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诱导大鼠心肌梗死的半微创方法及独立工作心脏系统对心脏功能的评估
诱导大鼠心肌梗死的半微创方法及独立工作心脏系统对心脏功能的评估
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JoVE Journal Medicine
Semi-Minimal Invasive Method to Induce Myocardial Infarction in Rats and the Assessment of Cardiac Function by an Isolated Working Heart System

诱导大鼠心肌梗死的半微创方法及独立工作心脏系统对心脏功能的评估

Full Text
8,375 Views
08:01 min
June 11, 2020

DOI: 10.3791/61033-v

Patrick M. Pilz1, Miriam Lang1, Ouafa Hamza1, Petra L. Szabo1, Milat Inci1, Anne M. Kramer1, Michael Koch2, Johann Huber3, Bruno K. Podesser1, Attila Kiss1

1Ludwig-Boltzmann-Institute for Cardiovascular Research at the Center for Biomedical Research,Medical University of Vienna, 2Concept & Ideation, Electrical Sector/EMEA/Power Distribution Division,Eaton Industries (Austria) GmbH, 3Vetfarm and Clinical Unit for Herd Health Management in Ruminants, Clinic for Ruminants,Vetmeduni Vienna

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Summary

本文提出了一种使用微创方法在大鼠中进行心肌缺血和随后的慢性再灌注的有效方法。此外,通过回声心动图和孤立的工作心脏方法评估大鼠左心室造影功能。

Transcript

尽管治疗有了显著改善,但急性心肌梗塞后出现心力衰竭的患者人数仍在增加。为了观察从急性MI到心力衰竭的过渡,我们需要可重复的动物模型。我们演示了一个相对容易、可重复的 MI 模型,对动物造成最小的不适。

此外,分离的心脏仪提供高度可重复的制剂,可以及时且具有成本效益地研究。我们与世界各地的其他研究小组合作,利用这项技术来澄清新药和治疗方法的安全性和有效性,这些新药和治疗方法在MI.可视化演示本协议最关键的步骤(如插管或LAD遮挡水平)后,可改善心肌修复和功能。分步描述允许重复的结果,即使由未经培训的研究人员执行。

实验室技术员Milat Inci正在执行工作心脏测量,数学家和电子工程师迈克尔·科赫在计算分析方面也做出贡献。麻醉大鼠后,用14测表管和体积控制通风,用氧气、空气和异氟的混合物进行插管。将大鼠放在加热操作台上,用胶带固定前肢。

然后将心电图探针皮下放在动物的四肢。使用手术刀在第三个成本间空间的左侧胸部开始两毫米的抛星体,并继续执行第五个间空间的前部轴线。轻轻移动表面肌肉,以便可以看到肋骨。

在第四个间空间的水平上进行胸腔切除术,并插入一个缩回器,以获得心脏和肺的可见性。然后小心地打开心血,避免出血。要在规定的时间内诱发缺血再灌注,请用静脉塞住左前下降动脉。

破裂心肌后,识别左动脉,将缝合线放在其边界下方两到三毫米,位于心脏的腹缘处。30 分钟后,通过移除旅游者重新打开动脉。或者,动脉可以通过用6-0缝合线打六到七节来永久遮挡,以关闭结扎。

使用 4-0 单丝缝合线用三个单按钮缝合线关闭胸部。在拧紧最后一根缝合线之前,用10毫米注射器从胸中去除任何残留的空气,以防止肺气管。更换肌肉并关闭挥发性麻醉。

然后用连续的4-0缝合皮肤。管理防腐剂喷雾剂,防止缝合线感染和咬人。对于深度麻醉,在超声心动图或工作心脏测量之前,在单色内施用每千克体重4毫克和氯胺酮100毫克/公斤体重的混合物。

对于超声心动图,将大鼠放在加热托盘上的超生位置,并在心肌水平上获得左心室腔的准星短轴视图。然后执行 M 模式超声心动图,以测量左心室喷射分数和形态。要收获器官,请进行静脉注射肝素注射。

然后用手术刀在xyphoid下做一个皮肤切口,然后用剪刀平行地延伸到两侧的肋骨上。切开前轴线的肋骨,抓住西腓来抬起胸部。通过小心地用两对钳子破坏组织,去除解剖或纤维组织粘附。

用五毫升注射器从维纳卡瓦中采集血液样本。然后在入口和出口水平执行整个心脏的切除。将心脏浸入冰冷的克雷布斯-亨塞莱特缓冲液中,通过调节大干将心干,将心脏安装在红细胞填充的分离心脏系统中。

从兰根多夫模式开始。15分钟后,切换到工作心脏模式。通过肺静脉将左中庭拉。

然后通过打开夹子来改变流动方向,夹子遮挡心房,导致左心房灌注,左心的生理血流。在工作心脏模式下记录血液动力学测量20分钟,用两毫升注射器收集冠状动脉的血滴,每五分钟测量一次冠状动脉流动。使用探头对左心房流和大热流进行连续测量。

如果需要,通过主心阀逆行插入高保真导管,并测量左心室收缩压力。通过计算笔画体积和外部心脏工作(如文本手稿中所述)结束分析。进行组织学切割和污渍,以证明程序的可重复性。

MIR和治疗动物的纤维化疤痕与假动物的疤痕形成相当,而假动物和MIR组之间的纤维化差异显著。此外,与MIR处理的动物相比,MIR和远程缺血性自调治疗动物的纤维化明显减少。体内的造影用于测量喷射分数、LV 末舒张和末色收缩直径。

分析表明,由于MIR治疗,心脏功能显著降低,但血动力参数由RIPerc保留。前体内血流动力学数据显示了程序的有效性,因为MIR组显示LV收缩压、心脏输出、中风体积和外部心脏工作显著下降。在尝试此程序时,重要的是要记住,将闭塞缝合线和心脏安装到隔离的心脏仪组的正确位置可显著增加获得可重复结果的机会。

有许多方法通过急性或慢性仪器,甚至通过超声心动图或MRI评估完整动物的心脏功能。然而,孤立的重合心脏仍然是一个突出的调查工具,并提供一系列独特的优势。

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医学 问题 160 心肌梗死 缺血/再灌注 重塑 工作心脏 血动力学 大鼠

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