Name: 测量天然产品生物调节特性的平面运动分析 (视频) | JoVE Journal
Uploaded: 2020-05-30T14:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 13 s
Description: 了解涡虫运动速度测试方法，用于评估天然产物对涡虫运动能力的影响。该标准化实验为神经科学与药理学研究提供可靠的动物行为数据。

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作者希望感谢机构发展办公室和莫里斯维尔学院基金会提供的出版资助，以支持本研究工作，同时感谢纽约州立大学莫里斯维尔分校科学与技术入门计划（CSTEP）对本科生科研工作的持续协助与支持。我们还要感谢 Sophia Hutchens 对本文所述技术提出的有益评论。

1. 涡虫的饲养
<ol>
	<li>使用从生物供应公司购买的或必要时野外捕获的涡虫。本方案中使用的涡虫为供应清单中列出的 Dugesia tigrina。该物种也被称为 Girardia tigrina31。其他水生涡虫物种也可接受2,3。 
	注意：所述方案适用于从生物供应公司购买的动物。该检测系统尚未在野外捕获的涡虫中进行测试。然而，如果使用野外捕获的涡虫，建议在使用前至少将其适应实验用水及实验室环境1周。</li>
	<li>收到涡虫后，将其转移至含有洁净矿泉水的塑料食品储存容器中，并将容器盖略微打开。</li>
	<li>将涡虫维持在避光环境中。</li>
	<li>新到的涡虫在新环境中放置24–36小时后再进行喂食。</li>
	<li>在开始实验前，至少让涡虫在实验室环境中适应1周。</li>
	<li>按照每周两次的规律时间表喂养涡虫。
	<ol>
		<li>让涡虫自由摄食切碎的有机水煮蛋或匀浆的有机牛肝，持续1–2小时。</li>
		<li>喂食后，将涡虫转移至洁净容器中。
		<ol>
			<li>移除涡虫周围的脏水。</li>
			<li>使用小号平头水彩画笔（3–6号）将附着在容器壁及涡虫周围的残余食物和黏液转移到纸巾上。</li>
			<li>用新鲜的矿泉水轻轻旋转或搅动，使涡虫脱离容器，然后将其倒入洁净容器中。</li>
			<li>对于仍附着在容器上的涡虫，可使用圆头水彩画笔（3–6号）或大口径移液管进行转移。</li>
			<li>倾去转移用的水。</li>
			<li>用洁净的矿泉水重新覆盖涡虫。</li>
			<li>24小时后，通过如上所述的方法（步骤1.6.2.1–1.6.2.6）将涡虫转移至洁净容器，以去除其排出的食物残渣。</li>
		</ol>
		</li>
	</ol>
	</li>
	<li>清洁用于涡虫饲养的容器和器具时，不得使用肥皂或洗涤剂。应使用洁净水（自来水即可）充分冲洗，并用干净的布或纸巾擦干。</li>
</ol>
2. 实验用涡虫的准备
<ol>
	<li>新送达的涡虫在实验前至少应适应其环境1周。</li>
	<li>实验前对涡虫进行5–10天的饥饿处理。</li>
	<li>在饥饿期间至少更换1次培养用水。</li>
</ol>
3. 涡虫运动速度（pLmV）测试：兴奋行为
<ol>
	<li>实验前，确保饥饿的涡虫已完全发育，具有完整且具色素的头部和尾部。</li>
	<li>在开始实验前，准备好用于 pLmV 测试的玻璃或塑料 10 cm 培养皿以及适应容器。
	<ol>
		<li>将一个洁净的直径为 10 cm 的培养皿放置在预贴好的网格纸上（方格为 0.5 cm），用于 pLmV 测试。</li>
		<li>向直径为 10 cm 的培养皿中加入 20 mL 未添加任何物质的泉水（对照组），或含有待测天然产物适当浓度的泉水，用于 pLmV 测试。</li>
		<li>在准备好的直径为 10 cm 的培养皿上方放置一台相机（例如手机或高分辨率相机），以记录实验期间涡虫在网格纸上的运动情况。使用铁架台可方便地将相机固定在适当距离，以完整拍摄整个 10 cm 培养皿及网格线。</li>
		<li>准备一个适应容器，加入 5–10 mL 未添加任何物质的泉水（对照组），或含有待测天然产物适当浓度的泉水。类似闪烁计数小瓶或小型 5 cm 培养皿的容器均可使用。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>使用洁净的小型扁头或圆头水彩画笔，轻轻地将一只涡虫从盛有泉水的储存容器中转移至含有 5–10 mL 未添加任何物质的泉水或含有待测天然产物的泉水的适应容器中。 
	注意：在进行 pLmV 检测操作涡虫时，应使用洁净的小型扁头或圆头水彩画笔（型号 3–6）。移动涡虫时，应将画笔置于其下方轻轻托起。为确保涡虫不受损伤，画笔刷毛不应在涡虫下方散开；若刷毛散开，涡虫可能被夹在刷毛之间而受到伤害。 
	注意：也可使用宽口移液管将涡虫转移至洁净干燥的适应容器中。
	<ol>
		<li>若使用移液管，需用该移液管将随涡虫带入适应容器中的多余水分吸出。</li>
		<li>小心地向含有涡虫的适应容器中加入适应液（即对照组用的泉水，或含有待测天然产物浓度的泉水）。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>适应时间将取决于所测试天然产物的刺激动力学特性。本研究中，2 分钟的适应时间已足以检测到刺激效应1。</li>
	<li>在 2 分钟适应期结束后，使用水彩画笔将涡虫轻轻转移至已准备好的 10 cm 培养皿中央，进行 pLmV 刺激实验。</li>
	<li>启动相机以记录涡虫的运动，连续录制 10–11 分钟的视频。</li>
	<li>每次测试每只涡虫时，均需为 pLmV 实验准备新的适应容器和 10 cm 培养皿，并使用新鲜配制的溶液。</li>
	<li>为避免实验过程中意外将涡虫暴露于错误溶液中，应为每种天然产物的实验浓度配备专用的移液管、培养皿、容器和画笔。</li>
	<li>由于涡虫会表现出学习行为，每只涡虫（对照组或实验组）仅应使用一次21,22。</li>
</ol>
4. 涡虫运动速度（pLmV）测试：回避行为
<ol>
	<li>实验前，确保饥饿的涡虫已完全发育，具有完整且具色素的头部和尾部。</li>
	<li>准备一个10 cm的培养皿（玻璃或塑料）用于pLmV实验，一个5 cm的培养皿（玻璃或塑料）用于在适应后冲洗涡虫，并在实验开始前准备好适应容器。
	<ol>
		<li>将一个洁净的直径为10 cm的培养皿放置在预先贴好的网格纸上（方格为0.5 cm），用于pLmV实验。</li>
		<li>向直径为10 cm的培养皿中加入20 mL未添加任何物质的泉水，用于pLmV实验。</li>
		<li>按照步骤3.2.3的方法，在已准备好的直径为10 cm的培养皿上方放置一台摄像机，以记录实验期间涡虫在网格纸上的运动情况。</li>
		<li>通过向5 cm培养皿中加入5 mL泉水，制备涡虫冲洗容器。</li>
		<li>准备一个适应容器，加入5–10 mL未添加任何物质的泉水（对照组）或含有待测天然产物的泉水。类似闪烁计数瓶或小型5 cm培养皿（玻璃或塑料）的容器均适用。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>使用一个洁净、小型、扁平或圆形的水彩画笔，将涡虫从泉水中转移至已准备好的适应容器中，容器内含5–10 mL未添加任何物质的泉水（对照组）或含有待测天然产物的泉水。轻柔地将动物从储存容器转移至适应容器，确保涡虫不被画笔损伤。 
	注意：在进行pLmV检测操作涡虫时，应使用洁净、小型、扁平或圆形的水彩画笔（编号3–6）。移动涡虫时，应将画笔置于动物下方，轻轻抬起。为确保涡虫不被画笔损伤，画笔刷毛不应在动物下方散开；若刷毛散开，涡虫可能被夹在刷毛之间而受到伤害。 
	注意：也可使用宽口移液管将涡虫转移至洁净干燥的适应容器中。
	<ol>
		<li>若使用移液管，应使用该移液管从适应容器中移除随涡虫带入的多余水分。</li>
		<li>小心地向含有涡虫的适应容器中加入适应溶液（即对照组使用未添加任何物质的泉水，或含有待测天然产物的泉水）。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>针对撤药反应的适应时间取决于所测试天然产物的刺激动力学；通常2–5分钟已足够。</li>
	<li>适应期结束后，使用水彩画笔将涡虫轻轻转移至已准备好的含有泉水的5 cm培养皿中，以冲洗掉适应容器中残留的任何天然产物。确保涡虫不被画笔损伤。</li>
	<li>立即将涡虫转移至已准备好的含有泉水的10 cm培养皿中央，进行pLmV撤药实验。确保涡虫不被画笔损伤。</li>
	<li>启动摄像机以记录涡虫的运动，录制10–11分钟的视频。</li>
	<li>为每只涡虫的pLmV实验，均需使用新鲜溶液重新准备适应容器、冲洗容器和10 cm培养皿。</li>
	<li>为避免实验过程中意外将涡虫暴露于错误溶液中，应为每种天然产物的实验浓度配备专用的移液管、培养皿、容器和画笔。</li>
	<li>由于涡虫表现出学习行为，每只涡虫（对照组或实验组）仅可使用一次26,27。</li>
</ol>
5. 数据分析
<ol>
	<li>准备一个数据收集表格，用于记录在 pLmV 实验期间每分钟内涡虫的行为和运动性，包括每分钟穿过的网格线数量。该表格还应能够记录涡虫每分钟累计穿过的网格线总数。表格中应包含用于记录备注的行，以及一个行为定义表，用于统计实验期间观察到的各种行为（如“游走”和“停止”）的发生情况（见讨论部分）。</li>
	<li>通过视频回放，记录涡虫在10分钟内每分钟穿过的完整网格线数量，并将该数值记录在数据表中。典型的涡虫行为表现为持续的、向前的、水平方向的匀速运动，期间伴有周期性的转向，但无停顿。
	<ol>
		<li>实验计时应从涡虫完全离开用于将其转移至10 cm培养皿的毛刷时开始，并记录起始时间。</li>
		<li>判断动物是否穿过一个完整的网格时，应以头部为参考标准：当头部完全越过一条网格线时，计为穿过一条线。</li>
		<li>当涡虫沿培养皿边缘移动时，可通过观察从皿边缘延伸出的线条来估算0.5 cm的距离。若涡虫穿过方格的角落，则以第二条被穿过的线计为一条完整的网格线。在进行此类判断时，仍应以头部位置为准。</li>
		<li>每分钟结束后暂停视频，以便记录数据。</li>
		<li>重新播放视频以记录下一分钟的数据时，若暂停时虫体头部位于两条网格线之间，则首次穿过下一条线时应计为一个完整的网格。</li>
		<li>持续记录10分钟内穿过的网格线总数。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>若在 pLmV 测试过程中，动物停止移动，在10分钟记录期内不再穿过任何网格线，则应在行为记录表中注明其行为状态（例如“游走”或“停止”）。在 pLmV 检测中停止前进运动的个体应单独记录，并以暴露于该试剂浓度下的总动物数中的频率形式呈现数据。若在适应期出现卷曲或痉挛性行为（称为C型行为），导致无法进行任何前向运动，则表明该天然产物的浓度不适用于 pLmV 检测，因为 pLmV 检测是基于运动能力的。C型行为可采用其他类型的分析方法进行评估（见讨论部分）。</li>
	<li>若条件允许，为评估试剂对涡虫生理的整体影响，应在不同日期和不同时间段使用至少9–12只涡虫测试多个实验浓度。然而，若研究人员希望减少昼夜节律引起的变异性，可在每天固定时间、恒定光照条件下进行实验，并使用经过定时明暗循环培养和定时喂食的涡虫。建议至少安排两名实验人员参与项目，其中一人负责记录数据，另一人则在不知晓实验分组条件的情况下“盲法”计数网格线穿过次数。在数据收集、统计计算与分析过程中由不同人员参与，也有助于降低潜在的偏倚。</li>
	<li>将每一天每种天然产物浓度下的网格线穿行次数，相对于对照组每分钟的穿行次数进行归一化处理，以便整合来自不同日期、不同时间和不同实验者的數據。这些数据可进行平均后采用学生t检验（Student’s T-test）进行分析。每个时间点的p值可与对照组以及不同试剂浓度之间进行比较。使用来自不同实验浓度的数据集进行方差分析（ANOVA）可提供另一种分析方法。</li>
</ol>

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</ol>

作者无任何利益冲突需要披露。

本文介绍了一种简单且易于操作的涡虫运动能力检测方法，用于评估天然产物的兴奋作用及戒断效应。作为一种行为学模型，必须制定严格的运动评分方案，并对所有行为进行明确定义，以确保不同实验人员之间的观察结果具有可比性和标准化。本文提出的方法展示了如何实现这一目标。每个采用该方案的实验室应根据所测试特定产物的作用特点，对所提供的信息进行适当调整。建议仔细设置实验工作区，以确保参与研究的每位研究人员均能在一致的条件下开展实验（图1）。可编制标准化记录表，以协助准确记录运动情况及相关行为数据（图2 和 图3B）。
应于一天中的不同时间进行运动能力测试，并尽可能使用不同批次的涡虫，以考虑其内在昼夜节律活动的差异。尽管目前尚未开展相关分析，但建议研究者通过维持标准的明暗循环（例如12小时光照/12小时黑暗）来监测涡虫的昼夜节律对运动能力的可能影响；在进行pLmV检测时，应采用标准光照条件，并在每天相同的时间段内开展实验<su...

本方案利用涡虫的运动能力，提供了一种评估天然物质生物调节作用的方法。该方法特别适用于确定这些物质是否具有兴奋剂功能，以及是否伴随可测量的戒断行为1。这一检测方法被称为涡虫运动速度（pLmV）测试，最初用于测试已知的药理学试剂2,3。此后，这种基于涡虫运动能力的检测方法日益受到关注，并被多个实验室采用，研究对象也扩展至天然产物以外的其他物质4,5。在该检测中，将一条涡虫置于含有泉水或溶解有生物调节剂的泉水的培养皿中。由于培养皿放置在坐标纸上，可通过记录涡虫在一定时间内穿越的网格线数量，来测定&#160;其在不同条件下的运动速率。明/暗测试，又称条件性位置偏爱测试（CPP），是监测涡虫运动能力的另一种变体方法，用于评估动物对黑暗环境的响应速度和迁移行为6,7。此外，涡虫运动的视频追踪也可通过计算机程序进行分析，采用质心（COM）追踪技术8,9,10,11。
使用涡虫作为此类研究的动物模型相较于其他动物具有多项优势，实验者可轻松控制实验环境。具体而言，在实验前对涡虫进行饥饿处理，可避免其接触其他可能干扰实验结果的营养或药理物质；而待研究的特定生物调节剂只需直接加入培养水中即可引入涡虫体内，从而实现暴露条件的标准化。由于涡虫拥有与“高等动物”相似的神经系统和神经递质，其对神经肌肉刺激的生理反应和实验响应被认为对其他生物具有生物学相关性12,13,14,15,16。此外，由于涡虫在实验室中相对廉价且易于维持，因此为众多研究者提供了一种可及的生物模型。
作为一种实验动物，涡虫适用于多种研究。例如，我们课题组及其他研究者利用涡虫研究肿瘤发生过程17,18,19。涡虫还表现出对化学、热力、重力、电、光以及磁场刺激的一系列反应行为，这些反应构成了其他检测系统的基础。其中一些效应已被用于研究这些动物的学习与记忆能力20,21,22,23,24,25,26,27。目前文献中涡虫模型的主要用途集中在一类称为新胚细胞（neoblasts）的多能干细胞的活性及其在再生过程中的作用28,29,30。因此，采用本文所述模型可进一步结合其他基于涡虫的检测方法，从而更全面地理解天然产物及其他生物调节剂对生物体的影响。

<table><tbody><tr><td>瓶装水 - 1 加仑</td><td>Poland Spring</td><td>N/A</td><td>用于涡虫培养及配制溶液的泉水</td></tr><tr><td>棕色涡虫（Dugesia tigrina）</td><td>Carolina Biological Supply Company</td><td>132954</td><td>活体棕色涡虫（其他物种亦可接受）</td></tr><tr><td>扁头画笔</td><td>Royal Crafter's Choice</td><td>9159</td><td>用于清洁涡虫培养容器的扁头水彩画笔</td></tr><tr><td>玻璃培养皿 - 10 cm</td><td>Kimax</td><td>N/A</td><td>直径10 cm（玻璃）培养皿，用于pLmV检测</td></tr><tr><td>玻璃培养皿 - 5 cm</td><td>Kimax</td><td>N/A</td><td>5 cm培养皿，用于戒断实验中冲洗涡虫及刺激物适应</td></tr><tr><td>方格纸</td><td>任意品牌</td><td>N/A</td><td>标准0.5 cm方格纸，用于pLmV检测</td></tr><tr><td>iPEVO 视频展示仪（软件）</td><td>iPEVO</td><td>https://www.ipevo.com/software/visualizer</td><td>用于视频采集与录制的实物投影仪软件</td></tr><tr><td>带支撑架和铁环的金属器具套装</td><td>任意品牌</td><td>N/A</td><td>标准化学实验室铁架台，用于固定手机摄像头（如使用）</td></tr><tr><td>有机鸡蛋</td><td>任意品牌</td><td>N/A</td><td>有机鸡蛋或牛肝，用于喂养涡虫</td></tr><tr><td>带螺口盖的聚碳酸酯瓶 - 10 mL</td><td>Beckman</td><td>N/A</td><td>塑料小瓶，用于盛装5至10 mL液体以进行刺激物适应实验</td></tr><tr><td>圆形储存容器 - 10 cm</td><td>Ziploc</td><td>N/A</td><td>直径10 cm圆形食品储存容器，适用于约90只或更少数量的涡虫</td></tr><tr><td>圆头水彩画笔</td><td>LOEW-Cornell</td><td>N/A</td><td>小型圆头水彩画笔（型号3至6），质地柔软</td></tr><tr><td>移液管</td><td>任意品牌</td><td>N/A</td><td>宽口（5 mL）塑料移液管，用于转移涡虫</td></tr><tr><td>USB实物投影仪</td><td>iPEVO</td><td>CDVU-06IP</td><td>实物投影仪（或其他相机或手机摄像头）</td></tr></tbody></table>

一种用于评估天然产物生物调节特性的涡虫运动能力检测方法

A Planarian Motility Assay to Gauge the Biomodulating Properties of Natural Products

本文介绍了一种简单且可控的方法，利用非寄生性涡虫——Dugesia tigrina（一种自由生活的水生扁形动物）来研究天然产物的兴奋作用及戒断特性。得益于涡虫生理学的独特优势，已有多种实验方法被应用于伤口愈合、再生以及肿瘤发生等研究领域。此外，由于涡虫对多种环境刺激具有敏感性，并能够学习和建立条件反射，因此也可用于学习与记忆相关的行为学研究。涡虫具有基本的两侧对称结构和中枢神经系统，其神经递质系统适用于研究神经肌肉生物调节剂的作用。因此，研究人员已开发出用于监测涡虫运动和活动能力的实验系统，以研究物质成瘾及其戒断效应。由于涡虫运动能力具备建立灵敏、易于标准化的运动检测体系的潜力，本研究采用涡虫运动速度（pLmV）检测法，通过测定动物在单位时间内穿过的网格线数量，来评估其兴奋和戒断行为。本文将演示并详细说明该技术及其应用方法。

在开始实验之前，应完成pLmV检测所需的实验室设置及工作区准备工作。这包括准备适应容器、必要时的冲洗容器（用于回缩实验）、置于覆膜网格纸上的培养皿，以及正确放置的摄像机（图1）。所有视频采集完成后，建议使用统一的数据表，以便在不同研究人员之间标准化数据的收集与呈现（图2 和 图2补充）。
相机设置应确保能够清晰观察到涡虫及其下方的网格纸，以便在整个实验过程中准确评估其运动进展（图3A 和图3A补充）。数据采集应包括涡虫穿过的网格线数量，以及实验每分钟内累计穿过的网格线总数（图3B）。在进行pLmV分析时，涡虫表现出持续的、向前的、水平方向的运动，并伴有周期性转向，期间不会停止。记录时，应以完全穿过第一个完整网格方格作为计分为1，而不是以示例视频中所确定的穿过第一条线为计分起点。重...

通过比较动物在泉水中的运动情况，涡虫的运动能力可用于评估天然产物的兴奋作用及戒断特性。

一种简单且可控的方法，利用非寄生性涡虫——虎斑真涡虫（Dugesia tigrina），一种自由生活的水生扁形动物，研究兴奋剂和……

涡虫运动速度测试是一种快速评估多种生物调节剂对运动能力影响的兴奋作用及潜在戒断效应的方法。该实验易于控制，即使在最基础的研究条件下，也能提供一种简单易行且可靠的行为数据获取方法。由于涡虫的神经系统具有中枢化的原始脑结构、两侧对称体形以及类似的神经递质系统，利用这些生物开展的行为学研究可为脊椎动物可能的反应提供临床前的参考依据。实验还可通过生理通路调节剂、药物，甚至基因改造的涡虫来进一步开展，以深入了解相关的生物学机制。保持涡虫的健康状态非常重要，以避免在容器间转移时对其造成应激，并确保实验室成员之间网格线曲线的标准化。要从该行为实验中获得一致的结果，最佳方法是观察有经验的操作者如何进行实验操作。建立涡虫培养体系后，每周定期喂食两次，每次提供足量的有机水煮鸡蛋碎或有机牛肝匀浆，任其自由摄食一至两小时。喂食后，移除容器中的污浊水体，并用平头水彩画笔将附着在容器壁上的食物残渣和黏液转移到纸巾上。使用新鲜的泉水，轻轻旋摇或搅动以使涡虫脱离容器表面，然后将涡虫转移至洁净的容器中。将宽口移液器吸头滑入仍附着在旧容器上的任何涡虫下方，以促进其转移到新培养皿中，并小心倾倒转移用水。然后，用新鲜的泉水覆盖新容器中的涡虫。进行涡虫运动速度测试前，首先确保经过5至10天饥饿处理的涡虫形态完整，具有完整且具色素的头部和尾部。如果涡虫已准备就绪，将一个洁净的直径10厘米的培养皿放置在预先覆膜的网格纸上，每组实验使用一张网格纸，其方格为每格0.5厘米。向对照组培养皿中加入20毫升未添加任何物质的泉水，或向实验组培养皿中加入含适当浓度待测天然产物的泉水20毫升。将摄像头置于已准备好的运动速度刺激培养皿正上方，并向一个大小合适的适应性容器中加入5至10毫升未添加任何物质的泉水，或含适当浓度实验化合物的泉水。接着，使用一把洁净的小号水彩画笔，轻轻将一条涡虫从培养容器转移至已准备好的适应性容器中，让该涡虫在容器溶液中适应两分钟。研究过程中应让涡虫自行移动到刷子上，以便在不施加外力的情况下小心地将其提起。在适应期结束时，使用刷子小心地将涡虫转移至已准备好的运动速度刺激培养皿中央，该培养皿中所含溶液应与适应容器中的相同，随后启动摄像设备，记录涡虫10至11分钟的运动情况。为了在适应期结束时检测戒断效应，将涡虫在仅含泉水的5厘米培养皿中进行冲洗。在将涡虫转移至含有新鲜泉水的预制运动速度培养皿中心后，启动摄像机记录10到11分钟的运动情况。摄像装置应能清晰观察到涡虫及下方的网格纸，以便在整个实验过程中准确评估动物的移动进展。数据采集应包括涡虫穿过的网格线总数，以及实验每分钟内累计穿过的线条数。为了标准化每次实验的结果，可以将涡虫运动速度实验计算并绘制成相对于对照组涡虫运动进展的穿盒数量。作为基准，生活在泉水中的涡虫通常在三分钟内穿过约25个盒子。可通过检测一系列测试试剂浓度，以确定涡虫对目标测试化合物的运动反应。可通过量化动物在适应所检测的生物调节产品后，在泉水中穿过的网格线数量，相对于泉水对照组的变化来评估戒断数据。对照组的三角涡虫在整个实验过程中会持续穿过网格线。然而，有时测试组的三角涡虫在实验期间会停止穿过网格线，表现出与所测试产品特征相符的行为。这表明可能需要采用不同的分析方法。这些情况可以被追踪，并将数据表示为暴露于特定试剂浓度下的动物总数的百分比。在将涡虫转移至不同培养皿时，必须小心操作，以确保其不受损伤。在确定不同浓度的天然产物的作用后，可加入生物通路调节剂，以观察初始结果是否发生动态变化。我们采用平板动物运动速度测试，利用已知的药理学试剂检测刺激和戒断反应，并对该系统进行改进，以研究天然产物的类似作用机制。

a-planarian-motility-assay-to-gauge-biomodulating-properties-natural

Research

科研

JoVE Journal

Biochemistry

生物化学

测量天然产品生物调节特性的平面运动分析

在活体动物中研究干细胞分化的理想模型是涡虫（planarian flatworm）。通过简单的截肢实验可研究其再生过程，这些实验在基础实验室中易于操作，并可结合药理学和遗传学方法（in vivo...

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本文描述了一种在模式生物 Caenorhabditis elegans 中 in vivo...

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本方案展示了如何在不损伤周围组织的情况下，稳定地切除涡虫的眼睛（视杯）。使用胰岛素针头和注射器，可选择性地切除单侧或双侧眼睛，以促进对调控眼睛再生的机制、视觉再生的进化以及光诱导行为的神经基础等领域的研究。...

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一种基于贻贝（Mytilus galloprovincialis）血细胞运动性的毒理学与生态毒理学检测方法

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涡虫作为实验性急性癫痫的动物模型

了解涡虫运动速度测试方法，用于评估天然产物对涡虫运动能力的影响。该标准化实验为神经科学与药理学研究提供可靠的动物行为数据。

一种用于评估天然产物生物调节特性的涡虫运动能力检测方法

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