2020年11月14日
糖尿病和肥胖症的患病率在全球范围内持续上升。糖尿病、肥胖症及其相关死亡率和共病之间的机制需要进一步研究。本文介绍了一种动物袖状胃切除术(SG)的操作方案,作为一种简单的减重手术临床前模型。
手术干预的主要目标是在一个更易评估的小鼠模型中测量袖状胃切除术的代谢效应和胰岛素抵抗情况。本方案旨在建立一种动物模型,用于研究减重手术在人体中产生效果背后的机制,这可能为肥胖症和2型糖尿病的发病机制及治疗提供见解。进行袖状胃切除术和假手术时,在通过脚趾刺激确认麻醉深度适当后,将0.2%卡波姆眼用凝胶涂抹于小鼠眼睛上,以防止角膜干燥。
将小鼠放置并固定于手术台上。使用脱毛膏去除并清洁残留的毛发。用聚维酮碘溶液与酒精交替擦拭小鼠腹部,共进行三次消毒。
必要时借助放大解剖显微镜或放大镜进行胃窦(SG)手术,以防止发生不可预知的出血和低血容量性休克。在上腹部做一条1至1.5厘米长的正中切口。使用两把弯形光滑锯齿状显微镊子轻轻移动胃部,并将其完全外置。
将肠管移至侧方裸露的皮肤处,并用温热的生理盐水浸湿的纱布覆盖,以防止脱水。使用棉签探针并根据需要配合电凝,仔细分离连接胃左侧与脾脏的胃脾韧带,从而将胃底从周围脾脏及其他腹腔器官中解剖出来。用镊子轻柔地向外牵拉胃底和幽门,辨认胃的中线位置,并使用LIGACLIP施夹器在距食管胃交界处下方和幽门上方胃的内侧15%区段,仔细放置两枚外科夹。
夹闭并隔离约75-80%的胃部,从而形成完整的胃侧袖状结构。使用显微剪切除侧方隔离的胃组织。用棉签清除胃内残留的食物,然后用聚维酮碘水溶液清洁胃的切缘。
使用5-0单丝不可吸收缝线沿夹线处连续缝合,以确保无渗漏。将缝线两端打结,并固定于两端的夹子上。将胃和肠复位至腹腔内的正常位置,并使用连续的5-0单丝不可吸收缝线缝合腹壁以关闭腹腔。
对于假手术组的SG操作,行中线剖腹切口,用37摄氏度的温热生理盐水纱布覆盖肠管和胃,体外暴露5分钟,其余操作同前述手术步骤。随后将胃和肠管复位至其正常解剖位置。术后皮下或腹腔注射酮洛芬2至5毫克/千克以及头孢唑林25毫克/千克,以控制疼痛并预防感染。
停止异氟烷供应,继续以每分钟3到5升的室内空气流量通气,直至小鼠完全清醒。在小鼠恢复活动能力并开始在笼内走动期间,需持续观察。将小鼠置于温度条件约为30摄氏度的独立培养箱中饲养五天,确保每只笼子仅饲养一只小鼠。
根据我们的经验,在学习阶段结束后,袖状胃切除术的成功率约为90%。假手术组和高脂饮食喂养小鼠的体重持续稳定增加,而接受袖状胃切除术并以高脂饮食喂养的小鼠体重则持续下降。
高脂饮食喂养的小鼠在接受假手术与袖状胃切除术后的胆固醇水平差异具有显著性。这可能表明袖状胃切除术后氧化应激得到改善。糖化血红蛋白A1C和胰岛素耐量试验(IPGTT)水平的差异也同样显著。
通过比较接受假手术和袖状胃切除术的高脂饮食喂养小鼠,表明袖状胃切除术后胰岛素抵抗和血糖控制得到改善。该动物模型有助于我们研究糖尿病和肥胖症的临床相关性,使用袖状胃切除术这一简短外科手术进行探索。该手术可缩短操作时间,并提高手术存活率。
本研究的主要优势在于利用一种简单的手术小鼠模型,模拟人类患者减重手术的临床效果。
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本文介绍了一种用于动物的袖状胃切除术(SG)方案,作为减重手术的临床前模型。该研究旨在探讨与袖状胃切除术相关的代谢效应及胰岛素抵抗,以增进对肥胖症和糖尿病的理解。
小鼠的临床前袖状胃切除模型可用于研究与肥胖症和2型糖尿病相关的代谢结果的作用机制。该方法有助于验证靶点并提高代谢疾病研究的可预测性,从而在基础生物学发现与转化医学应用之间建立桥梁。该模型具有良好的可重复性和操作简便性,有利于对代谢通路中的外科干预措施进行可靠评估。
这种小鼠袖状胃切除模型可融入代谢疾病研究从发现到临床前的连续过程,支持早期机制研究和转化验证。