Name: 使用磁力学监测化学合成氧化铁纳米粒子的细胞合并和后续生物降解 (视频) | JoVE Journal
Uploaded: 2021-02-27T13:30:00.000+00:00
Duration: 8 min 13 s
Description: 了解利用磁力学监测化学合成氧化铁纳米粒子在人源干细胞中的合并与生物降解过程。该方法采用非水溶胶凝胶法合成纳米粒子，并通过振动样品磁强计实现精准定量分析。

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

本工作由欧洲联盟（ERC-2014-CoG 项目 MaTissE #648779）资助。作者谨此致谢&#160;巴黎第十三大学 CNanoMat 物理化学表征平台。

1. 磁性纳米颗粒的合成
<ol>
	<li>核合成——微波辅助
	<ol>
		<li>将400 mg的乙酰丙酮铁(III)（&#62;99.9%）溶解于30 mL单模微波玻璃小瓶中的10 mL苯甲醇（BA, 99.8%）内。</li>
		<li>使用微波反应器在20分钟内将悬浮液温度从25 °C升至250 °C（升温速率为11.25 °C/min），并在250 °C下维持30分钟。</li>
		<li>将所得悬浮于苯甲醇中的纳米颗粒转移至玻璃小瓶中，并使用钕磁铁分离30分钟。</li>
		<li>在前述100 mL玻璃小瓶中，用10 mL二氯甲烷、1 M氢氧化钠、乙醇和pH 7的水（各三次）洗涤沉淀；每次使用钕磁铁分离5分钟以沉淀纳米颗粒，并移除上清液。</li>
		<li>用1 M盐酸调节纳米颗粒水悬浮液的pH至2，然后在100 kDa超滤离心滤膜中以2,200 × g离心10分钟。</li>
		<li>弃去滤液，向纳米颗粒溶液中加入12 mL 10-2 M盐酸，再在100 kDa超滤离心滤膜中以2,200 × g离心10分钟（重复三次）。随后在包覆前将纳米颗粒溶液稀释于10 mL 10-2 M盐酸中。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>包覆
	<ol>
		<li>在100 mL玻璃小瓶中将175 mg柠檬酸和聚丙烯酸溶于pH 2的水中，并用1 M盐酸溶液调节pH至2。</li>
		<li>将10 mL纳米颗粒水分散液加入包覆分子溶液中，使包覆分子与纳米颗粒的质量比为5。在室温下磁力搅拌反应2小时。</li>
		<li>反应结束后，用1 M氢氧化钠调节pH至7。</li>
		<li>将纳米颗粒溶液在100 kDa超滤离心滤膜中用去离子&#160;(DI)水洗涤离心三次，每次2,200 × g离心10分钟；弃去滤液后将纳米颗粒溶液稀释于12 mL DI水中。</li>
	</ol>
	</li>
</ol>
2. 干细胞的培养与磁性标记
<ol>
	<li>在 37 °C 和 5% CO2 条件下，使用完全型间充质干细胞生长培养基（MSCGM）培养人源间充质干细胞（MSC）。当细胞融合度达到 90% 时，每 150 cm² 培养瓶中加入 10 mL 预热至 37 °C 的胰蛋白酶-EDTA 溶液，孵育 2–3 分钟以使细胞脱落。
	<ol>
		<li>判断细胞是否脱落时，可用明场显微镜观察。将脱落的细胞重新悬浮于 MSCGM 中，并按 1:4 传代至四个 150 cm² 培养瓶中。以此方式扩增细胞，直至第 4 至第 5 代。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>准备用于细胞标记的磁性纳米颗粒溶液：将选定浓度的氧化铁纳米颗粒分散于无血清、无谷氨酰胺的 RPMI-1640 培养基（Roswell Park Memorial Institute&#160;medium）中。由于 RPMI 的离子强度低于 DMEM，有助于减少纳米颗粒聚集，因此用于纳米颗粒孵育及相关洗涤步骤。</li>
	<li>当细胞处于第 4 或第 5 代且融合度达 90% 时，移除 MSCGM 培养基，用无血清、无谷氨酰胺的 RPMI 洗涤细胞一次，然后每 150 cm2 培养瓶中加入 10 mL 氧化铁纳米颗粒溶液，此为覆盖全部细胞所需的最小体积。</li>
	<li>在 37 °C 和 5% CO2 条件下孵育 30 分钟后弃去纳米颗粒溶液。用无血清 RPMI-1640（不含谷氨酰胺）洗涤一次，随后加入含 10% 胎牛血清（FBS）和 1% 青霉素-链霉素的杜氏改良伊格尔培养基（DMEM）（每 150 cm2 培养瓶加 25 mL），在 37 °C 和 5% CO2 条件下过夜孵育，以促进纳米颗粒的完全内化。</li>
</ol>
3. 干细胞球体的形成
<ol>
	<li>新鲜配制细胞球体培养基，该培养基由含L-谷氨酰胺的高糖DMEM组成，并添加50 µM L-抗坏血酸-2-磷酸、0.1 µM 地塞米松、1 mM 丙酮酸钠、0.35 mM L-脯氨酸，以及1%含胰岛素、人转铁蛋白和亚硒酸（ITS-Premix）的通用培养添加剂。</li>
	<li>向每瓶150 cm2培养瓶中加入10 mL预热至37 °C的0.05%胰蛋白酶-EDTA溶液，作用2–3分钟，使磁性MSCs细胞脱落。细胞脱落后，立即加入相当于胰蛋白酶体积1/3的、预热至37 °C的含10%胎牛血清（FBS）和1%青霉素-链霉素的DMEM培养基，以中和胰蛋白酶活性。</li>
	<li>将消化后的细胞在260 × g条件下离心5分钟，吸除上清液，用少量（每150 cm²培养瓶少于1 mL）细胞球体培养基重悬细胞，例如将200,000个细胞重悬于约50 µL培养基中。使用血细胞计数板计数细胞数量，并根据需要调整体积。</li>
	<li>在15 mL无菌圆锥形离心管中加入1 mL新配制的细胞球体培养基，然后加入相当于200,000个细胞的重悬液。</li>
	<li>将上述磁标记细胞在180 × g条件下离心3分钟，使细胞在管底形成细胞沉淀，并保留上清液（即细胞培养基）。</li>
	<li>将离心管略微打开以允许气体交换，在37 °C、5% CO2条件下培养最多21天。在此培养期间，细胞形成结构紧密的三维结构，最终形成完整的球体。每周更换培养基两次。</li>
	<li>在指定时间点，用由0.2 M 卡卡基酸盐溶于去离子水配制的卡卡基酸盐缓冲液洗涤球体两次，然后在室温下用0.1 M 卡卡基酸盐缓冲液（用蒸馏水稀释）中含2%戊二醛的固定液固定30分钟。固定后的球体保存于PBS中，待用于VSM测量或透射电镜（TEM）成像。此固定步骤可终止所有生物过程，实现长期保存。</li>
</ol>
4. 使用振动样品磁强计（VSM）在溶液和细胞内定量磁性纳米颗粒
<ol>
	<li>将特定体积的磁性纳米颗粒溶液（最大10 µL）或单个细胞球状体放入专为VSM设计的样品 holder 中。</li>
	<li>将样品插入VSM，并扫描样品偏移量。将样品置于对应磁化强度最大值的位置。</li>
	<li>在低磁场（-1500 Oe 至 +1500 Oe 之间）下以 20 Oe/s 的速率进行第一次测量。</li>
	<li>在高磁场（-30 000 Oe 至 +30&#160;000 Oe 之间）下以 200 Oe/s 的速率进行第二次测量。</li>
</ol>
5. 透射电子显微镜（TEM）分析
<ol>
	<li>对于纳米颗粒溶液，取10 μL水溶液滴加到碳支持铜网上，在室温下自然干燥。</li>
	<li>对于细胞内化的纳米颗粒，使用0.5%的乌龙茶提取物（OTE）溶于0.1 M卡考基缓冲液中对固定后的细胞球体进行染色，随后用含有1.5%铁氰化钾的1%四氧化锇进行后固定，再经梯度乙醇脱水，包埋于Epon树脂中。切取70 nm的超薄切片，并将其转移至铜网上。</li>
	<li>使用电子显微镜在80 kV电压下成像，放大倍数从1k（用于观察完整细胞）至40k（用于观察内体结构）。</li>
</ol>

<ol><li>Azevedo-Pereira, R. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Superparamagnetic+iron+oxide+nanoparticles+as+a+tool+to+track+mouse+neural+stem+cells+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+Biology+Reports%22%5BJournal%5D)">Superparamagnetic iron oxide nanoparticles as a tool to track mouse neural stem cells in vivo.</a> Molecular Biology Reports. 46 (1), 191-198 (2019).</li>
<li>Fayol, D., Frasca, G., Le Visage, C., Gazeau, F., Luciani, N., Wilhelm, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Use+of+magnetic+forces+to+promote+stem+cell+aggregation+during+differentiation%2C+and+cartilage+tissue+modeling%5BTitle%5D)+AND+%22Advanced+Materials%22%5BJournal%5D)">Use of magnetic forces to promote stem cell aggregation during differentiation, and cartilage tissue modeling.</a> Advanced Materials. 25 (18), Deerfield Beach, Fla. 2611-2616 (2013).</li>
<li>Kim, J. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High-throughput+generation+of+spheroids+using+magnetic+nanoparticles+for+three-dimensional+cell+culture%5BTitle%5D)+AND+%22Biomaterials%22%5BJournal%5D)">High-throughput generation of spheroids using magnetic nanoparticles for three-dimensional cell culture.</a> Biomaterials. 34 (34), 8555-8563 (2013).</li>
<li>Yamamoto, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preparation+of+artificial+skeletal+muscle+tissues+by+a+magnetic+force-based+tissue+engineering+technique%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Bioscience+and+Bioengineering%22%5BJournal%5D)">Preparation of artificial skeletal muscle tissues by a magnetic force-based tissue engineering technique.</a> Journal of Bioscience and Bioengineering. 108 (6), 538-543 (2009).</li>
<li>Gonçalves, A. I., Rodrigues, M. T., Gomes, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tissue-engineered+magnetic+cell+sheet+patches+for+advanced+strategies+in+tendon+regeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Biomaterialia%22%5BJournal%5D)">Tissue-engineered magnetic cell sheet patches for advanced strategies in tendon regeneration.</a> Acta Biomaterialia. 63, 110-122 (2017).</li>
<li>Du, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+3D+magnetic+tissue+stretcher+for+remote+mechanical+control+of+embryonic+stem+cell+differentiation%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Communications%22%5BJournal%5D)">A 3D magnetic tissue stretcher for remote mechanical control of embryonic stem cell differentiation.</a> Nature Communications. 8 (1), 400(2017).</li>
<li>Amiri, M., Salavati-Niasari, M., Pardakhty, A., Ahmadi, M., Akbari, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Caffeine%3A+A+novel+green+precursor+for+synthesis+of+magnetic+CoFe2O4+nanoparticles+and+pH-sensitive+magnetic+alginate+beads+for+drug+delivery%5BTitle%5D)+AND+%22Materials+Science+and+Engineering%3A+C%22%5BJournal%5D)">Caffeine: A novel green precursor for synthesis of magnetic CoFe2O4 nanoparticles and pH-sensitive magnetic alginate beads for drug delivery.</a> Materials Science and Engineering: C. 76, 1085-1093 (2017).</li>
<li>Vangijzegem, T., Stanicki, D., Laurent, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Magnetic+iron+oxide+nanoparticles+for+drug+delivery%3A+applications+and+characteristics%5BTitle%5D)+AND+%22Expert+Opinion+on+Drug+Delivery%22%5BJournal%5D)">Magnetic iron oxide nanoparticles for drug delivery: applications and characteristics.</a> Expert Opinion on Drug Delivery. 16 (1), 69-78 (2019).</li>
<li>Cazares-Cortes, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recent+insights+in+magnetic+hyperthermia%3A+From+the+%22hot-spot%22+effect+for+local+delivery+to+combined+magneto-photo-thermia+using+magneto-plasmonic+hybrids%5BTitle%5D)+AND+%22Advanced+Drug+Delivery+Reviews%22%5BJournal%5D)">Recent insights in magnetic hyperthermia: From the "hot-spot" effect for local delivery to combined magneto-photo-thermia using magneto-plasmonic hybrids.</a> Advanced Drug Delivery Reviews. 138, 233-246 (2019).</li>
<li>Espinosa, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Magnetic+%28Hyper%29Thermia+or+Photothermia%3F+Progressive+Comparison+of+Iron+Oxide+and+Gold+Nanoparticles+Heating+in+Water%2C+in+Cells%2C+and+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22Advanced+Functional+Materials%22%5BJournal%5D)">Magnetic (Hyper)Thermia or Photothermia? Progressive Comparison of Iron Oxide and Gold Nanoparticles Heating in Water, in Cells, and in vivo.</a> Advanced Functional Materials. 28 (37), 1803660(2018).</li>
<li>Plan Sangnier, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Targeted+thermal+therapy+with+genetically+engineered+magnetite+magnetosomes%40RGD%3A+Photothermia+is+far+more+efficient+than+magnetic+hyperthermia%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Controlled+Release%22%5BJournal%5D)">Targeted thermal therapy with genetically engineered magnetite magnetosomes@RGD: Photothermia is far more efficient than magnetic hyperthermia.</a> Journal of Controlled Release. 279, 271-281 (2018).</li>
<li>Pham, B. T. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biodistribution+and+Clearance+of+Stable+Superparamagnetic+Maghemite+Iron+Oxide+Nanoparticles+in+Mice+Following+Intraperitoneal+Administration%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Molecular+Sciences%22%5BJournal%5D)">Biodistribution and Clearance of Stable Superparamagnetic Maghemite Iron Oxide Nanoparticles in Mice Following Intraperitoneal Administration.</a> International Journal of Molecular Sciences. 19 (1), (2018).</li>
<li>Kolosnjaj-Tabi, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biotransformations+of+magnetic+nanoparticles+in+the+body%5BTitle%5D)+AND+%22Nano+Today%22%5BJournal%5D)">Biotransformations of magnetic nanoparticles in the body.</a> Nano Today. 11 (3), 280-284 (2016).</li>
<li>Bargheer, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+distribution+and+degradation+of+radiolabeled+superparamagnetic+iron+oxide+nanoparticles+and+quantum+dots+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Beilstein+Journal+of+Nanotechnology%22%5BJournal%5D)">The distribution and degradation of radiolabeled superparamagnetic iron oxide nanoparticles and quantum dots in mice.</a> Beilstein Journal of Nanotechnology. 6, 111-123 (2015).</li>
<li>Freund, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+simple+and+widely+applicable+method+to+59Fe-radiolabel+monodisperse+superparamagnetic+iron+oxide+nanoparticles+for+in+vivo+quantification+studies%5BTitle%5D)+AND+%22ACS+Nano%22%5BJournal%5D)">A simple and widely applicable method to 59Fe-radiolabel monodisperse superparamagnetic iron oxide nanoparticles for in vivo quantification studies.</a> ACS Nano. 6 (8), 7318-7325 (2012).</li>
<li>Singh, S. P., Rahman, M. F., Murty, U. S. N., Mahboob, M., Grover, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparative+study+of+genotoxicity+and+tissue+distribution+of+nano+and+micron+sized+iron+oxide+in+rats+after+acute+oral+treatment%5BTitle%5D)+AND+%22Toxicology+and+Applied+Pharmacology%22%5BJournal%5D)">Comparative study of genotoxicity and tissue distribution of nano and micron sized iron oxide in rats after acute oral treatment.</a> Toxicology and Applied Pharmacology. 266 (1), 56-66 (2013).</li>
<li>Levy, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Long+term+in+vivo+biotransformation+of+iron+oxide+nanoparticles%5BTitle%5D)+AND+%22Biomaterials%22%5BJournal%5D)">Long term in vivo biotransformation of iron oxide nanoparticles.</a> Biomaterials. 32 (16), 3988-3999 (2011).</li>
<li>Briley-Saebo, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hepatic+cellular+distribution+and+degradation+of+iron+oxide+nanoparticles+following+single+intravenous+injection+in+rats%3A+implications+for+magnetic+resonance+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+and+Tissue+Research%22%5BJournal%5D)">Hepatic cellular distribution and degradation of iron oxide nanoparticles following single intravenous injection in rats: implications for magnetic resonance imaging.</a> Cell and Tissue Research. 316 (3), 315-323 (2004).</li>
<li>Gu, L., Fang, R. H., Sailor, M. J., Park, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+Clearance+and+Toxicity+of+Monodisperse+Iron+Oxide+Nanocrystals%5BTitle%5D)+AND+%22ACS+Nano%22%5BJournal%5D)">In vivo Clearance and Toxicity of Monodisperse Iron Oxide Nanocrystals.</a> ACS Nano. 6 (6), 4947-4954 (2012).</li>
<li>Sangnier, A. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Impact+of+magnetic+nanoparticle+surface+coating+on+their+long-term+intracellular+biodegradation+in+stem+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Nanoscale%22%5BJournal%5D)">Impact of magnetic nanoparticle surface coating on their long-term intracellular biodegradation in stem cells.</a> Nanoscale. , (2019).</li>
<li>Mazuel, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Magneto-Thermal+Metrics+Can+Mirror+the+Long-Term+Intracellular+Fate+of+Magneto-Plasmonic+Nanohybrids+and+Reveal+the+Remarkable+Shielding+Effect+of+Gold%5BTitle%5D)+AND+%22Advanced+Functional+Materials%22%5BJournal%5D)">Magneto-Thermal Metrics Can Mirror the Long-Term Intracellular Fate of Magneto-Plasmonic Nanohybrids and Reveal the Remarkable Shielding Effect of Gold.</a> Advanced Functional Materials. 27 (9), 1605997(2017).</li>
<li>Van de Walle, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biosynthesis+of+magnetic+nanoparticles+from+nano-degradation+products+revealed+in+human+stem+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences+of+the+United+States+of+America%22%5BJournal%5D)">Biosynthesis of magnetic nanoparticles from nano-degradation products revealed in human stem cells.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 116 (10), 4044-4053 (2019).</li>
<li>Mazuel, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Massive+Intracellular+Biodegradation+of+Iron+Oxide+Nanoparticles+Evidenced+Magnetically+at+Single-Endosome+and+Tissue+Levels%5BTitle%5D)+AND+%22ACS+Nano%22%5BJournal%5D)">Massive Intracellular Biodegradation of Iron Oxide Nanoparticles Evidenced Magnetically at Single-Endosome and Tissue Levels.</a> ACS Nano. 10 (8), 7627-7638 (2016).</li>
<li>Bee, A., Massart, R., Neveu, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Synthesis+of+very+fine+maghemite+particles%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Magnetism+and+Magnetic+Materials%22%5BJournal%5D)">Synthesis of very fine maghemite particles.</a> Journal of Magnetism and Magnetic Materials. 149 (1), 6-9 (1995).</li>
<li>Feldmann, C., Jungk, H. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Polyol-Mediated+Preparation+of+Nanoscale+Oxide+Particles%5BTitle%5D)+AND+%22Angewandte+Chemie+International+Edition%22%5BJournal%5D)">Polyol-Mediated Preparation of Nanoscale Oxide Particles.</a> Angewandte Chemie International Edition. 40 (2), 359-362 (2001).</li>
<li>Hyeon, T., Lee, S. S., Park, J., Chung, Y., Na, H. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Synthesis+of+Highly+Crystalline+and+Monodisperse+Maghemite+Nanocrystallites+without+a+Size-Selection+Process%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+American+Chemical+Society%22%5BJournal%5D)">Synthesis of Highly Crystalline and Monodisperse Maghemite Nanocrystallites without a Size-Selection Process.</a> Journal of the American Chemical Society. 123 (51), 12798-12801 (2001).</li>
<li>Pinna, N., Grancharov, S., Beato, P., Bonville, P., Antonietti, M., Niederberger, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Magnetite+Nanocrystals%3A+Nonaqueous+Synthesis%2C+Characterization%2C+and+Solubility%5BTitle%5D)+AND+%22Chemistry+of+Materials%22%5BJournal%5D)">Magnetite Nanocrystals: Nonaqueous Synthesis, Characterization, and Solubility.</a> Chemistry of Materials. 17 (11), 3044-3049 (2005).</li>
<li>Richard, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((USPIO+size+control+through+microwave+nonaqueous+sol-gel+method+for+neoangiogenesis+T2+MRI+contrast+agent%5BTitle%5D)+AND+%22Nanomedicine%22%5BJournal%5D)">USPIO size control through microwave nonaqueous sol-gel method for neoangiogenesis T2 MRI contrast agent.</a> Nanomedicine. 11 (21), 2769-2797 (2016).</li>
<li>Ngo, A. T., Pileni, M. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assemblies+of+Ferrite+Nanocrystals%3A+Partial+Orientation+of+the+Easy+Magnetic+Axes%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Physical+Chemistry+B%22%5BJournal%5D)">Assemblies of Ferrite Nanocrystals: Partial Orientation of the Easy Magnetic Axes.</a> The Journal of Physical Chemistry B. 105 (1), 53-58 (2001).</li>
<li>Li, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+synthesis+conditions+on+the+properties+of+citric-acid+coated+iron+oxide+nanoparticles%5BTitle%5D)+AND+%22Microelectronic+Engineering%22%5BJournal%5D)">Effect of synthesis conditions on the properties of citric-acid coated iron oxide nanoparticles.</a> Microelectronic Engineering. 110, 329-334 (2013).</li>
<li>Sun, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tracking+stem+cells+and+macrophages+with+gold+and+iron+oxide+nanoparticles+-+The+choice+of+the+best+suited+particles%5BTitle%5D)+AND+%22Applied+Materials+Today%22%5BJournal%5D)">Tracking stem cells and macrophages with gold and iron oxide nanoparticles - The choice of the best suited particles.</a> Applied Materials Today. 15, 267-279 (2019).</li>
<li>Buchner, M., Höfler, K., Henne, B., Ney, V., Ney, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tutorial%3A+Basic+principles%2C+limits+of+detection%2C+and+pitfalls+of+highly+sensitive+SQUID+magnetometry+for+nanomagnetism+and+spintronics%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Applied+Physics%22%5BJournal%5D)">Tutorial: Basic principles, limits of detection, and pitfalls of highly sensitive SQUID magnetometry for nanomagnetism and spintronics.</a> Journal of Applied Physics. 124 (16), 161101(2018).</li>
<li>Wilhelm, C., Gazeau, F., Bacri, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Magnetophoresis+and+ferromagnetic+resonance+of+magnetically+labeled+cells%5BTitle%5D)+AND+%22European+Biophysics+Journal%22%5BJournal%5D)">Magnetophoresis and ferromagnetic resonance of magnetically labeled cells.</a> European Biophysics Journal. 31 (2), 118-125 (2002).</li>
<li>Jing, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+intracellular+magnetic+nanoparticle+uptake+measured+by+live+cell+magnetophoresis%5BTitle%5D)+AND+%22The+FASEB+Journal%22%5BJournal%5D)">Quantitative intracellular magnetic nanoparticle uptake measured by live cell magnetophoresis.</a> The FASEB Journal. 22 (12), 4239-4247 (2008).</li>
<li>Van de Walle, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Real-time+in+situ+magnetic+measurement+of+the+intracellular+biodegradation+of+iron+oxide+nanoparticles+in+a+stem+cell-spheroid+tissue+model%5BTitle%5D)+AND+%22Nano+Research%22%5BJournal%5D)">Real-time in situ magnetic measurement of the intracellular biodegradation of iron oxide nanoparticles in a stem cell-spheroid tissue model.</a> Nano Research. , (2020).</li>
</ol>

作者无任何利益冲突需要披露。

通过快速高效的微波辅助合成方法，可轻松制备出尺寸可控的磁性纳米颗粒，并可进一步用特定分子进行包覆。关键步骤是将铁盐和苯甲醇在真空条件下储存，以确保颗粒尺寸分布较窄。苯甲醇同时作为溶剂和配体，使得无需额外添加配体即可直接获得尺寸均一的裸铁氧化物纳米颗粒。在将纳米颗粒转移至水中后，裸磁性纳米颗粒可被多种不同配体轻松包覆。该包覆层赋予纳米颗粒间以及纳米颗粒与细胞间的相互作用特性，从而影响其细胞内化程度；这一参数需要严格控制，因为生物医学应用通常要求最低限度的内化，而过高的内化可能对细胞造成损伤，并潜在引发细胞毒性事件31。磁学测量是一种强大的工具，可用于评估纳米颗粒的细胞内化程度及其在细胞内的命运。将磁性纳米颗粒引入干细胞后，可通过简单的离心操作形成类球体，随后在抑制细胞增殖并促进细胞外基质生成的培养基中进行培养。细胞间黏附性显著增强，并开始构建组织结构。这些类球体易于操作，且可长期培养（数月），从而实现对磁性纳米颗粒在生物环境中长期命运的追踪。通过抑制细胞分裂，可避免纳米颗粒从母细胞向子细胞的稀释；此外，已有研究证实，在该细胞类球体模型中，培养一个月期间未发生铁元素的流失<sup class=...

人们对氧化铁纳米颗粒在多种生物医学应用中的磁学特性日益关注。由于其对磁共振的响应性，氧化铁纳米颗粒可作为磁共振成像（MRI）中可靠的对比剂，这一优势在再生医学中尤为突出，因为标记了磁性纳米颗粒的细胞在植入后可实现体内追踪1。利用磁场还可实现对细胞的远程操控；通过这种方法，可磁性地构建细胞球体2,3、环状结构4或片层结构5，并对其进行远程刺激6，这在无支架组织工程的发展中具有重要意义。这些纳米颗粒的应用范围还包括药物递送系统7,8以及用于杀伤癌细胞的磁感应和光诱导热疗9,10,11。在所有这些应用中，纳米颗粒通常通过静脉注射或直接被细胞内化的方式进入生物环境，并长期存留于其中，因而引发了对其细胞内命运的关注。
体内分析提供了对纳米颗粒在生物体内命运的总体认识：注射进入血液后，它们首先主要被肝脏（库普弗细胞）、脾脏和骨髓中的巨噬细胞捕获，随后逐渐降解，并进入生物体的铁池12,13,14,15,16,17,18,19。只有当纳米颗粒在生物体内循环时，才可能进行定性观察。通常，可利用透射电子显微镜（TEM）直接观察纳米颗粒，而器官中铁的存在则可通过含量测定来确定。近年来，已能在封闭体系中对细胞群体直接评估其命运，即在无铁流失的条件下，实现对细胞水平上纳米颗粒生物转化的定量测量20,21,22。此类测量可通过分析纳米颗粒的磁学性质实现，因其磁性与结构完整性密切相关。振动样品磁强计（VSM）是一种通过周期性振动样品，使检测线圈测量感应磁通量，从而获得样品在外加磁场下的磁矩的技术。这种同步检测方法可实现快速测量，有利于对大量样品的磁矩进行测定20,21,22,23。VSM获得的宏观磁信号可定量反映整个生物样品的情况，并直接关联于纳米颗粒的尺寸与结构。特别是，它可提供样品在饱和状态下的磁矩（以 emu 表示），这是对样品中磁性纳米颗粒数量及其特有磁学性质的直接量化指标。
研究表明，磁性纳米颗粒的细胞内加工过程与其结构特征密切相关20。这些特征可通过优化的合成方案进行调控。每种方案均有其优势与局限性。氧化铁纳米颗粒通常通过铁离子在水溶液中的共沉淀法合成24。为克服纳米颗粒尺寸多分散性的局限，已发展出多元醇介导的溶胶-凝胶法等其他合成方法25。非水相热分解法可制备出尺寸高度均一的氧化铁纳米颗粒26。然而，该方法需使用大量表面活性剂（如油胺或油酸），使得其在生物医学应用中的功能化及水相转移过程变得复杂。因此，我们采用一种非水相溶胶-凝胶路线合成此类磁性纳米颗粒，以获得高结晶度、高纯度和良好可重复性27。该方案可制备出尺寸高度可控的纳米颗粒，并可通过调节温度实现尺寸调节28。然而，微波辅助的非水相溶胶-凝胶法所制得的纳米颗粒尺寸上限约为12 nm，因此该方法不适用于室温下使用铁磁性颗粒的应用场景。除核结构的合成外，另一个需要考虑的关键因素是表面涂层。涂层位于纳米颗粒表面，可作为锚定分子促进纳米颗粒的靶向内化，或保护纳米颗粒免于降解。由于苯甲醇同时充当氧源和配体，因此无需额外添加表面活性剂或配体即可获得裸纳米颗粒。合成后，纳米颗粒可直接进行表面功能化，无需经历表面活性剂置换过程。
本文评估了两种具有相同核心但涂层不同的纳米颗粒。核心采用一种快速且高效的微波辅助技术合成。所比较的两种涂层分别为柠檬酸——在生物医学应用中使用最广泛的涂层试剂之一29,30——和聚丙烯酸（PAA），后者是一种具有大量螯合功能的聚合物涂层。随后采用振动样品磁强计（VSM）测量，首先定量纳米颗粒被细胞摄取的程度，进而直接评估纳米颗粒在干细胞内化后结构的完整性。结果表明，孵育浓度影响纳米颗粒的摄取量，而涂层则影响其降解行为，其中PAA所含大量锚定分子可保护核心免受降解。

<table><tbody><tr><td>0.05% 胰蛋白酶-EDTA (1x)</td><td>Life Technologies</td><td>25300-054</td><td></td></tr><tr><td>用于合成的苯甲醇</td><td>Sigma Aldrich</td><td>8.22259</td><td></td></tr><tr><td>地塞米松</td><td>Sigma</td><td>D4902</td><td>用100%乙醇配制1 mM的储备液，并于-20&amp;deg;C保存</td></tr><tr><td>二氯甲烷 &amp;ge;99%，稳定化，GPR RECTAPUR</td><td>VWR Chemicals</td><td>23367</td><td></td></tr><tr><td>含Glutamax I的DMEM培养基</td><td>Life Technologies</td><td>31966-021</td><td>不含丙酮酸钠，不含HEPES</td></tr><tr><td>无水乙醇</td><td>VWR</td><td>20821.310</td><td></td></tr><tr><td>胎牛血清</td><td>Life Technologies</td><td>10270-106</td><td></td></tr><tr><td>10%中性缓冲福尔马林溶液</td><td>Sigma</td><td>HT5012</td><td></td></tr><tr><td>盐酸，1.0N 标准溶液</td><td>Alfa Aesar</td><td>35640</td><td></td></tr><tr><td>乙酰丙酮铁(III)（&gt; 99.9%）</td><td>Sigma Aldrich</td><td>517003</td><td></td></tr><tr><td>ITS预混通用培养补充剂 (20x)</td><td>Corning</td><td>354352</td><td></td></tr><tr><td>L-抗坏血酸-2-磷酸</td><td>Sigma</td><td>A8960</td><td>用蒸馏水新鲜配制浓缩溶液（25 mM）</td></tr><tr><td>L-脯氨酸</td><td>Sigma</td><td>P5607</td><td>用蒸馏水配制175 mM的储备液，并于4&amp;deg;C保存</td></tr><tr><td>间充质干细胞（MSC）</td><td>Lonza</td><td>PT-2501</td><td></td></tr><tr><td>Monowave玻璃小瓶</td><td>Anton Paar</td><td>82723_us</td><td></td></tr><tr><td>微波反应仪</td><td>Anton Paar</td><td>Monowave 300</td><td></td></tr><tr><td>MSCGM BulletKit培养基</td><td>Lonza</td><td>PT-3001</td><td>配制完全培养基时，将提供的BulletKit（含血清、谷氨酰胺和抗生素）加入MSCGM培养基中</td></tr><tr><td>不含CaCl₂和MgCl₂的PBS</td><td>Life Technologies</td><td>14190-094</td><td></td></tr><tr><td>青霉素（10,000 U/mL）/链霉素（10,000&amp;micro;g/mL）</td><td>Life Technologies</td><td>15140-122</td><td></td></tr><tr><td>聚丙烯酸钠盐</td><td>Sigma Aldrich</td><td>416010</td><td>分子量 = 1200 g/mol</td></tr><tr><td>RPMI 1640培养基，不含谷氨酰胺</td><td>Life Technologies</td><td>31870-025</td><td>不含丙酮酸钠，不含HEPES</td></tr><tr><td>氢氧化钠，1.0N 标准溶液</td><td>Alfa Aesar</td><td>35629</td><td></td></tr><tr><td>丙酮酸钠溶液 100 mM</td><td>Sigma</td><td>S8636</td><td></td></tr><tr><td>无菌锥形离心管</td><td>Falcon</td><td>352097</td><td>15 mL离心管</td></tr><tr><td>胰蛋白酶-EDTA (0.05%)，含酚红</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>25300054</td><td></td></tr><tr><td>三水合柠檬酸钠</td><td>VWR</td><td>33615.268</td><td>用蒸馏水配制1 M的储备液，并于4&amp;deg;C保存</td></tr><tr><td>二水合柠檬酸三钠，分析纯认证试剂</td><td>Sigma Aldrich</td><td>10396430</td><td></td></tr><tr><td>超滤离心管</td><td>Amicon</td><td>AC S510024</td><td></td></tr></tbody></table>

利用磁力测量法监测化学合成氧化铁纳米颗粒的细胞摄取及后续生物降解

Using Magnetometry to Monitor Cellular Incorporation and Subsequent Biodegradation of Chemically Synthetized Iron Oxide Nanoparticles

由氧化铁制成的磁性纳米颗粒因其在多种生物医学应用中的独特优势而备受关注，这些应用中磁性纳米颗粒常被细胞内化并长期留存。一个关键挑战在于如何利用可靠且精确的方法评估这些颗粒在细胞内的命运。本文介绍了使用振动样品磁强计（VSM）通过测量磁矩来精确定量细胞内磁性纳米颗粒完整性的方法。首先，利用两种类型的磁性纳米颗粒对干细胞进行标记；这些纳米颗粒通过一种快速高效的基于微波的非水溶胶-凝胶法合成，具有相同的内核，但在表面涂层上有所不同：一种采用常用的柠檬酸分子涂层，另一种则采用聚丙烯酸涂层。随后通过离心法形成三维细胞球体，并在不同时间点使用VSM测量这些球体的磁矩。所获得的磁矩可直接反映纳米颗粒的完整性，磁矩值的降低表明纳米颗粒发生了降解。实验结果显示，两种纳米颗粒的磁矩均随培养时间延长而下降，表明其发生了生物降解；同时发现，与柠檬酸涂层相比，聚丙烯酸涂层具有更好的保护作用。

采用微波辅助合成法，制备出具有单分散性的磁性纳米颗粒，其核芯尺寸为8.8 ± 2.5 nm，并以柠檬酸盐或聚丙烯酸（PAA）进行包覆（图1A）。随后，将干细胞与分散在培养基中特定浓度的上述纳米颗粒共孵育30分钟，使其通过内吞作用进入细胞并被限制在细胞内体中（图1B）。磁性标记的干细胞经悬浮于培养基中，离心后形成细胞沉淀，将该沉淀继续培养至多21天（图1C）。所获得的细胞球体经固定以终止生物过程后，保存于磷酸盐缓冲液（PBS）中，直至通过振动样品磁强计（VSM）进行测量。
首先，使用振动样品磁强计（VSM）测量纳米颗粒溶液的磁矩：取含有7 µg铁的10 µL纳米颗粒水分散液进行测量，所得曲线如图2A所示。由于该溶液中含有水以及样品 holder 的存在，除纳米颗粒的超顺磁信号外，还会检测到抗磁信号。可通过测量曲线第二部分斜率得到相应的抗磁常数（M<...

通过非水溶胶-凝胶法制备氧化铁纳米颗粒，并用阴离子短链分子或聚合物进行包覆。利用振动样品磁强计（VSM），展示了磁强测量技术在监测磁性纳米颗粒被人类干细胞摄取及发生生物转化过程中的应用。

由氧化铁制成的磁性纳米颗粒因其常被内化，在多种生物医学应用中展现出特殊的研究价值……

本视频介绍了一种快速高效的磁性纳米颗粒合成方法，并展示了如何利用磁强计对生物环境中的转化过程进行成像。磁性纳米颗粒在生物医学应用中受到越来越多的关注，了解其进入细胞后的命运至关重要。本研究通过测量细胞磁性来实现这一目标。在磁性纳米颗粒的合成和测量过程中，结果可能受到污染的影响。请使用清洗干净的试剂瓶，并确保磁强计设备无污染。磁强计的样品支架通常用于粉末样品。我们展示了如何将样品 holder 适配用于液体或生物样品。在 30 毫升的微波玻璃小瓶中，将 400 毫克三氯化铁乙酰丙酮配合物溶解于 10 毫升苯甲醇中。使用微波反应器，以每分钟 11.25 摄氏度的升温速率，将悬浮液从 25 摄氏度加热至 250 摄氏度，并在 250 摄氏度下维持该温度。为分离纳米颗粒，使用钕磁铁作用30分钟。为沉淀纳米颗粒，使用10毫升指定洗涤液进行一系列洗涤，并每次施加钕磁铁作用5分钟。弃去滤液，加入12毫升10⁻²摩尔的盐酸。将悬浮液和100千道尔顿滤膜在2,200 × g条件下离心10分钟。然后将纳米颗粒重悬于10毫升10⁻²摩尔盐酸中。按照论文所述方法配制包被分子溶液。将10毫升纳米颗粒水分散液加入包覆分子溶液中，包覆分子与纳米颗粒的质量比为5:1。然后在室温下使用磁力搅拌器搅拌混合物2小时。反应完成后，用1摩尔氢氧化钠将混合物的pH值调节至7。当人源间充质干细胞培养至第五代且融合度达到90%时，移除培养基，并用不含谷氨酰胺的无血清RPMI洗涤细胞。向每个150平方厘米的培养瓶中加入10毫升纳米颗粒悬浮液。将培养瓶置于37摄氏度、5%二氧化碳条件下孵育30分钟。然后弃去含有纳米颗粒悬浮液的培养基，用无血清的 RPMI 1640 培养基洗涤细胞一次。加入含 10% FBS 和 1% 青霉素-链霉素的 DMEM 培养基。在 37°C 和 5% 二氧化碳条件下孵育过夜，以确保纳米颗粒完全被细胞内化。向每瓶磁标记的MSCs中加入10毫升预热至37摄氏度的0.05%胰蛋白酶EDTA。2至3分钟后，当细胞脱落时，立即加入预热的含补充剂的DMEM培养基，体积为胰蛋白酶EDTA体积的三分之一，以终止胰蛋白酶反应。将脱落的细胞在260 × g离心5分钟。吸弃培养基，将细胞重悬于少量细胞球培养基中，浓度约为每50微升含200,000个细胞。向一个15毫升无菌锥形离心管中加入1毫升 freshly prepared 的细胞球培养基，然后加入相当于200,000个细胞的细胞悬液体积。将这些磁标记细胞在180 ×g 条件下离心3分钟，以在离心管底部形成细胞沉淀。然后将离心管放入37°C、5% CO₂的培养箱中，保持管盖略微打开以利于气体交换。将一定体积的磁性纳米颗粒或固定的单个细胞球状体悬浮液放入振动样品磁强计（VSM）的样品 holder 中。如有必要，可使用聚四氟乙烯（PTFE）密封带以防止任何泄漏。将样品架插入振动样品磁强计（VSM）中，并扫描样品偏移。将样品置于对应磁化强度最大值的位置。在负1,500奥斯特至正1,500奥斯特的低磁场范围内，以每秒20奥斯特的速率进行第一次测量。在0奥斯特至正30,000奥斯特的高磁场范围内，以每秒200奥斯特的速率进行第二次测量。使用振动样品磁强计测量了10 µL分散在水溶液中的纳米颗粒。曲线第二部分的斜率是抗磁常数，代表来自水和样品 holder 的抗磁信号。从溶液的磁矩中减去该抗磁常数，从而得到仅由纳米颗粒产生的磁矩。随后确定了饱和状态下的磁矩。包被的纳米颗粒被干细胞内化。电子显微镜图像显示，柠檬酸盐包被和聚丙烯酸（PAA）包被的纳米颗粒局限于内体中。细胞经离心沉淀后形成细胞球状体，可在培养条件下长期维持。还使用VSM测量了单个细胞球体，并利用饱和磁矩计算细胞样品中纳米颗粒的数量。纳米颗粒的摄取量取决于其孵育浓度。细胞球体随时间推移磁性降低，表明纳米颗粒发生了生物降解，这一结果通过电子显微镜得到了证实。柠檬酸盐包被的纳米颗粒比聚丙烯酸（PAA）包被的纳米颗粒降解更显著。通过磁力测量法，可精确定量细胞内磁性纳米颗粒的降解情况，并评估纳米颗粒特性对细胞原始行为的影响。本方案中，磁力测量是在细胞球状体上进行的，但该方法可扩展应用于悬浮细胞或器官。通过所述方法，您能够探究新设计的磁性纳米颗粒在不同目标细胞系统中的相互作用，同时还可以追踪其在体内的生物分布及归宿。

using-magnetometry-to-monitor-cellular-incorporation-subsequent

Research

科研

JoVE Journal

Bioengineering

生物工程

使用磁力学监测化学合成氧化铁纳米粒子的细胞合并和后续生物降解

我们介绍一种使用美国食品药品监督管理局（FDA）批准的超顺磁性氧化铁（SPIO）——菲柔莫醇（Feraheme）对干细胞进行标记和追踪的技术。该细胞成像技术利用磁共振（MR）成像进行可视化，可便捷地用于患者干细胞移植成功或失败的长期监测与诊断。...

使用美国食品药品监督管理局批准的氧化铁纳米颗粒 Ferumoxytol 标记干细胞

来源：Arias, S. L., 等. 利用氧化铁纳米颗粒制备功能化磁性细菌纳米纤维素。J. Vis. Exp. (2016)本视频展示了在由Gluconacetobacter...

磁铁矿嵌入的细菌纤维素膜的制备

在此，我们介绍一种用于受损血管重建应用的细菌纤维素（BNC）磁性化制备方案。该BNC由 G. xylinus 菌株。另一方面，BNC 的磁化是通过 原位 Fe沉淀2+ 和 Fe3+ BNC 网格内部的亚铁离子。...

利用氧化铁纳米颗粒制备功能化磁性细菌纤维素

靶向细胞递送在多种生物医学应用中具有重要意义。本实验方案旨在利用超顺磁性氧化铁纳米颗粒（SPION）标记细胞，从而实现磁性细胞靶向，以高度可控的方式进行细胞递送与定位。...

使用超顺磁性氧化铁纳米颗粒进行细胞标记与靶向

微波技术可实现用于动脉粥样硬化斑块表征的氧化铁纳米颗粒的极快速合成。在纳米颗粒外侧使用氨基双膦酸盐可促进其在动脉粥样硬化区域的快速富集。...

微波驱动合成氧化铁纳米颗粒用于快速检测动脉粥样硬化

本文介绍了一种掺钴磁性铁蛋白的合成与阳离子化方案，以及利用阳离子化磁性铁蛋白快速磁化干细胞的方法。...

合成阳离子化磁铁蛋白用于细胞的超快速磁化

我们描述了一种用于检测存在的化学元素的方法 原位 在人类细胞中以及它们的 体外 定量分析。该方法适用于任何细胞类型，尤其适用于单细胞水平的定量化学分析。 体外...

原位检测与单细胞定量金属氧化物纳米颗粒的核微探针分析方法

本论文描述了一种利用PEI/MNP载体高效、非病毒性地将miR递送至内皮细胞并实现其磁化的方法。因此，该方法除了可实现遗传修饰外，还可实现磁性细胞导向和磁共振成像（MRI）检测。该技术可用于改善治疗性细胞产品的特性。...

制备与 体外 磁化miR修饰内皮细胞的表征

本研究描述了磁性纳米颗粒的制备方法，其表面包覆 SiO2，随后使用（3-氨基丙基）三乙氧基硅烷（APTES）进行氨基功能化，并通过琥珀酰基团作为连接臂与去铁胺偶联。此外，还详细描述了对所有中间产物纳米颗粒及最终偶联物进行的深入结构表征，以及利用Y.

功能化磁性纳米颗粒的合成、与铁载体去铁胺的偶联及其在细菌检测中的应用评价

在本研究中，我们提供了一种利用抗体对磁性纳米材料进行生物功能化的方案，以实现对特定细胞的靶向。作为示例，我们使用铁纳米线来靶向癌细胞。...

磁性纳米材料的生物功能化

本研究利用细胞电阻抗传感技术（ECIS）——一种实时、高通量的筛选方法，评估了一种选定金属-有机框架材料的毒理学特征。...

用于实时评估金属有机框架毒理学特征的细胞电子基底传感技术

了解利用磁力学监测化学合成氧化铁纳米粒子在人源干细胞中的合并与生物降解过程。该方法采用非水溶胶凝胶法合成纳米粒子，并通过振动样品磁强计实现精准定量分析。

利用磁力测量法监测化学合成氧化铁纳米颗粒的细胞摄取及后续生物降解

探索更多视频