对大鼠使用扩展的恐惧调节协议进行恐惧孵化

我们描述了一种扩展的恐惧调节协议，在大鼠中产生过度训练和恐惧孵化。该协议包括一次训练，包括25个音震配对（即过度训练），以及比较在背景和提示测试期间的条件冻结反应48小时（短期）和训练后6周（长期）。

记忆是一个心理过程，需要各种阶段的信息获取、整合和检索。在合并阶段，将建立新的突触连接并修改预先存在的连接。当刺激在情感上相关时，这种整合阶段取决于具有更强记忆痕迹的刺激的价值。

大多数关于情感记忆的研究都集中在杏仁核和与其他大脑结构的关系上。这种现象主要研究与恐惧条件对羟基。恐惧条件是一种学习形式，它使学习的逆事件和其他中性刺激之间的关系。

在哺乳动物中，使用最广泛的程序之一是古典或帕夫洛夫调理。包括啮齿动物和人类。对于啮齿动物，条件符号或 US 通常是在单个或多个会话中呈现单个或多次的图片。

恐惧调节协议通常导致一到两吨冲击各不相同。然而，其他较少使用的厌恶涉及广泛的未燃烧的轴承。这被称为逆向训练，它产生一种持久的记忆效应，称为恐惧孵化。

恐惧孵化意味着随着时间的推移，条件反应的强度增加。这些在不安进一步暴露于其他此类事件或条件刺激。最近对行为和神经神经中恐惧孵化的理解表明，与其他啮齿动物和心理学现象隔离，包括某些疾病的延迟回答。

这使我们能够测试情感记忆的强度随着时间的推移。选择12只雄性，成年Wistar鼠，并把它们放在一个笼子里，在整个实验中可以免费取水。将大鼠保持85%的自由喂养体重，每天在同一天、每小时给予限制食物。

随机分配科目到以下组:情绪测试，训练后六周。情绪测试，训练后 48 小时。使用 10% 乙醇溶液清洁实验室和网格地板的所有内部表面。

将冲击强度校准器上的红色和黑色夹子连接到网格地板上的两根杆。将 USB 电缆连接到计算机的相应端口。启动冲击强度校准器软件。

单击按钮，在应用程序中选择一毫安强度。然后更改运行/停止开关以运行。操作逆刺激器，并查看应用面板上显示的冲击强度。

如果需要，使用逆刺激器上的旋钮将强度调整为 1 毫安。关闭实验室，发出叙述框的声音。启动冷冻检测系统软件，打开实验对话窗口。

输入每个主题的详细信息并加载培训协议文件。选择相应的摄像机并检查侧面视频选项。将运动阈值设置为 100，将最小冻结比设置为 13 帧。

验证所选摄像机的实时源显示在屏幕上。与训练期间显示的运动阈值图和不同刺激的时间表一起。单击校准选项三次，同时检查运动指数是否仍低于 100，然后通过单击屏幕上的相应按钮选择要锁定的设备。

将实验对象介绍到腔室。通过单击记录按钮开始会话，25 个音调冲击配对或试验以 60 秒的间试验间隔进行。从会话的分钟开始。

语气在每个试验间隔的最后 10 秒和每个试间间隔的最后两秒内显示。当28分钟的会话结束时，将大鼠从实验室中取出。将动物归还至各自的家庭笼子。

把老鼠运到他们家的笼子柜里。从行为训练室到动物护理设施。大鼠保持48小时或6周没有任何治疗，这取决于他们被分配的组。

在此期间，动物们在家里的笼子里休息，并单独安置。在潜伏期六周内，每周监测两次动物体重。轻轻，操纵每个动物两分钟，而他们加权。

六只动物可能在48小时后接受测试。这六只动物必须在六周后接受测试。重复冻结检测系统校准。

加载文件名、上下文测试协议。单击记录按钮开始会话。在这个10分钟的上下文测试会话中，不会显示任何刺激。

上下文测试后一天，根据组，对每个动物重复以下步骤。为了改变视觉背景，将周围的塑料墙插入到实验室。为了改变嗅觉环境，百分之一的醋酸被应用到我们的棉丝棉拭子上。

被放置在金属托盘，在网格地板下面。使用其他文件重复冻结检测系统校准。单击记录按钮加载名为 Cue 测试协议的文件'启动会话。

在这个单一的15分钟的提示测试会话中，条件刺激音呈现10次，从第三分钟开始。这是 10 提示测试试验和重新启动与相同的试验间墙没有冲击。使用其他自定义编程获取:在训练和提示测试会话期间冻结到音调的百分比。

B 在培训课程中，每个三分钟箱的冻结百分比。C 在培训课程前三分钟内冻结的百分比。将最后一个措施视为基线冻结，因为在这三分钟内没有显示冲击或骨骼。

要获取此数据，请打开冻结检测系统软件，然后按照以下步骤操作。选择文件、报表、工作台组件摘要。选择免费存储库"打开科学框架名称"上可用的 cmd 文件，然后打开文件。

将运动阈值更改为 100，然后单击"确定 选择要分析的文件"。打开文件可以在微软Excel中打开。供进一步分析。

最后，计算每个冻结情节的平均持续时间。对于每个会话，通过将总冻结持续时间除以冻结事件总数的总数。动物是活跃的，并在三分钟的基线期间探索实验室。

与会议剩余时间相比，基线冻结时间明显减少。这是恐惧获取的迹象。将试验会话分段在三分钟的垃圾箱中表明，前三次冲击试验中，分配给冻结的时间百分比达到一个无症状。

这一发现在以前的研究和表明其他培训中是一致的。在训练期间，所有动物的冷冻百分比大大高于基线期。训练后六周测试的动物在背景测试中的冷冻率明显高于在48小时测试的动物。

训练和记忆测试之间没有冻结时间的差异。在背景测试期间，还通过其他措施进一步探讨了不同受试者群体的冻结反应。训练后六周测试的受试者的活动水平明显低于在调理部分后48小时测试的动物的活动水平。

训练后不久测试的动物的冷冻时间明显低于六周后测试的动物。这些结果表明了恐惧孵化效应。对每个冷冻发作的不良反应的分析表明，在经过48小时调节训练的动物比训练后48小时测试的动物显示的冷冻发作时间更长。

在训练课和提示测试的基线期间，所有动物的冷冻百分比明显低于提示测试的测试期间。六周后在提示测试中测试的动物的基线与提示测试的测试期明显不同。提示训练期间平均冻结明显低于六周后提示测试期间平均冻结。

在Cue测试中，在试验间间隔期间平均冻结明显低于48小时后训练期间试验间间隔期间平均冻结。在这里，我们描述了一个扩展的恐惧调节协议，在恐惧孵化大鼠的训练中产生。这是一个有效和有效的方法，评估情绪记忆在短的48小时和长期6周。

有一个山地药理学，生理学和解剖学证据，支持其有效性评估情绪记忆现象。该协议的不同优点包括:第一，前两种类型的内存测试，即上下文和提示。此测试允许识别测试线的上下文和提示的差分效应。

其次，需要一次28分钟的训练，这反过来又会产生超过几个星期的长期效果。考虑到一些人预计恐惧调理需要在 10 次训练中至少进行 100 次冲击，这一优势是显著的。恐惧提供了几种自动计算的测量方法。

与其他恐惧调理模式相比，有简短的培训课程。产生相反训练效果的扩展协议受到的关注较少。与这种逆向训练相关的一个相关影响是恐惧孵化，直到最近才开始在行为和神经生物学层面上被理解。

并且似乎与其他现象有关，包括创伤后应激障碍的延迟发作。这些协议的最佳实施和研究的最终建议包括:正确清洁实验室，尤其是夹底。校准，打开冲击前的冲击强度和冻结检测系统校准。

该协议可以测试所有品种的老鼠或其他啮齿动物。在这种情况下，调整运动阈值和冲击强度非常重要。