Name: 测量个体果蝇黑色素气器酒精镇分时间的高通量方法 (视频) | JoVE Journal
Uploaded: 2020-04-20T13:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 15 s
Description: 了解用于测量单个果蝇酒精镇静敏感性的高通量方法。该技术采用24孔培养板和受控环境条件，可在10分钟内快速收集大量样本数据，为研究酒精敏感性的遗传基础提供可靠手段。

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本研究由美国国立卫生研究院（NIH）资助，资助项目编号为 DA041613 和 GM128974，授予 TFCM 和 RRHA。

1. 测试装置的构建
<ol>
	<li>使用硬纸板和24孔细胞培养板，通过将培养板轮廓描在硬纸板上并裁剪出相应区域，制作一个与24孔细胞培养板尺寸相同的硬纸板模板。</li>
	<li>利用步骤1.1中制作的硬纸板模板，裁剪一块与细胞培养板尺寸相同的小型昆虫筛网。</li>
	<li>使用热熔胶枪，在24孔细胞培养板顶部边缘周围涂上一圈热熔胶，并将筛网固定在敞口孔的上方，完成培养板的制备。</li>
	<li>使用热熔胶枪，将木制搅拌棒分别固定在步骤1.3中同一细胞培养板的三个侧边上。改造后的细胞培养板应与图1A所示的板示意图以及图2所示的实验装置相似。 
	注意：准备的细胞培养板数量应至少达到可容纳于成像室内的数量（见下文）。</li>
</ol>
<img alt="液体处理过程中的微孔板网格示意图及移液器；实验装置示意图。" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/61108/61108fig1.jpg" data-altupdatedat="1788250015000" data-alt="图1"> 
图1：测试装置与拍摄腔室示意图。（A）上部示意图。分别为测试装置的俯视图、侧视图和前视图。一层筛网平铺于24孔细胞培养板上方。箭头所示的木制压舌板固定在相邻的三个边上，用于增强稳定性并辅助对齐：在具有六个孔的一侧放置两根，在具有四个孔的一侧放置一根。所有部件均使用热熔胶粘接固定。（B）下部示意图。分别为检测装置设置的俯视图、侧视图和前视图。盒子右侧切有一条狭缝，从盖子开口处延伸至开口后缘，狭缝底部与内表面齐平。盒子顶部（与地面平行的表面）中央开有一个孔，以实现最佳视频拍摄视野。阴影框表示视频摄像机。<a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/61108/61108fig1large.jpg" target="_blank">请点击此处查看该图的放大版本。</a>
<img alt="培养箱内的细胞培养成像装置；白光照明，显微镜相机就绪。" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/61108/61108fig2.jpg" data-altupdatedat="1788250015000" data-alt="图 2"> 
图 2：检测系统的照片。 视频相机放置在聚苯乙烯培养室的顶部，镜头插入图中所示的切口孔中，具体如图 1B的示意图所示。两套改造后的24孔细胞培养板放置在一个照明垫上，该照明垫从培养室侧面的狭缝中插入。<a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/61108/61108fig2large.jpg" target="_blank">请点击此处查看该图的放大版本。</a>
2. 成像室的构建
<ol>
	<li>通过在聚苯乙烯盒的一侧切割出与摄像机镜头大小相同的孔来制作拍摄室。在聚苯乙烯盒的另一侧切割出一条宽度与照明垫相匹配的狭缝。拍摄室应类似于图1B和图2中所示的拍摄室。</li>
	<li>将照明垫插入狭缝中，并将摄像机放置在照明垫上方的镜头孔中，以完成拍摄室的准备工作。</li>
	<li>将所有材料置于受控环境中，并在此环境中进行后续所有测试，理想条件为行为学实验舱，相对湿度约30%，温度25 °C，气流均匀，噪声水平低于65 dB。</li>
</ol>
3. 测试装置和果蝇的准备
<ol>
	<li>用移液器将 1 mL 100% 乙醇通过筛网移入每个孔中。</li>
	<li>用一块纱布将筛网擦干。</li>
	<li>使用步骤 1.1 中制作的纸板模板，裁剪两块与细胞培养板尺寸相同的纱布。将其放置在已改装的细胞培养板的干燥筛网上，该培养板中已含有步骤 3.2 中的乙醇。</li>
	<li>以步骤 1.1 中制作的纸板模板为大致参考，在薄而柔韧的塑料砧板上描出轮廓，并在一侧短边方向扩大 1–2 cm。从塑料砧板上裁下扩大后的轮廓区域。裁剪后，确保该塑料片仍能插入测试装置的三根木棒之间，但有一端应悬出 1–2 cm。</li>
	<li>（可选）若需自制吸液装置，可先将一个 P1000 移液器吸头切成两半，取直径较大的一端插入一段长约 30 cm 的软管一端作为吹嘴，组装成如图 3所示的吸液装置。</li>
</ol>
<img alt="静态平衡原理、虹吸管装置、流体动力学实验、压力差。" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/61108/61108fig3.jpg" data-altupdatedat="1788250015000" data-alt="图3"> 
图3：一种果蝇吸虫器，其通过连接在柔性管上的可更换吹嘴，以及带有棉纱塞的宽口径血清移液管收集果蝇。操作者可在无需麻醉的情况下，将单只果蝇吸入移液管中进行转移。<a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/61108/61108fig3large.jpg" target="_blank">请点击此处查看该图的放大版本。</a>
<ol start="6">
	<li>（可选）为完成吸虫器的组装，用纱布覆盖一根10 cm移液管宽的一端，以防止果蝇进入管路，然后将移液管（纱布端朝前）插入管路的开口端，作为果蝇容纳室。吸虫器的结构应如图3所示。</li>
	<li>使用吸虫器（图3，步骤3.5和3.6），将每只果蝇分别吸入一个独立的24孔细胞培养板中。使用柔性塑料膜覆盖已吸入果蝇的孔位。记录每个果蝇所在的孔位及其相关的基因型或表型信息。</li>
	<li>将柔性塑料膜紧贴盛有果蝇的细胞培养板顶部，防止果蝇逃逸，然后将该板倒置在装有乙醇的改造后细胞培养板上。柔性塑料膜应位于纱布片的上方。使用冰棒棍调整倒置的含果蝇细胞培养板的位置，确保每个含乙醇的孔与每个含果蝇的孔准确对齐。</li>
	<li>实验装置应如图2所示。</li>
</ol>
4. 果蝇测试
<ol>
	<li>确保照明垫以最大亮度点亮，以获得最佳视觉对比度。启动摄像机开始录像。</li>
	<li>为使果蝇暴露于乙醇，小心移除孔板与测试装置之间的塑料隔层，注意不要松动纱布。</li>
	<li>当所有果蝇均失去姿势控制时，终止视频录制。一旦怀疑所有果蝇均已失去姿势控制，应用力轻敲孔板中心，确认所有果蝇完全丧失姿势控制。若观察到任何运动，则继续录制。此后每隔1–2分钟定期轻敲，直至无任何运动反应为止。</li>
	<li>（可选）为快速回收果蝇，仅移除测试装置的上层板，露出静卧在纱布上的麻醉果蝇。用移液器将单个果蝇吸入选定容器中进行恢复。</li>
	<li>在改良的细胞培养板中，至少每小时更换一次1 mL新鲜的100%乙醇，以补偿乙醇挥发和湿度变化，确保整个实验过程中乙醇暴露条件一致。用纱布擦干筛网。</li>
	<li>根据需要重复上述步骤。 
	注意：为提高通量，可在视频录制过程中将下一批果蝇吸入新的细胞培养板中。本步骤可暂停，视频录像可后续回看分析。</li>
</ol>
5. 果蝇镇静时间的测定
<ol>
	<li>通过观看视频记录每只果蝇的镇静时间。镇静时间定义为果蝇完全丧失姿势控制能力和运动能力的时刻。建议倒放视频，记录果蝇开始移动的时间点，以确保准确性。</li>
</ol>

<ol><li>Heath, A. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetic+differences+in+alcohol+sensitivity+and+the+inheritance+of+alcoholism+risk%5BTitle%5D)+AND+%22Psychological+Medicine%22%5BJournal%5D)">Genetic differences in alcohol sensitivity and the inheritance of alcoholism risk.</a> Psychological Medicine. 29 (5), 1069-1081 (1999).</li>
<li>Schuckit, M. A., Smith, T. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+relationships+of+a+family+history+of+alcohol+dependence%2C+a+low+level+of+response+to+alcohol+and+six+domains+of+life+functioning+to+the+development+of+alcohol+use+disorders%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Studies+on+Alcohol%22%5BJournal%5D)">The relationships of a family history of alcohol dependence, a low level of response to alcohol and six domains of life functioning to the development of alcohol use disorders.</a> Journal of Studies on Alcohol. 61 (6), 827-835 (2000).</li>
<li>Trim, R. S., Schuckit, M. A., Smith, T. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+relationships+of+the+level+of+response+to+alcohol+and+additional+characteristics+to+alcohol+use+disorders+across+adulthood%3A+a+discrete-time+survival+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Alcoholism%3A+Clinical+and+Experimental+Research%22%5BJournal%5D)">The relationships of the level of response to alcohol and additional characteristics to alcohol use disorders across adulthood: a discrete-time survival analysis.</a> Alcoholism: Clinical and Experimental Research. 33 (9), 1562-1570 (2009).</li>
<li>Schuckit, M. A., Smith, T. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Onset+and+course+of+alcoholism+over+25+years+in+middle+class+men%5BTitle%5D)+AND+%22Drug+and+Alcohol+Dependence%22%5BJournal%5D)">Onset and course of alcoholism over 25 years in middle class men.</a> Drug and Alcohol Dependence. 113 (1), 21-28 (2011).</li>
<li>Morozova, T. V., Mackay, T. F. C., Anholt, R. R. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetics+and+genomics+of+alcohol+sensitivity%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+Genetics+and+Genomics%22%5BJournal%5D)">Genetics and genomics of alcohol sensitivity.</a> Molecular Genetics and Genomics. 289 (3), 253-269 (2014).</li>
<li>Heberlein, U., Wolf, F. W., Rothenfluh, A., Guarnieri, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+genetic+analysis+of+ethanol+intoxication+in+Drosophila+melanogaster%5BTitle%5D)+AND+%22Integrative+and+Comparative+Biology%22%5BJournal%5D)">Molecular genetic analysis of ethanol intoxication in Drosophila melanogaster.</a> Integrative and Comparative Biology. 44 (4), 269-274 (2004).</li>
<li>Engel, G. L., Taber, K., Vinton, E., Crocker, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Studying+alcohol+use+disorder+using+Drosophila+melanogaster+in+the+era+of+%27Big+Data%27%5BTitle%5D)+AND+%22Behavioral+and+Brain+Functions%22%5BJournal%5D)">Studying alcohol use disorder using Drosophila melanogaster in the era of 'Big Data'.</a> Behavioral and Brain Functions. 15 (1), 7(2019).</li>
<li>Singh, C. M., Heberlein, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetic+control+of+acute+ethanol-induced+behaviors+in+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22Alcoholism%3A+Clinical+and+Experimental+Research%22%5BJournal%5D)">Genetic control of acute ethanol-induced behaviors in Drosophila.</a> Alcoholism: Clinical and Experimental Research. 24 (8), 1127-1136 (2000).</li>
<li>Mackay, T. F. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Drosophila+melanogaster+Genetic+Reference+Panel%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">The Drosophila melanogaster Genetic Reference Panel.</a> Nature. 482 (7384), 173-178 (2012).</li>
<li>Huang, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Natural+variation+in+genome+architecture+among+205+Drosophila+melanogaster+Genetic+Reference+Panel+lines%5BTitle%5D)+AND+%22Genome+Research%22%5BJournal%5D)">Natural variation in genome architecture among 205 Drosophila melanogaster Genetic Reference Panel lines.</a> Genome Research. 24 (7), 1193-1208 (2014).</li>
<li>Morozova, T. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+Cyclin+E+centered+genetic+network+contributes+to+alcohol-induced+variation+in+Drosophila+development%5BTitle%5D)+AND+%22G3%22%5BJournal%5D)">A Cyclin E centered genetic network contributes to alcohol-induced variation in Drosophila development.</a> G3. 8 (8), Bethesda, Md. 2643-2653 (2018).</li>
<li>Morozova, T. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Polymorphisms+in+early+neurodevelopmental+genes+affect+natural+variation+in+alcohol+sensitivity+in+adult+drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Genomics%22%5BJournal%5D)">Polymorphisms in early neurodevelopmental genes affect natural variation in alcohol sensitivity in adult drosophila.</a> BMC Genomics. 16, 865(2015).</li>
<li>Scholz, H., Ramond, J., Singh, C. M., Heberlein, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Functional+ethanol+tolerance+in+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22Neuron%22%5BJournal%5D)">Functional ethanol tolerance in Drosophila.</a> Neuron. 28 (1), 261-271 (2000).</li>
<li>Berger, K. H., Heberlein, U., Moore, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rapid+and+chronic%3A+two+distinct+forms+of+ethanol+tolerance+in+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22Alcoholism%3A+Clinical+and+Experimental+Research%22%5BJournal%5D)">Rapid and chronic: two distinct forms of ethanol tolerance in Drosophila.</a> Alcoholism: Clinical and Experimental Research. 28 (10), 1469-1480 (2004).</li>
<li>Morozova, T. V., Anholt, R. R. H., Mackay, T. F. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transcriptional+response+to+alcohol+exposure+in+Drosophila+melanogaster%5BTitle%5D)+AND+%22Genome+Biology%22%5BJournal%5D)">Transcriptional response to alcohol exposure in Drosophila melanogaster.</a> Genome Biology. 7 (10), 95(2006).</li>
<li>Weber, K. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+apparatus+for+measurement+of+resistance+to+gas-phase+agents%5BTitle%5D)+AND+%22Drosophila+Information+Service%22%5BJournal%5D)">An apparatus for measurement of resistance to gas-phase agents.</a> Drosophila Information Service. 67, 91-93 (1988).</li>
<li>Weber, K. E., Diggins, L. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Increased+selection+response+in+larger+populations.+II.+Selection+for+ethanol+vapor+resistance+in+Drosophila+melanogaster+at+two+population+sizes%5BTitle%5D)+AND+%22Genetics%22%5BJournal%5D)">Increased selection response in larger populations. II. Selection for ethanol vapor resistance in Drosophila melanogaster at two population sizes.</a> Genetics. 125 (3), 585-597 (1990).</li>
<li>Cohan, F. M., Graf, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Latitudinal+cline+in+Drosophila+melanogaster+for+knockdown+resistance+to+ethanol+fumes+and+for+rates+of+response+to+selection+for+further+resistance%5BTitle%5D)+AND+%22Evolution%22%5BJournal%5D)">Latitudinal cline in Drosophila melanogaster for knockdown resistance to ethanol fumes and for rates of response to selection for further resistance.</a> Evolution. 39 (2), 278-293 (1985).</li>
<li>Scholz, H., Franz, M., Heberlein, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+hangover+gene+defines+a+stress+pathway+required+for+ethanol+tolerance+development%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">The hangover gene defines a stress pathway required for ethanol tolerance development.</a> Nature. 436 (7052), 845-847 (2005).</li>
<li>Morozova, T. V., Anholt, R. R. H., Mackay, T. F. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Phenotypic+and+transcriptional+response+to+selection+for+alcohol+sensitivity+in+Drosophila+melanogaster%5BTitle%5D)+AND+%22Genome+Biology%22%5BJournal%5D)">Phenotypic and transcriptional response to selection for alcohol sensitivity in Drosophila melanogaster.</a> Genome Biology. 8 (10), 231(2007).</li>
<li>Morozova, T. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Alcohol+sensitivity+in+Drosophila%3A+Translational+potential+of+systems+genetics%5BTitle%5D)+AND+%22Genetics%22%5BJournal%5D)">Alcohol sensitivity in Drosophila: Translational potential of systems genetics.</a> Genetics. 83, 733-745 (2009).</li>
<li>Bhandari, P., Kendler, K. S., Bettinger, J. C., Davies, A. G., Grotewiel, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+assay+for+evoked+locomotor+behavior+in+Drosophila+reveals+a+role+for+integrins+in+ethanol+sensitivity+and+rapid+ethanol+tolerance%5BTitle%5D)+AND+%22Alcoholism%3A+Clinical+and+Experimental+Research%22%5BJournal%5D)">An assay for evoked locomotor behavior in Drosophila reveals a role for integrins in ethanol sensitivity and rapid ethanol tolerance.</a> Alcoholism: Clinical and Experimental Research. 33 (10), 1794-1805 (2009).</li>
<li>Sandhu, S., Kollah, A. P., Lewellyn, L., Chan, R. F., Grotewiel, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+inexpensive%2C+scalable+behavioral+assay+for+measuring+ethanol+sedation+sensitivity+and+rapid+tolerance+in+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">An inexpensive, scalable behavioral assay for measuring ethanol sedation sensitivity and rapid tolerance in Drosophila.</a> Journal of Visualized Experiments. (98), e52676(2015).</li>
<li>Urizar, N. L., Yang, Z., Edenberg, H. J., Davis, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Drosophila+homer+is+required+in+a+small+set+of+neurons+including+the+ellipsoid+body+for+normal+ethanol+sensitivity+and+tolerance%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Drosophila homer is required in a small set of neurons including the ellipsoid body for normal ethanol sensitivity and tolerance.</a> The Journal of Neuroscience. 27 (17), 4541-4551 (2007).</li>
<li>Wolf, F. W., Rodan, A. R., Tsai, L. T., Heberlein, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High-resolution+analysis+of+ethanol-induced+locomotor+stimulation+in+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">High-resolution analysis of ethanol-induced locomotor stimulation in Drosophila.</a> The Journal of Neuroscience. 22 (24), 11035-11044 (2002).</li>
<li>Cohan, F. M., Hoffmann, A. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetic+divergence+under+uniform+selection.+II.+Different+responses+to+selection+for+knockdown+resistance+to+ethanol+among+Drosophila+melanogaster+populations+and+their+replicate+lines%5BTitle%5D)+AND+%22Genetics%22%5BJournal%5D)">Genetic divergence under uniform selection. II. Different responses to selection for knockdown resistance to ethanol among Drosophila melanogaster populations and their replicate lines.</a> Genetics. 114 (1), 145-164 (1986).</li>
<li>Pohl, J. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Circadian+genes+differentially+affect+tolerance+to+ethanol+in+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22Alcoholism%3A+Clinical+and+Experimental+Research%22%5BJournal%5D)">Circadian genes differentially affect tolerance to ethanol in Drosophila.</a> Alcoholism: Clinical and Experimental Research. 37 (11), 1862-1871 (2013).</li>
<li>Huang, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Epistasis+dominates+the+genetic+architecture+of+Drosophila+quantitative+traits%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences+of+the+United+States+of+America%22%5BJournal%5D)">Epistasis dominates the genetic architecture of Drosophila quantitative traits.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 109, 15553-15559 (2012).</li>
<li>Ehrenreich, I. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dissection+of+genetically+complex+traits+with+extremely+large+pools+of+yeast+segregants%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Dissection of genetically complex traits with extremely large pools of yeast segregants.</a> Nature. 464 (7291), 1039-1042 (2010).</li>
<li>Anholt, R. R. H., Mackay, T. F. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+road+less+traveled%3A+From+genotype+to+phenotype+in+flies+and+humans%5BTitle%5D)+AND+%22Mammalian+Genome%22%5BJournal%5D)">The road less traveled: From genotype to phenotype in flies and humans.</a> Mammalian Genome. 29, 5-23 (2018).</li>
</ol>

作者无任何利益冲突需要披露。

本文介绍一种简单、低成本且高通量的方法，用于评估乙醇暴露下黑腹果蝇（Drosophila melanogaster）的镇静时间。与许多需要群体分析的现有方法不同，该检测方法可在8小时工作时间内由单人完成约2000只果蝇的个体镇静时间数据采集。我们发现，单人约5分钟内可记录48只果蝇的镇静时间。以此速度，2000只果蝇的记录耗时约4小时，尽管数据记录也可在后续进行。在本检测中，大多数果蝇暴露于1 mL 100%乙醇时，记录到的镇静时间范围为5–15分钟。若使用较低浓度的乙醇或较小的给药体积，则会导致更长的镇静时间。
目前评估镇静时间的方法需要测试大量果蝇，难以对单个个体进行测量15,16,17,18,19,20,21,22,23,24,25,26。许多现有的镇静和敏感性检测依赖于ST5022,23,24，即50%的果蝇因乙醇暴露而进入镇静状态的时间点。尽管获得群体果蝇的ST50值并非本检测方法开发的主要目的，但视频记录相比现有方法具有更高的应用价值，因为这些记录可用于确定经 individually tested 果蝇群体的ST50值，并可测量在任意时间点满足特定标准（例如姿势控制丧失）的果蝇百分比。需要注意的是，此类视频分析将需要额外的时间。
与现有的醉酒测定法不同，我们所描述的方法无需使用特殊设备，可利用常见材料在任何实验室中进行。采用该方法，我们已获得果蝇个体可靠的、一致的镇静时间数据。原则上，该检测方法可扩展用于评估暴露于任何挥发性物质的影响。该检测还可用于测量挥发性物质对其他昆虫（包括其他蝇类物种）的急性毒性效应。个体镇静时间数据可用于评估群体内表型变异的程度，例如DGRP群体中的变异情况。
我们使用小昆虫筛网来防止果蝇与乙醇溶液直接接触，同时允许足量的乙醇蒸气到达果蝇。筛网顶部覆盖的一层白色纱布可增强果蝇与下方表面之间的视觉对比度，并确保果蝇不会卡在筛网中，从而避免对姿势控制丧失的判断产生歧义。市面上可获得的对水和空气具有通透性的膜材料在实验中结果不一致，且对乙醇蒸气的通透性不足。我们特意选用小昆虫筛网，因为这是一种孔隙均匀的材料，能够最大限度减少果蝇在孔板中位置不同所导致的乙醇暴露差异。可根据可用材料对该方案进行修改，但我们建议使用可控的行为实验舱，使果蝇能够接触到浓度为90%–100%的乙醇，并确保乙醇暴露的均匀性。
在重复实验之间，应随机化果蝇在细胞培养板中的位置，以避免位置偏差。对于需要在多天内进行且因此可能受到可能影响实验结果的环境变化（例如大气压力变化）27影响的较大规模实验，我们强烈建议每天在同一时间测试果蝇，并在每天内部及不同天之间均进行随机化处理，尤其是在需要相互比较不同品系和/或性别的果蝇时。
我们开发的方法最适合用于测量急性酒精暴露的影响，但不适用于获取饮酒数据或建立成瘾模型。然而，通过该实验获得的酒精镇静敏感性数据可以与其他酒精相关表型的测量指标相结合。该系统的局限性之一是，标准细胞培养板的垂直高度允许果蝇进行垂直移动，而这种移动无法通过视频追踪进行详细评估整体活动或运动能力。不过，这一局限性并不影响对镇静时间的准确评估。当使用不同基因型的果蝇（例如来自DGRP的异交群体28）时，该实验还可实现对单个果蝇的回收，从而收集具有相反表型的果蝇群体，用于批量DNA测序和极端QTL定位29,30。总体而言，该实验方法能够快速、低成本地获取大量单只果蝇的酒精镇静数据。

美国国家酒精滥用与酒精中毒研究所报告称，2015年，约有1600万美国人受到过量饮酒的影响，这种情况被定义为&#34;酒精使用障碍&#34;。酗酒会导致广泛的不良生理效应，是美国主要的死亡原因之一。在人类中，对酒精的敏感性降低，即对酒精的低反应水平，具有显著的遗传成分，并与发生酒精使用障碍的风险升高相关1,2,3,4。由于人群混合、不同的发育历史和环境暴露，以及依赖自我报告的问卷来量化酒精相关表型（这些表型常与其他神经精神疾病相互混淆），在人类群体中开展遗传风险研究具有挑战性。
Drosophila melanogaster 是研究酒精敏感性遗传基础的优良模型5,6,7,8。利用 Drosophila 模型可严格控制遗传背景，并能在严格控制的环境条件下，以相对较低的成本快速培育出数量几乎不受限制的同基因型个体，且无需受到伦理监管限制。除了公共数据库中已有的大量基因突变体和靶向基因组中大多数基因的RNAi品系外，Drosophila melanogaster 遗传参考面板（DGRP）——由205个具有完整基因组序列的近交野生来源品系组成的群体——的建立，使得全基因组关联研究成为可能9,10。此类研究已鉴定出与发育期乙醇暴露所导致的发育时间和存活力变化相关的遗传网络11,12。由于基本生物学过程在进化上的保守性，可通过将人类直系同源基因映射到果蝇中的对应基因，从而进行跨物种的推论。
暴露于乙醇的果蝇会经历生理和行为上的变化，这些变化类似于人类的酒精中毒，包括姿势控制能力丧失8、镇静以及耐受性的形成13,14,15。在黑腹果蝇（Drosophila）中，酒精诱导的镇静效应可通过醉酒计（inebriometer）进行定量分析。醉酒计是一种长122 cm的垂直玻璃柱，内部设有倾斜的网状隔板，果蝇可附着其上16,17,18。将至少50只果蝇（可分别分析不同性别）从柱顶引入，并使其暴露于乙醇蒸气中。失去姿势控制的果蝇会沿柱下落，并以每分钟为间隔被收集。平均洗脱时间可作为酒精中毒敏感性的衡量指标。当果蝇在首次暴露后恢复，再次接触酒精时，可表现出耐受性的形成，表现为平均洗脱时间发生改变13,15,19,20。尽管醉酒计检测已帮助识别出与酒精镇静敏感性及耐受性形成相关的基因、基因调控网络和细胞通路12,13,14,21，但该检测方法耗时较长、通量低，且无法有效测量单只果蝇的酒精敏感性。
无需复杂醉酒测定仪装置的替代性乙醇镇静检测方法虽可实现更便捷的测量，但在通量方面仍有限制，通常仍需对果蝇群体而非个体进行分析21,22,23,24,25。对单只果蝇进行评估可最大限度地减少因群体间相互作用（例如源于社会行为的影响）带来的混杂效应。本文介绍一种简单、低成本、高通量的检测方法，可用于大规模评估单只果蝇对酒精镇静的敏感性。

<table><tbody><tr><td>24孔细胞培养板</td><td>Corning</td><td>3526</td><td>平底；用于在整个实验过程中饲养果蝇</td></tr><tr><td>吸虫器</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>纱布</td><td>Genesee Scientific</td><td>53-100</td><td>广泛可得</td></tr><tr><td>乙醇</td><td>Decon Labs</td><td>V1001</td><td>广泛可得</td></tr><tr><td>柔性塑料切菜板（板盖）</td><td>Walmart</td><td>550098612</td><td>任何可轻松滑动并完全覆盖24孔板的平底塑料板均可使用。柔性塑料切菜板效果良好</td></tr><tr><td>纱布（用于吸虫器）</td><td>Honeywell North</td><td>67622</td><td>广泛可得</td></tr><tr><td>照明垫</td><td>Amazon (AGPtek)</td><td>ASIN B00YA9GP0G</td><td>任何可提供对比度的光源垫均可使用</td></tr><tr><td>加大号手工冰棒棍</td><td>Michaels</td><td>10334892</td><td>任何长度不小于7 cm的手工冰棒棍均可使用</td></tr><tr><td>P1000移液器吸头（用于吸虫器）</td><td>Genesee Scientific</td><td>24-165RL</td><td>任何P1000移液器吸头均可使用</td></tr><tr><td>血清移液管（用于吸虫器）</td><td>Genesee Scientific</td><td>12-104</td><td></td></tr><tr><td>细孔昆虫筛网</td><td>Lowe's (Saint-Gobain ADFORS)</td><td>89322</td><td>任何细孔昆虫筛网均可使用</td></tr><tr><td>测试室</td><td></td><td></td><td>内部空间需足够大以容纳光源垫。可用聚苯乙烯盒构建</td></tr><tr><td>Tygon软管（用于吸虫器）</td><td>Grainger</td><td>9CUG7</td><td>广泛可得</td></tr><tr><td>摄像机</td><td>Canon</td><td>1959C001AA</td><td>任何摄像机均可使用</td></tr></tbody></table>

高通量测定个体酒精镇静时间的方法 黑腹果蝇

High-Throughput Method for Measuring Alcohol Sedation Time of Individual Drosophila melanogaster

Drosophila melanogaster 是研究酒精敏感性遗传基础的优良模型。与人类群体研究相比，Drosophila 模型能够严格控制遗传背景，并可在良好控制的环境条件下快速培育出数量几乎不受限制的同基因型个体，且无需遵守伦理监管限制，成本相对较低。果蝇在接触乙醇后会出现生理和行为上的改变，类似于人类的酒精中毒表现，包括姿势控制能力丧失、镇静以及耐受性的形成。本文介绍一种简单、低成本、高通量的检测方法，可用于评估大量单只果蝇对酒精镇静的敏感性。该方法基于视频记录，将未麻醉的单只果蝇放入24孔细胞培养板中，在可同步启动酒精暴露的装置内进行观察。该系统使单人在8小时工作时间内可获得多达2,000只果蝇的个体乙醇镇静数据。原则上，该检测方法可扩展用于评估任何挥发性物质暴露的影响，并可用于测量挥发性物质对其他昆虫（包括其他蝇类物种）的急性毒性效应。

两个24孔微孔板可在短短10分钟内同时获取48只果蝇的个体数据。 表1 列出两个DGRP品系果蝇在酒精暴露下对发育时间和存活力具有不同敏感性的48只个体果蝇（雌雄分别）的乙醇镇静时间测量值13. RAL_555品系的果蝇比RAL_177品系的果蝇敏感性更低（图4, 表 2；p &lt; 0.0001，ANOVA）。RAL_177 的雄性和雌性未表现出性别二态性效应（图4, 表 2；p &gt; 0.1，ANOVA），而RAL_555品系的雌性对乙醇暴露的敏感性低于雄性（图4, 表2；p &lt; 0.006，ANOVA）。可同时测量大量果蝇，并能同步测量不同性别和不同品系，从而减少环境变异带来的误差，提高实验准确性。
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1">
	<tbody>
		<tr>
			<td>A.</td>
			<td colspan="6">乙醇镇静时间 (s)</td>
			<td>B.</td>
			<td colspan="6">乙醇镇静时间 (s)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td></td>
			<td colspan="3">雌性</td>
			<td colspan="3">雄性</td>
			<td></td>
			<td colspan="3">雌性</td>
			<td colspan="3">雄性</td>
		</tr>
		<tr>
			<td></td>
			<td>414</td>
			<td>365</td>
			<td>477</td>
			<td>423</td>
			<td>568</td>
			<td>309</td>
			<td></td>
			<td>937</td>
			<td>742</td>
			<td>622</td>
			<td>460</td>
			<td>331</td>
			<td>498</td>
		</tr>
		<tr>
			<td></td>
			<td>201</td>
			<td>384</td>
			<td>498</td>
			<td>411</td>
			<td>523</td>
			<td>626</td>
			<td></td>
			<td>791</td>
			<td>619</td>
			<td>197</td>
			<td>467</td>
			<td>455</td>
			<td>562</td>
		</tr>
		<tr>
			<td></td>
			<td>228</td>
			<td>364</td>
			<td>333</td>
			<td>440</td>
			<td>403</td>
			<td>267</td>
			<td></td>
			<td>504</td>
			<td>744</td>
			<td>513</td>
			<td>570</td>
			<td>582</td>
			<td>506</td>
		</tr>
		<tr>
			<td></td>
			<td>440</td>
			<td>416</td>
			<td>404</td>
			<td>408</td>
			<td>422</td>
			<td>384</td>
			<td></td>
			<td>970</td>
			<td>540</td>
			<td>369</td>
			<td>865</td>
			<td>533</td>
			<td>492</td>
		</tr>
		<tr>
			<td></td>
			<td>888</td>
			<td>283</td>
			<td>285</td>
			<td>322</td>
			<td>369</td>
			<td>287</td>
			<td></td>
			<td>595</td>
			<td>550</td>
			<td>606</td>
			<td>392</td>
			<td>544</td>
			<td>345</td>
		</tr>
		<tr>
			<td></td>
			<td>1079</td>
			<td>519</td>
			<td>315</td>
			<td>393</td>
			<td>376</td>
			<td>284</td>
			<td></td>
			<td>418</td>
			<td>709</td>
			<td>553</td>
			<td>308</td>
			<td>477</td>
			<td>388</td>
		</tr>
		<tr>
			<td></td>
			<td>718</td>
			<td>287</td>
			<td>432</td>
			<td>275</td>
			<td>206</td>
			<td>411</td>
			<td></td>
			<td>366</td>
			<td>564</td>
			<td>558</td>
			<td>385</td>
			<td>576</td>
			<td>377</td>
		</tr>
		<tr>
			<td></td>
			<td>598</td>
			<td>337</td>
			<td>398</td>
			<td>279</td>
			<td>631</td>
			<td>372</td>
			<td></td>
			<td>437</td>
			<td>692</td>
			<td>578</td>
			<td>460</td>
			<td>511</td>
			<td>412</td>
		</tr>
		<tr>
			<td></td>
			<td>241</td>
			<td>398</td>
			<td>364</td>
			<td>347</td>
			<td>374</td>
			<td>808</td>
			<td></td>
			<td>665</td>
			<td>729</td>
			<td>484</td>
			<td>532</td>
			<td>425</td>
			<td>354</td>
		</tr>
		<tr>
			<td></td>
			<td>229</td>
			<td>423</td>
			<td>534</td>
			<td>386</td>
			<td>396</td>
			<td>628</td>
			<td></td>
			<td>312</td>
			<td>576</td>
			<td>305</td>
			<td>334</td>
			<td>531</td>
			<td>506</td>
		</tr>
		<tr>
			<td></td>
			<td>388</td>
			<td>488</td>
			<td>451</td>
			<td>523</td>
			<td>322</td>
			<td>533</td>
			<td></td>
			<td>682</td>
			<td>638</td>
			<td>420</td>
			<td>560</td>
			<td>548</td>
			<td>379</td>
		</tr>
		<tr>
			<td></td>
			<td>252</td>
			<td>529</td>
			<td>375</td>
			<td>427</td>
			<td>330</td>
			<td>540</td>
			<td></td>
			<td>1045</td>
			<td>741</td>
			<td>708</td>
			<td>832</td>
			<td>509</td>
			<td>472</td>
		</tr>
		<tr>
			<td></td>
			<td>674</td>
			<td>401</td>
			<td>303</td>
			<td>401</td>
			<td>307</td>
			<td>311</td>
			<td></td>
			<td>394</td>
			<td>675</td>
			<td>381</td>
			<td>477</td>
			<td>449</td>
			<td>784</td>
		</tr>
		<tr>
			<td></td>
			<td>303</td>
			<td>453</td>
			<td>351</td>
			<td>429</td>
			<td>525</td>
			<td>262</td>
			<td></td>
			<td>540</td>
			<td>690</td>
			<td>520</td>
			<td>556</td>
			<td>495</td>
			<td>226</td>
		</tr>
		<tr>
			<td></td>
			<td>258</td>
			<td>483</td>
			<td>302</td>
			<td>389</td>
			<td>562</td>
			<td>319</td>
			<td></td>
			<td>356</td>
			<td>615</td>
			<td>336</td>
			<td>454</td>
			<td>524</td>
			<td>590</td>
		</tr>
		<tr>
			<td></td>
			<td>346</td>
			<td>426</td>
			<td>385</td>
			<td>416</td>
			<td>596</td>
			<td>287</td>
			<td></td>
			<td>626</td>
			<td>678</td>
			<td>840</td>
			<td>634</td>
			<td>677</td>
			<td>509</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>
表1：乙醇镇静时间的测量结果 (s) 个体果蝇的 (A) DGRP品系RAL_177和 (B) RAL_555 用于性别分离 (n = 48). 参见 表 2, 图4.
<img alt="按性别显示 RAL_177 和 RAL_555 果蝇基因敲降时间的柱状图。" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/61108/61108fig4.jpg" data-altupdatedat="1788250015000" data-alt="Figure 4"> 
图 4：DGRP 品系 RAL_177 和 RAL_555 果蝇的酒精麻醉时间。 柱状图表示均值，误差线表示标准误（SEM，n = 48）。RAL_177 果蝇的麻醉时间短于 RAL_555 果蝇（p &lt; 0.0001，ANOVA）。个体数据点见表 1。性别与品系之间的其他具有统计学意义的差异在正文及表 2中注明。<a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/61108/61108fig4large.jpg" target="_blank">请点击此处查看该图的放大版本。</a>
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1">
	<tbody>
		<tr>
			<td>分析</td>
			<td>变异来源</td>
			<td>df</td>
			<td>SS</td>
			<td>F-值</td>
			<td>P-值</td>
		</tr>
		<tr>
			<td rowspan="4">全模型合并</td>
			<td>品系</td>
			<td>1</td>
			<td>769627</td>
			<td>34.869</td>
			<td>&lt;0.0001</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>性别</td>
			<td>1</td>
			<td>105001</td>
			<td>4.757</td>
			<td>0.0304</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>品系 × 性别</td>
			<td>1</td>
			<td>86021</td>
			<td>3.897</td>
			<td>0.0498</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>误差</td>
			<td>188</td>
			<td>4149491</td>
			<td colspan="2"></td>
		</tr>
		<tr>
			<td rowspan="2">简化模型（雌性）</td>
			<td>品系</td>
			<td>1</td>
			<td>685126</td>
			<td>23.58</td>
			<td>&lt;0.0001</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>误差</td>
			<td>94</td>
			<td>2730718</td>
			<td colspan="2"></td>
		</tr>
		<tr>
			<td rowspan="2">简化模型（雄性）</td>
			<td>品系</td>
			<td>1</td>
			<td>170522</td>
			<td>11.3</td>
			<td>0.0011</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>误差</td>
			<td>94</td>
			<td>1418774</td>
			<td colspan="2"></td>
		</tr>
		<tr>
			<td rowspan="2">简化模型 RAL_177</td>
			<td>性别</td>
			<td>1</td>
			<td>473</td>
			<td>0.023</td>
			<td>0.8800</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>误差</td>
			<td>94</td>
			<td>1943741</td>
			<td colspan="2"></td>
		</tr>
		<tr>
			<td rowspan="2">简化模型 RAL_555</td>
			<td>性别</td>
			<td>1</td>
			<td>190549</td>
			<td>8.12</td>
			<td>0.0054</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>误差</td>
			<td>94</td>
			<td>2205751</td>
			<td colspan="2"></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>
表2：不同性别和DGRP品系间镇静时间的方差分析。 采用的模型为 Y = µ + L + S + LxS + ε，其中µ为总体均值，L为DGRP品系（RAL_177、RAL_555）的固定效应，S为性别（雄性、雌性）的固定效应，LxS为交互作用项（固定），ε为误差项。简化模型采用了Y = µ + L + ε和Y = µ + S + ε。在完整模型中，品系、性别以及品系×性别的交互作用项在α &lt; 0.05水平下均具有显著性。按性别和DGRP品系RAL_555划分的简化模型在α &lt; 0.01水平下也具有显著性。另见表1、图4。df = 自由度，SS = I型平方和。

目前测量黑腹果蝇（Drosophila）酒精敏感性的方法主要用于检测果蝇群体。本文介绍一种简单、低成本、高通量的检测方法，可用于评估大量单只果蝇的酒精镇静敏感性。该方法无需特殊设备，仅使用常规实验材料，可在任何实验室中实施。

黑腹果蝇是研究酒精敏感性遗传基础的优良模型。与人类研究相比……

果蝇是研究酒精敏感性遗传基础的优良模型，因为可以在受控的遗传背景和环境条件下精确量化酒精敏感性。目前测量果蝇酒精敏感性的方法通常针对果蝇群体进行检测。本文介绍一种简单、低成本、高通量的方法，可用于评估大量单只果蝇的酒精敏感性。果蝇对酒精敏感性的差异可转化为人类中类似的表型，因为果蝇约有75%的基因与人类直系同源基因相同。我们开发的检测方法也可用于测量挥发性物质对其他昆虫（包括其他蝇类或疾病传播媒介）的急性毒性效应。首先，制作一个24孔细胞培养板的纸板模板。沿培养板描出轮廓，并剪下指定区域。然后使用纸板模板制作一块与培养板大小相同的小型昆虫筛网。在24孔细胞培养板的边缘涂抹一圈热熔胶，将筛网粘附在孔的上方。然后使用热熔胶枪将木制冰棒棍固定在培养皿的三个侧边。准备的培养皿数量以能够放入拍摄室为宜。要制作拍摄室，需在聚苯乙烯盒的一侧切割出一个与摄像机镜头大小相同的孔，并在另一侧切割出一个与照明垫大小相匹配的狭缝。将照明垫插入狭缝中，并将相机放置在照明垫上方的镜头孔内。将所有测试材料置于受控环境中，理想情况下应为行为学实验箱，环境条件为相对湿度约30%、温度25摄氏度、气流均匀、噪声水平低于65分贝。使用先前制作的纸板模板裁剪两块纱布。然后用移液器将1毫升100%乙醇通过筛网转移至每个孔中。干燥筛网，并将两层纱布放在其上方。使用纸板模板作为参考，在短边一侧扩大1至2厘米，裁剪一块小的柔软塑料切菜板。切割后，确保塑料片仍能插入测试装置的三根木制压舌板之间，但一端悬空。按照文稿说明准备好吸液器，并用其将每只果蝇转移至24孔细胞培养板中的各个孔内，将已吸取果蝇的孔用柔性塑料片盖住。记录每只果蝇所在的孔位及其相关的基因型或表型信息。将柔软的塑料片与装有果蝇的细胞培养板顶部对齐，然后将该培养板倒置在装有乙醇的改良细胞培养板上。使用冰棒棍调整倒置的细胞培养板的位置，确保每个含有乙醇的孔与每个含有果蝇的孔准确对齐。确认照明垫已调至最大亮度，并开始用摄像机进行录制。通过小心移除两块培养板之间的塑料隔层，使果蝇暴露于乙醇环境中，注意不要碰松纱布。当怀疑所有果蝇均已失去姿势控制能力时，用力轻敲培养板中心。若观察到有活动，则继续记录，并每隔一到两分钟轻敲一次，直至无任何活动为止。当果蝇无任何活动时，终止记录。为回收果蝇，取下测试装置的顶板，用移液器将单只果蝇吸入选定的容器中。每小时至少更换一次改良细胞培养板中的乙醇，以在整个实验过程中维持稳定的乙醇暴露浓度，并根据需要重复实验多次。观看录像以确定果蝇的麻醉时间，该时间定义为果蝇失去姿势控制和运动能力的时刻。为确保准确性，应倒放录像，并记录果蝇开始移动的时间点。该方法可在10分钟内对大量果蝇生成数据。使用两块24孔板同时测量两种对酒精敏感性不同的DGRP品系共48只果蝇的乙醇镇静时间。较大的样本量可提高准确性，并减少环境变异带来的误差。RAL_555果蝇的敏感性低于RAL-177果蝇。RAL_177品系的雄性和雌性未表现出性二型效应，而RAL_555品系的雌性对乙醇暴露的敏感性低于雄性。在实施本方案时，必须精确完成果蝇的吸取和细胞培养板的翻转操作，以获得理想结果。由于该方法能够对单只果蝇进行评估，避免了群体相互作用带来的混杂效应，因此该检测方法提高了果蝇模型在酒精暴露急性效应高通量研究中的应用价值。

high-throughput-method-for-measuring-alcohol-sedation-time-individual

Research

科研

JoVE Journal

Behavior

行为

测量个体果蝇黑色素气器酒精镇分时间的高通量方法

本文描述了一种基于翻正反射消失来测量乙醇对Drosophila果蝇镇静作用的简单检测方法。...

一种测量果蝇乙醇敏感性的简便方法

果蝇酒精给药装置：FlyBar

本文介绍了一种用于量化受胁迫个体回避行为的实验方案。该范式具有强大功能且操作简便，可用于评估基因和环境对黑腹果蝇（Drosophila...

社会回避定量检测的简易实验方法 黑腹果蝇

测量乙醇敏感性与快速耐受性的简便实验方法 果蝇...

一种经济、可扩展的行为检测方法，用于测量乙醇镇静敏感性及快速耐受性 果蝇

我们描述了一种利用果蝇（Drosophila...

一种利用简易方法测量奖赏寻求行为变化的方式 黑腹果蝇

Flypub 检测法用于测量果蝇 Drosophila melanogaster...

研究乙醇诱导的行为去抑制与敏感化现象的 Flypub

微孔板喂食实验提供了一种经济、高通量的方法，用于定量果蝇（Drosophila）的液体食物摄入量。该方法使用一个3D打印装置，将饲养果蝇的96孔微孔板与另一个含有含示踪染料喂食溶液的1536孔微孔板连接。通过分光光度法测量溶液的体积减少量。...

一种用于定量摄食行为的高通量微孔板饲喂检测法 果蝇

介绍了一种高通量药物筛选方案，通过监测老年果蝇的睡眠行为来促进睡眠 果蝇...

利用高通量小分子药物筛选技术研究年龄相关性睡眠障碍 黑腹果蝇

本方案介绍了一种高通量、低成本的方法，通过量化果蝇运动功能障碍来评估其神经毒性，作为传统哺乳动物模型的替代方案。该方法旨在利用一种灵敏、可重复且符合伦理要求的模型，评估药物化合物、环境因子或基因修饰的神经毒性效应。...

Drosophila melanogaster 运动功能障碍的行为学分析作为神经毒性的检测指标

本方案提供了一个用于评估黑腹果蝇（Drosophila...

应激诱导的抑郁样状态的多模态行为表型分析 黑腹果蝇

了解用于测量单个果蝇酒精镇静敏感性的高通量方法。该技术采用24孔培养板和受控环境条件，可在10分钟内快速收集大量样本数据，为研究酒精敏感性的遗传基础提供可靠手段。

高通量测定个体酒精镇静时间的方法黑腹果蝇

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