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DOI: 10.3791/61228-v
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
压力性生活事件会损害认知功能,增加患精神疾病的风险。该协议说明了压力如何影响男性和女性Sprague Dawley大鼠的自动操作策略转移范式来影响认知灵活性。讨论了特定行为背后的特定大脑区域,并探讨了结果的转化相关性。
该协议将自动作和策略转移任务与灵活的压力范式集成在一起,使实验者能够有效地分析压力对认知的影响。这种技术的优势或其效率与认知任务的自动化及其灵活性,因为它可以与许多其他压力范式配对。这种方法提供了对压力和认知之间相互作用的洞察力。
它也可以扩展到评估其他变量,例如药物暴露对认知的影响。视觉演示可确保该技术的新手知道如何在运行受试者之前正确测试作室的功能,以避免任何故障。使用作室进行行为训练和测试。
确保腔室至少包含两个可伸缩杠杆,上方有两个刺激灯。用于加强这些任务的室内灯和分配器。确保控制杆位于中央加固输送区域的两侧,每个控制杆上方有一个刺激灯。
然后使用室内灯消除暗室,而不会干扰光刺激的检测。使用无尘食物颗粒加固食物受限的大鼠。确保颗粒的蔗糖或脂肪含量不高,使用能够作腔室的软件控制刺激的呈现、杠杆作和数据收集。
用新鲜的垫料填充每个作箱的底部托盘以收集废物。每次会议后,倾倒每个托盘,用酒精湿巾清洁并添加新的床上用品,然后再将新动物放入腔室。决定是否应该在作策略转换范式培训之前、期间或之后执行压力程序,并就作性训练每天同时执行压力程序。
在一个既不是蜂群室也不是策略转移范式室的单独房间里,将大鼠放在扫帚式透明约束管中并密封开口。注意不要夹住四肢或尾巴,根据可用的作腔数量错开受试者的压力程序。在将大鼠放入腔室之前,请确保分配器中有足够的食物颗粒,并且作箱正常工作。
为此,请在空腔室中加载并启动程序,然后手动测试正确的杠杆是否为每次按压杠杆提供一个奖励。在将大鼠放入盒子进行第一天训练之前,在每个腔室内加载训练程序时指定的正确杠杆上手动设置一个食物颗粒奖励。使用固定比例的时间表训练大鼠,以便每个正确的杠杆按下都会获得一次强化奖励。
每天在受试者或实验条件下平衡正确的杠杆。让大鼠按下控制杆,直到达到标准,按下正确的控制杆 50 次,通常需要 30 到 45 分钟。第二天,使用相同的程序强迫大鼠在对面的杠杆上执行此任务,并将对面的杠杆指定为正确的杠杆。
在测试当天,按照压力程序将大鼠置于作室中,并依次进行侧面识别、侧面反转和光识别任务。确保 Light Discrimination 任务仅照亮正确控制杆上方的灯光。对于侧面辨别任务,奖励大鼠在训练第三天确定的其最不喜欢的一侧按下杠杆。
无论灯提示如何,任务都会在连续按下正确的控制杆 8 次后结束。对于侧面反转测试,再次使用侧面判别程序,但将相反的杠杆指定为正确的杠杆。老鼠按下这个杠杆应该得到奖励,而不管灯光提示如何。
它必须连续按下控制杆八次才能结束任务。要执行光区分任务,奖励老鼠在上面照亮的灯光下按下控制杆。同样,在连续按下正确的控制杆 8 次后,每个作器测试即完成。
这种适应的自动作策略转换范式用于确定反复约束压力是否会影响雄性和雌性 Sprague Dawley 大鼠的认知。试验或标准数量的减少表明每项任务的表现更好。急性约束后,雄性完成侧反转任务的试验量明显少于无应激的对照雄性。
相反,压力大的女性需要更多的试验才能完成任务。此处显示的每个注意力任务所犯的错误总数与标准的试验次数一致。在侧反转任务中,压力大的雄性犯的错误明显少于对照组雄性。
而压力大的女性犯的错误更多。此外,在光辨别任务中,女性犯的错误也明显更多。在一些人中,这些数据表明,重复的压力可以提高男性的认知能力,但会损害女性的认知能力。
总误差进一步分为持续性错误或回归性错误。压力大的雄性在侧反转任务中犯的坚持性错误比对照组雄性少。虽然压力大的雌性在侧反转和光区分任务中都比对照组雌性犯了更多的持续性错误。
检查侧反转任务背后的大脑区域,以确定它们在神经活动中是否表现出相似的性别差异。与对照组相比,应激诱导雄性眶额叶皮层神经元激活显著增加。然而,在女性中观察到的情况恰恰相反。
在尝试此协议时,请注意哪个主题在策略转移范式的哪个任务中。完成该任务后,手动确保它以正确的设置移动到下一个任务。除了这个程序,实验者还可以对约束的效果进行其他行为研究,或者直接进行灌注和免疫化学技术,以确定哪些大脑区域在策略转变中很重要。
除了提高范式的效率和吞吐量外,该技术还允许我们将受试者所犯的错误类型区分为持续性、回归性和随机性错误。
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