Name: 使用二甲基苯甲酸酯和12-O-Tetradecanyl Phorbol-13-醋酸酯（DMBA-TPA）的化学诱导皮肤致癌模型 (视频) | JoVE Journal
Uploaded: 2019-12-19T14:00:00.000+00:00
Duration: 4 min 12 s
Description: 了解使用DMBA和TPA诱导的皮肤癌变模型，用于研究炎症在鳞状细胞癌中的作用。该方法可分离肿瘤起始与进展过程，适用于免疫系统和血管生成研究，为癌症生物学和候选治疗药物测试提供可靠平台。

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本工作由芬兰科学院（资助号 25013080481 和 25013142041（I.J.），286377 和 295814（M.P.），287907（T.J.））、Päivikki 和 Sakari Sohlberg 基金会（M.P.，T.J.）、芬兰医学基金会（T.P.）、坦佩雷大学医院专家责任区竞争性国家研究资助（资助号 9V049 和 9X044（M.P.），9X011 和 9V010（T.J.））、Fimlab 实验室专家责任区竞争性国家研究资助（资助号 X51409（I.J.））、Tays 支持基金会（I.J.，M.P.，T.J.）、坦佩雷结核病基金会（I.J.，M.P.，T.J.）、芬兰文化基金会（M.V.）、Paulo 基金会（T.P.）、芬兰癌症协会（M.P.）以及 Emil Aaltonen 基金会（T.P.）资助。

本方案已获得芬兰国家动物伦理委员会批准（方案编号 ESAVI/23659/2018）。
1. 实验动物、试剂与设备
<ol>
	<li>使用年龄和性别匹配的小鼠。在7–9周龄时开始实验，因为大多数小鼠的皮肤在此年龄段处于休止期（telogen）2。</li>
	<li>在实验过程中观察动物行为，若发现其发生争斗（雄性小鼠中较为常见），应将它们单独饲养。争斗可能导致皮肤破损，从而促进肿瘤形成。由于雌性小鼠攻击性较低，因此更推荐使用。典型的实验组每组动物数量为8–20只24,25,26,27。 
	注意：基于前期研究中观察到的生物学变异进行功效计算，有助于选择足够大的样本量。本文示例中使用的小鼠品系包括Balb/c和C57BL/6，但其他多种小鼠品系（如SENCAR和FVB）以及Wistar和Sprague-Dawley大鼠也已在DMBA-TPA模型中应用2,28,29。实验开始前需获得国家或地方动物实验伦理委员会的许可。除一般福利考虑外，该模型的特异性终点通常为鳞状细胞癌（SCC）和皮肤感染。由于在皮肤上涂抹致瘤化学物质（溶于丙酮）后常引起瘙痒而导致抓痕，这是常见现象，但除此之外动物不应表现出任何不适迹象。定期称重（例如每月两次）有助于评估动物福利状况。</li>
	<li>使用DMBA和TPA，两者均用丙酮稀释。DMBA的工作浓度为250 g/L，每只动物的剂量为200 µL丙酮中含有50 µg DMBA。TPA的储备液浓度为125 g/L，处理浓度为25 g/L，每只动物的TPA剂量为200 µL丙酮中含有5 µg TPA。 
	注意安全：DMBA吞食有害，可能致癌。丙酮易挥发且易燃，可能引起头晕并对眼睛产生刺激。操作时应佩戴呼吸面罩和/或在通风橱内进行。接触上述化学品后应及时更换手套。使用独立通风笼具可防止小鼠饲养期间化学品扩散。使用后应收集接触过DMBA的移液器吸头，并作为危险废物处理。 
	注意：DMBA需避光保存。稀释后的TPA应储存于-20 °C，最好也避光保存。</li>
	<li>准备以下设备：天平、普通毛发剃刀、合适规格的移液器及吸头、普通直尺、数码相机、记录乳头状瘤所用的笔记本和笔或计算机、吸入式麻醉系统或顶部后方带开口的小鼠固定器，以及用于处死小鼠的二氧化碳麻醉系统。</li>
</ol>
2. 皮肤乳头瘤的诱导与促发
<ol>
	<li>剃除背部皮肤的毛发并称量动物体重。之后根据需要剃毛，但化学暴露时不得剃毛。 
	注意：剃毛时需小心避开乳头状瘤区域，避免皮肤产生任何切割伤。每2周称量每只动物体重一次，以监测是否出现潜在的体重下降。</li>
	<li>在剃毛后48小时，使用移液器将50 µg DMBA溶于200 µL丙酮中，局部涂抹于剃毛区域。如有需要，可通过轻度吸入麻醉或使用小鼠固定器固定动物。</li>
	<li>7天后给予首次TPA剂量。将5 µg TPA溶于200 µL丙酮中，使用移液器每周局部涂抹两次，建议安排在周一和周四，或周二和周五。</li>
	<li>每周计数、记录并拍摄乳头状瘤。若可触及的肿块直径大于1 mm且持续存在超过1周，则认定为乳头状瘤。在图谱上标记每个独立的乳头状瘤，并每周记录其大小。保存数字照片。</li>
</ol>
3. 动物安乐死与样本采集
<ol>
	<li>持续治疗直至肿瘤反应达到平台期。通常，乳头瘤负荷在诱导后10–20周开始增加，具体时间取决于所使用的小鼠品系。平台期预计出现在15–20周。少数乳头瘤（低于3%）可能在20–50周内发展为鳞状细胞癌（SCC）2。</li>
	<li>在最后一次TPA处理后24小时处死动物。可采用二氧化碳麻醉联合颈椎脱位或其他合适的方法。</li>
	<li>根据研究问题，从动物体内采集适当的样本材料30,31。
	<ol>
		<li>例如，在处死前采集血液样本并分离血浆。</li>
		<li>切取皮肤组织用于免疫组织化学（IHC）染色（如苏木精和伊红染色、增殖细胞或炎症细胞染色）。</li>
		<li>使用皮肤活检打孔器采集含有乳头瘤组织或非乳头瘤（处理过）皮肤的样本，用于基因表达分析（如qPCR）和/或蛋白质分析（如Western blot或ELISA）。</li>
		<li>如需对免疫细胞群体进行更详细的分析，可采集脾脏和皮肤引流淋巴结用于流式细胞术分析。也可进一步分离表皮和真皮层用于其他分析。</li>
	</ol>
	</li>
</ol>
4. 统计学
<ol>
	<li>绘制无乳头瘤生存时间的Kaplan-Meier生存曲线，并使用Mantel-Cox log-rank检验进行生存分析。绘制每周乳头瘤数量的线性曲线。由于这是计数数据，应采用非线性回归模型。如有需要，请咨询统计学家。</li>
</ol>

作者无任何利益冲突需要披露。

DMBA-TPA诱导的皮肤癌是最常用的癌症模型之一，因其具有高度可重复性，并能提供从肿瘤起始到恶性发展的全过程信息。关键的观察指标——乳头状瘤的形成，可简便且可靠地进行定量分析。该模型可同时评估肿瘤的起始（无瘤生存期）和进展（肿瘤数量和大小）。该模型适用于研究不同化合物（如潜在治疗药物）以及在基因修饰动物中单个基因对肿瘤进展的影响。在将该模型应用于任何特定小鼠品系时，建议查阅现有文献，以了解该品系在该模型中的反应特征（例如，首个乳头状瘤出现的速度）。使用基因修饰小鼠时，始终推荐使用野生型同窝小鼠作为对照。关于是否应增设其他对照组（例如用丙酮替代DMBA或TPA，或两者均替代），目前存在很大争议，因为已知去除DMBA或TPA，或颠倒其给药顺序，极不可能诱导乳头状瘤的形成34。当必须单独研究肿瘤起始阶段（即仅给予DMBA）时，可在给予DMBA剂量后处死动物进行分析。在研究转基因或基因敲除背景下单个基因的作用时，建议采集未经处理动物的样本，以检测基因工程小鼠与野生型小鼠在肿瘤形成前可能存在的差异30,<sup class="x...

癌症是全球主要的死亡原因之一。因此，迫切需要开发可靠的实验性疾病模型，以更深入地理解疾病机制并探索潜在的治疗策略。在研究皮肤癌发生过程中，最常用的实验性体内模型之一是化学诱导的两阶段皮肤癌变模型1,2。该模型可用于研究肿瘤的启动、促进和进展过程，以及免疫细胞浸润和血管生成等特定事件。
使用两阶段皮肤致癌模型时，需用两种不同的化学物质处理小鼠背部皮肤，以共同诱导肿瘤形成。该模型首先以低剂量的致突变剂DMBA启动，随后进行长期的肿瘤促进剂TPA处理3（图1）。DMBA通过与表皮细胞及主要角质形成细胞干细胞的DNA形成共价加合物，随机诱导DNA突变4,5,6,7。部分随机突变发生在原癌基因（如Hras1）中（也可检测到Kras和Nras的突变），在适当刺激下，原癌基因转化为癌基因，从而驱动肿瘤形成。TPA则是最常用的肿瘤生长促进剂，其分子靶点为蛋白激酶C（PKC）8。TPA还可激活对模型中肿瘤形成至关重要的Wnt/β-catenin信号通路9。反复且长期暴露于促进剂可导致细胞信号增强、生长因子产生增加以及局部炎症反应，这些变化可通过处理皮肤中DNA合成增加和炎性细胞浸润而明显观察到。
DMBA-TPA 模型中的关键炎症介质已被鉴定10。白细胞介素-17A（IL-17A）在该模型中具有显著的促肿瘤作用11,12。它与白细胞介素6（IL-6）协同作用，并参与巨噬细胞和中性粒细胞的募集13,14。此外，CD4+ T 细胞和中性粒细胞在 DMBA-TPA 模型中也已被证实具有促肿瘤活性。最后，巨噬细胞在该模型中同样可促进肿瘤发生15,16,17。
在促癌阶段，突变细胞的增殖能力增强，并维持表皮的持续性增生1这会导致皮肤在10至20周内形成乳头状瘤，随后乳头状瘤开始转化为恶性肿瘤，即鳞状细胞癌（SCCs）。2然而，仅有不到10%的乳头状瘤会进展为恶性肿瘤，尽管这一比例也取决于小鼠的遗传背景2,18几十年来，人们一直不清楚导致肿瘤恶变的最初发生突变的细胞类型，尽管一些研究已报道恶性肿瘤与良性乳头状瘤相比具有明显不同的特征。19,20然而，近期的研究极大地增进了我们对DMBA-TPA模型中肿瘤形成克隆起源的理解21.22.23结果表明，骨髓来源的上皮细胞和毛囊干细胞均参与肿瘤的形成。22特定发育阶段的谱系追踪研究揭示，良性乳头状瘤为单克隆起源，但会招募新的上皮细胞群体21,23然而，只有一个细胞克隆发挥致癌驱动作用；该克隆含有 Hras 突变23向癌形成的进展与克隆清除相关23.
致癌物DMBA可启动乳头状瘤的形成，而TPA则促进肿瘤生长。因此，在TPA处理阶段开始前终止实验，即可将肿瘤起始阶段与促进阶段分开进行独立研究。由于肿瘤进展是按周进行观察的，这为整个研究过程中肿瘤生长的详细分析提供了极佳的机会。由于这些肿瘤是由外源性化学物质诱导产生的，因此无需生殖系中的致癌突变。因此，研究遗传背景（例如基因敲除/转基因与野生型）对肿瘤发生的影响变得十分直接简便2。总之，DMBA/TPA皮肤癌模型是研究免疫系统在肿瘤进展中作用的特别有用的方法，同时也可用于独立或关联地评估肿瘤起始与促进的各个阶段。
<img alt="化学致癌过程、时间线示意图、DMBA启动、TPA促进、小鼠模型结果。" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/60445/60445fig1a.jpg" data-altupdatedat="1788282455000" data-alt="图1"> 
图1：DMBA-TPA诱导的皮肤致癌模型示意图。 在模型的启动阶段，通过局部应用致癌物DMBA以诱导DNA突变。在促进阶段，每周给予促生长剂TPA两次，以增强细胞增殖，从而导致皮肤上乳头状瘤的形成。当乳头状瘤反应达到平台期后，通常在第15至20周之间（具体时间取决于小鼠的遗传背景），将动物处死。其中一小部分乳头状瘤可在20至50周内进一步发展为鳞状细胞癌（SCC）。为了研究启动及早期促进阶段的早期事件，可在此期间采集样本（例如，在第二次TPA处理后不久）。图中显示了经19周处理后，C57BL/6小鼠皮肤上乳头状瘤的代表性照片及其苏木精-伊红染色横切面。比例尺 = 0.1 mm。 <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/60445/60445fig1large.jpg" target="_blank">请点击此处查看该图的放大版本。</a>

<table><tbody><tr><td>1000 µl RPT XL 带刻度滤芯吸头（无菌），补充装</td><td>Starlab</td><td>S1182-1730-C</td><td></td></tr><tr><td>300 µl RTP 带刻度滤芯吸头（无菌），补充装</td><td>Starlab</td><td>S1180-9710-C</td><td></td></tr><tr><td>7,12-二甲基苯并[a]蒽（DMBA）</td><td>Sigma</td><td>D3254-100MG</td><td>吞咽有害，可能致癌。需避光保存。</td></tr><tr><td>丙酮</td><td>Sigma</td><td>1000141011</td><td>易挥发且易燃。</td></tr><tr><td>Attane vet 1000 mg/g</td><td>Piramal Critical Care Limited</td><td></td><td>吸入用液态异氟烷</td></tr><tr><td>电池驱动剃毛器 Isis</td><td>Albert Kerlb GmbH</td><td>GT421</td><td>用于剃除毛发</td></tr><tr><td>CONTRAfluran-废气过滤器</td><td>ZeoSys GmbH</td><td></td><td>用于麻醉</td></tr><tr><td>Linex Nature N1030 尺子 30 cm</td><td>Staples Business Advantage</td><td>60383</td><td>用于测量乳头状瘤</td></tr><tr><td>中型 CO₂ 室 300 × 200 × 200 mm - 红色</td><td>VetTech Solutions Ltd</td><td>AN045AR</td><td>用于安乐死</td></tr><tr><td>Mekasoft</td><td>Mekalasi</td><td>23008</td><td>台面覆盖物</td></tr><tr><td>小鼠（Balb/c JRj）</td><td>Janvier labs</td><td></td><td>其他品系亦可使用</td></tr><tr><td>小鼠（C57BL/6JRj）</td><td>Janvier labs</td><td></td><td>其他品系亦可使用</td></tr><tr><td>Panasonic Lumix DMC-FS5 数码相机</td><td>Panasonic</td><td></td><td></td></tr><tr><td>多聚甲醛</td><td>Merck</td><td>30525-89-4</td><td>用于组织学样本</td></tr><tr><td>佛波醇-12-十四烷酰-13-乙酸酯（TPA），又称佛波醇-12-肉豆蔻酸-13-乙酸酯</td><td>Enzo</td><td>BML-PE160-0001</td><td></td></tr><tr><td>精密天平 PLJ-C/PLJ-G</td><td>KERN &amp; SOHN GmbH</td><td>PLJ 600-3CM</td><td></td></tr><tr><td>Pre-Set CO₂ 双室系统-不锈钢外壳</td><td>VetTech Solutions Ltd</td><td>AN044BX</td><td>用于安乐死</td></tr><tr><td>RNAlater</td><td>Qiagen</td><td>76104</td><td>用于核酸样本</td></tr><tr><td>Tacta 移液器 100–1000 µl</td><td>Sartorius</td><td>LH-729070</td><td></td></tr><tr><td>Tacta 移液器 20–200 µl</td><td>Sartorius</td><td>LH-729060</td><td></td></tr><tr><td>UNO 麻醉剂加注钥匙</td><td>Scintica Instrumentation Inc.</td><td></td><td>用于麻醉</td></tr><tr><td>UNO 小鼠面罩</td><td>Scintica Instrumentation Inc.</td><td></td><td>用于麻醉</td></tr><tr><td>UNO FM2200 流量计</td><td>Scintica Instrumentation Inc.</td><td></td><td>用于麻醉</td></tr><tr><td>UNO 气体排空装置</td><td>Scintica Instrumentation Inc.</td><td></td><td>用于麻醉</td></tr><tr><td>UNO 诱导箱</td><td>Scintica Instrumentation Inc.</td><td></td><td>用于麻醉</td></tr><tr><td>UNO200VAP 蒸发器</td><td>Scintica Instrumentation Inc.</td><td></td><td>用于麻醉</td></tr></tbody></table>

使用二甲基苯并[a]蒽和12-o-十四烷酰佛波醇-13-乙酸酯（dmba-tpa）建立化学诱导皮肤癌变模型

Chemical-Induced Skin Carcinogenesis Model Using Dimethylbenz[a]Anthracene and 12-O-Tetradecanoyl Phorbol-13-Acetate (DMBA-TPA)

癌症是最具破坏性的人类疾病之一。实验性癌症模型对于深入了解不同类型细胞和基因在促进肿瘤进展中的复杂相互作用至关重要，同时也为测试不同治疗策略的有效性提供了平台。最常用的实验性炎症性癌症模型之一是DMBA-TPA两阶段皮肤癌发生模型。该模型通过局部应用两种不同的化学物质——7,12-二甲基苯并[a]蒽（DMBA）和12-O-十四烷酰佛波醇-13-乙酸酯（TPA）——诱导皮肤乳头状瘤的形成。由于主要结局是皮肤中乳头状瘤的形成，该模型成为研究肿瘤起始（无瘤生存期）和肿瘤进展（可见肿瘤的数量和大小）的理想、可靠且可重复的方法。DMBA-TPA处理的作用通过炎症机制传递，这使得该模型特别适用于研究免疫系统在肿瘤形成中的作用。然而，该模型仅限于皮肤及其他可直接施加化学物质的表面。本文提供了一套详细的实验操作方案，以确保该模型的成功应用。

主要结局是治疗组或基因型组之间的生存（即无乳头瘤）时间。次要结局是每组每周的乳头瘤数量（图2）。预期结果为实验组（两个或以上）之间在无乳头瘤时间和乳头瘤数量上存在统计学显著差异。建议在促癌（TPA）阶段统计乳头瘤数量并绘制曲线，以初步了解各组在此阶段的差异。过早终止实验可能掩盖统计学显著差异。
<img alt="小鼠乳头瘤研究；图表显示了Balb/c和C57BL/6小鼠中乳头瘤进展的数据。" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/60445/60445fig2b.jpg" data-altupdatedat="1788282455000" data-alt="图2"> 
图2：DMBA-TPA诱导的皮肤癌发生模型的主要结果。 小鼠皮肤上乳头瘤的代表性图像及其两项主要结果。数据来自四项独立实验的合并结果。注意：Balb/C和C57BL/6小鼠的实验是分别进行的。(...

两阶段皮肤致癌过程由两种外用化学物质诱导。致突变剂7,12-二甲基苯并[a]蒽可导致表皮细胞发生突变，而持续应用促生长剂12-O-十四烷酰佛波醇-13-乙酸酯则可加速皮肤乳头瘤的形成。

使用二甲基苯并[a]蒽和12-O-十四烷酰佛波醇-13-乙酸酯（DMBA-TPA）建立化学诱导皮肤癌变模型

癌症是最具破坏性的人类疾病之一。实验性癌症模型对于深入了解不同因素之间复杂的相互作用至关重要……

这种两步皮肤癌模型可用于研究炎症在皮肤癌中的作用，并能够将肿瘤起始作为一个独立于肿瘤进展的过程进行研究。该模型通过化学诱导形成肿瘤，可利用基因敲除小鼠品系来研究环境因素或治疗候选物的影响。该模型非常适合研究免疫系统和血管生成在癌症中的作用。其表现出与人类患者鳞状细胞癌相似的疾病病理特征。尽管该方法相对容易操作，但准确把握时间至关重要。在处理具有致癌性的DMBA时，采取适当的安全防护措施也非常重要。实验开始前，将具有攻击性的7至9周龄小鼠单独分笼饲养，以避免打斗及皮肤损伤。进行皮肤乳头状瘤诱导时，首先剃除实验动物背部的毛发，并对小鼠进行个体称重。剃毛后48小时，使用移液器将50微克DMBA溶于200微升丙酮中，滴加至每只麻醉小鼠的剃毛区域。对于皮肤乳头瘤的促发，在使用DMBA七天后，每周两次在实验结束前以200微升丙酮中含有5微克TPA的溶液处理皮肤。每周检查动物的乳头瘤情况，并对每个单独乳头瘤进行拍照，将其大小记录在图谱上。若可触及的肿块直径大于1毫米且持续超过一周，则视为乳头瘤。当肿瘤反应达到平台期时，在最后一次TPA处理后24小时采集动物的相应样本材料，并取全层皮肤组织用于免疫组织化学分析。使用皮肤活检打孔器采集乳头状瘤及非乳头状瘤皮肤样本，用于基因表达和/或蛋白质分析；使用手术刀采集乳头状瘤及非乳头状瘤皮肤组织，用于免疫组织化学分析。随后根据需要采集皮肤引流淋巴结及脾脏组织样本，用于流式细胞术分析。在DMBA-TPA肿瘤模型中，通常可观察到实验组之间在乳头状瘤无瘤时间和乳头状瘤数量上的统计学显著差异。组织学分析适用于研究乳头状瘤的结构、皮肤的形态或特定免疫细胞的浸润情况。将DMBA和TPA均匀地涂抹于皮肤表面，并以固定的时间间隔给予TPA处理，是实验成功的关键。定期计数乳头状瘤也非常重要。可以使用多种方法研究影响肿瘤形成数量和时间的机制，包括免疫组织化学、流式细胞术、定量PCR和蛋白质分析。这种传统技术易于调整和应用，可用于研究不同基因、环境因素或感兴趣的治疗手段对肿瘤发生和进展的影响。进行该技术操作时需谨慎，因为DMBA具有致癌性，且丙酮挥发迅速。建议使用合适的防毒面具并在通风橱中操作。

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科研

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Cancer Research

癌症研究

使用二甲基苯甲酸酯和12-O-Tetradecanyl Phorbol-13-醋酸酯（DMBA-TPA）的化学诱导皮肤致癌模型

我们展示了一种实验方案，该方案通过给予小鼠致基因毒性试剂偶氮甲烷（AOM），随后进行三轮促炎剂葡聚糖硫酸钠（DSS）处理，可快速且稳定地诱导小鼠结肠肿瘤形成，其形态学和分子特征与人类结肠炎相关性癌症中的肿瘤具有相似性。...

使用氧化偶氮甲烷（AOM）和硫酸葡聚糖钠（DSS）建立结肠炎相关性癌症模型

光动力疗法（PDT）是一种用于肺癌治疗的非侵入性、非手术方法。光敏剂可在肿瘤组织中选择性积累，并在氧气和适当波长的光照射下导致肿瘤细胞死亡。在本方案视频中，采用基于光动力疗法的方法来评估一种潜在光敏剂在肺癌细胞中的光毒性潜能。...

体外光毒性检测：一种基于光动力疗法评估光敏剂在肺癌细胞中光毒性潜力的方法

本视频介绍了通过外用化学物质诱导两阶段皮肤癌变以研究肿瘤起始过程的实验方法。第一步是在小鼠模型皮肤上涂抹一种致突变剂DMBA，通过引起干细胞突变来启动肿瘤形成；随后使用促生长剂TPA处理，以加速皮肤乳头状瘤的形成。...

化学诱导的两阶段皮肤癌变模型：一种体内小鼠皮肤癌实验模型

本视频介绍了一种在人源化小鼠模型（即模拟人类皮肤的小鼠模型）中测量紫外线敏感性的方法。我们通过该方法确定能够引起皮肤红斑或水肿的紫外线最小红斑剂量（MED）。该方法有助于评估用于降低紫外线敏感性药物的有效性。...

最小红斑剂量检测：一种用于测量小鼠模型中紫外线敏感性的方法

癌症发生是一个涉及癌细胞与肿瘤微环境之间相互作用的过程。为了剖析其中的分子事件，需要在癌症发展的不同阶段分离出不同的细胞群体。利用基底细胞癌的小鼠模型，我们描述了一种在癌症发生过程中进行细胞分析的实验方案。...

皮肤癌发生过程中的细胞群体分析

在浅肤色紫外线敏感型人类的小鼠模型中，外用佛司可林可诱导表皮黑色素生成。通过药物调节皮肤中的cAMP水平以及表皮色素加深，能够显著防护紫外线引起的炎症反应（晒伤），该保护作用通过最小红斑剂量（MED）检测法进行测定。...

药理学诱导人源化小鼠模型表皮黑色素生成及其对晒伤的防护作用

本方案描述了一种使用手术刀加载荧光染料转移的技术，用于测量通过间隙连接通道的细胞间通讯。间隙连接介导的细胞间通讯是一种重要的细胞过程，对维持组织稳态至关重要，而此类细胞信号传导的中断会对健康产生不利影响。...

间隙连接细胞间通讯：一种用于评估毒物和毒素不良效应及天然产物健康益处的功能性生物标志物

本文介绍了一种分离小鼠胰腺胰岛细胞的实验方案，用于筛选外源性化学物质诱导的活性氧（ROS）生成，以鉴定潜在的致糖尿病外源性化学物质。...

用于筛选致糖尿病环境化学物的小鼠胰岛细胞筛选模型

以下实验方案描述了一种利用基因工程小鼠模型，在小鼠背部皮肤中实现黑色素细胞肿瘤发生时空控制的方法。本方案详细说明了肉眼可见及显微镜下的皮肤黑色素瘤起始过程。...

由突变黑色素细胞干细胞启动小鼠黑色素瘤的空间与时间控制

本实验方案的目的是在小鼠皮肤中诱导产生非致死水平的活性氧（ROS），从而进一步促进组织中的生理反应。...

通过可切换的原卟啉IX依赖性原位活性氧生成刺激小鼠皮肤干细胞微环境及组织再生

采用tBHP诱导HNM细胞早衰的标准化方案，以及分析关键衰老标志物（包括生长停滞、SA-β-半乳糖苷酶活性和SASP因子）的标准化检测方法。...

一种使用叔丁基过氧化氢诱导原代人黑素细胞产生应激诱导性早衰的标准化方案

了解使用DMBA和TPA诱导的皮肤癌变模型，用于研究炎症在鳞状细胞癌中的作用。该方法可分离肿瘤起始与进展过程，适用于免疫系统和血管生成研究，为癌症生物学和候选治疗药物测试提供可靠平台。

使用二甲基苯并[a]蒽和12-O-十四烷酰佛波醇-13-乙酸酯（DMBA-TPA）建立化学诱导皮肤癌变模型

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