毛后的皮肤。随后，每只小鼠每天皮下注射0.5毫升0.9%氯化钠溶液以防止脱水，并按每25克小鼠体重注射10毫克曲马多的剂量进行肌肉注射，以缓解疼痛，连续给药三天。为了通过葡萄糖波动验证异种共生小鼠之间循环系统成功建立，于连体手术后的第10天，将供体小鼠固定在静脉可视化的尾部固定器中，并使用浸有70%至75%乙醇的棉球擦拭其中一只连体小鼠尾部侧面的尾静脉。将1毫升注射器针头从尾尖起2至4厘米处，尽可能平行于静脉方向插入尾静脉，并在10秒内向供体小鼠注射100 µL生理盐水中含1至2 g/kg的葡萄糖。随后使用剪刀剪下供体与受体动物的脚趾，以便在注射后不同感兴趣的时间点采集血滴。然后将每份血样各取一滴，加入血糖试纸的中央，用于检测葡萄糖水平。为通过伊文思蓝染料吸收验证循环系统构建成功，向供体小鼠腹腔注射200 µL 0.5%伊文思蓝复染剂，2小时后通过心脏穿刺采集双小鼠的血液。通过离心分离血清，并将血清转移至锥形管中，用0.9%氯化钠溶液按1:50比例稀释。然后使用分光光度计在620纳米处测定稀释后血清样品的吸光度。在此对六只供体小鼠血糖水平的代表性分析中，尾静脉注射100 µL葡萄糖后，平均在1分钟时血糖迅速升高至26.5 µmol/L。随后，血糖水平逐渐下降，至60分钟时降至13.3 µmol/L。在受体小鼠中，注射后血糖水平缓慢升高，并在15分钟时达到第一个峰值。伊文思蓝染料在连体小鼠血清中的浓度也表明血液循环嵌合体构建成功，且连体小鼠之间的皮下血管连接清晰可见。在连体手术后15天未建立血液嵌合状态的连体小鼠中，当向供体动物注射葡萄糖后，受体小鼠在60分钟内未表现出血糖水平升高。两名受体小鼠血液中伊文思蓝的浓度也未升高，表明葡萄糖波动法的敏感性与伊文思蓝法相当。此外，注射葡萄糖一小时后，血液胰岛素水平显著降低，这是由于葡萄糖水平迅速升高所致，并在三小时时恢复至正常水平，说明注射葡萄糖对胰岛素代谢的影响是可逆的。注意确保针头直接插入尾静脉中。通过该方法确认连体小鼠的血液嵌合状态后，可在活体连体动物中研究其生理病理变化。

detecting-establishment-shared-blood-supply-parabiotic-mice-caudal

Research

科研

JoVE Journal

Biology

生物学

考达尔静脉葡萄糖注射剂在益生菌小鼠中检测共享血液供应的建立

将两个生物体进行异种共生连接可导致形成共用的循环系统。在本方案中，我们描述了在野生型小鼠与组成型表达GFP的小鼠之间建立异种共生连接的手术步骤。...

小鼠异体共生：详细实验方案

胰岛素诱导的血管舒张可调节肌肉灌注，并增加血液与组织间质之间溶质交换可用的微血管表面积（微血管招募）。本文介绍了结合活体显微镜与对比增强超声技术，以同时评估胰岛素在较大血管和微循环中的作用。...

结合活体显微成像与对比增强超声技术研究小鼠后肢胰岛素诱导的血管舒张及肌肉灌注

本文描述了以高脂饮食喂养小鼠以建立饮食诱导的胰岛素抵抗和肥胖模型的方法，并对其代谢特征进行表征。此外，文中提供了进行口服葡萄糖耐量试验和胰岛素耐量试验的详细实验方案，用于监测机体整体葡萄糖代谢的变化。 体内.

研究 体内 高脂饮食喂养小鼠的葡萄糖代谢评估：口服葡萄糖耐量试验（OGTT）与胰岛素耐量试验（ITT）

本研究通过使用稳定同位素标记的葡萄糖示踪剂，对多囊卵巢综合征小鼠模型中的肝脏葡萄糖生成进行直接测定 通过...

多囊卵巢综合征小鼠模型中肝糖生成的评估

本文介绍了一种将专为患者设计的商用连续血糖监测仪植入小鼠体内的简单方法，并提供了用于分析结果的脚本。...

自由活动小鼠中的简易连续血糖监测

本方案描述了一种简单且微创的方法，用于在非肥胖型糖尿病（NOD）-重度联合免疫缺陷小鼠体内移植并成像NIT-1细胞，这些小鼠经来自自发性糖尿病NOD小鼠的纯化脾细胞攻击后建立疾病模型。...

生物发光监测小鼠过继转移自身免疫性糖尿病模型中的移植物存活

高血糖钳夹法用于在维持较高血糖浓度的条件下测定胰岛素的释放。低血糖钳夹法用于测定由反向调节反应诱导的葡萄糖生成。这两种方法采用相同的手术操作。本文中，我们介绍一种用于评估全身葡萄糖代谢的钳夹技术。...

清醒小鼠的高血糖钳夹与低血糖钳夹技术

本方案概述了在小鼠模型中利用气相色谱-质谱法（GC-MS）进行棕色脂肪组织优化的动静脉代谢组学研究的相关方法。这些方法有助于获取关于棕色脂肪组织介导的代谢物交换在整体机体水平上的宝贵信息。...

动静脉代谢组学用于测量棕色脂肪组织中的体内代谢物交换

本文介绍了一种建立卵胞浆内单精子注射（ICSI）-胚胎移植（ET）小鼠模型的方案，可用于观察与年龄相关的葡萄糖代谢变化，这些变化可能归因于ICSI技术，从而为该技术对人类发育潜在的长期影响提供见解。...

监测小鼠子代经胞浆内精子注射后的血糖水平

该方案演示了一种依次从小鼠门静脉和下腔静脉采集血液的方法，以评估肠道微生物代谢物的产生与吸收情况。...

从小鼠下腔静脉依次采集血液，随后采集门静脉血，以评估肠道微生物代谢物

本文提供了通过小鼠完整血管系统灌注以进行葡萄糖刺激的胰岛素分泌（GSIS）实验的详细步骤，作为一种评估胰腺内分泌功能的附加技术，可减少潜在混杂因素的影响。...

通过完整胰腺小鼠血管灌注进行葡萄糖刺激的胰岛素分泌

学习一种通过尾静脉葡萄糖注射检测联体小鼠血液嵌合状态的非致死性方法。该技术使用C57BL/6雄性小鼠，可安全快速地验证血液循环共享，为活体生理病理研究提供可靠模型。

通过尾静脉葡萄糖注射检测联体小鼠间共享血液供应的建立

探索更多视频