Name: 测量一组啮齿动物脑样本中的中风后脑水肿、梗塞区和血脑屏障破裂 (视频) | JoVE Journal
Uploaded: 2020-10-23T13:30:00.000+00:00
Duration: 4 min 32 s
Description: 学习改良型大脑中动脉闭塞技术，用于在啮齿动物脑样本中同时测量脑梗死区、脑水肿及血脑屏障通透性。该方法仅需单一脑样本即可完成三项关键指标评估，显著提高伦理与经济效益，助力全面研究缺血性脑卒中的病理生理学机制。

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

感谢乌克兰第聂伯罗彼得罗夫斯克市奥列斯·冈查尔第聂伯罗国立大学生物、生态与医学系生理学教研室的 Maryna Kuscheriava、Maksym Kryvonosov、Daryna Yakumenko 和 Evgenia Goncharyk 在讨论中提供的支持与有益贡献。所获得的数据属于 Ruslan Kuts 博士论文的一部分。

以下实验均按照《赫尔辛基宣言》《东京指南》以及欧洲共同体《实验动物使用指南》的建议进行。本研究亦获得内盖夫本-古里安大学动物护理委员会的批准。
1. 实验前大鼠的准备
<ol>
	<li>选取无明显病理特征的成年雄性Sprague-Dawley大鼠，每只体重在300至350 g之间。</li>
	<li>实验前将所有大鼠饲养在22 °C室温下，保持12小时光照与12小时黑暗的循环环境。</li>
	<li>确保食物和水自由获取。</li>
	<li>所有操作均在上午6:00至下午2:00之间进行。</li>
</ol>
2. 手术前大鼠的准备
<ol>
	<li>用异氟烷（诱导浓度4%，维持浓度2%）和24%氧气（1.5 L/min）对大鼠进行30分钟麻醉。
	<ol>
		<li>通过检查大鼠是否存在足底回缩反射来测试其麻醉深度。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>将24号导管插入大鼠尾静脉。 
	注意：不进行尾部加温以促进血管扩张。
	<ol>
		<li>将大鼠仰卧位放置于操作台上，使用医用胶带固定其四肢。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>手术前将测温探头插入大鼠直肠。</li>
	<li>操作过程中，使用加热板维持大鼠核心体温在37 °C。</li>
	<li>在大鼠双眼涂抹眼膏以作保护。</li>
	<li>剃除手术区域毛发，并使用10%聚维酮碘溶液消毒三次，随后使用70%异丙醇消毒。</li>
</ol>
3. 右侧大脑中动脉阻塞
注意：MCAO 采用改良技术进行，如先前所述16,22,23，并使用 McGarry 等人24 和 Uluç 等人25 描述的器械。
<ol>
	<li>使用手术镊和弯头手术剪沿颈部腹侧中线解剖皮肤和浅筋膜。</li>
	<li>辨认由颈内动脉（ICA）、颈外动脉（ECA）和颈总动脉（CCA）构成的肌三角区域。</li>
	<li>使用血管外科用显微镊小心地将右侧颈总动脉（CCA）和颈内动脉（ICA）与迷走神经分离。</li>
	<li>暴露右侧颈总动脉（CCA）和颈内动脉（ICA）。使用微型夹或血管外科专用止血带阻断从颈总动脉（CCA）流向颈内动脉（ICA）的血流。使用血管外科用显微剪在颈内动脉（ICA）上做一约1 mm的切口。</li>
	<li>将单丝尼龙导管（4-0）直接经颈内动脉（ICA）插入，从右侧颈总动脉分叉处起约18.5–19 mm，直至大脑前交通动脉环（circle of Willis），插入至遇到轻微阻力为止，以阻塞大脑中动脉（MCA）26。</li>
	<li>在颈总动脉分叉点上方对颈内动脉（ICA）进行结扎。</li>
	<li>对于假手术对照组，插入尼龙线，但不执行步骤3.5和3.616,22。</li>
	<li>通过腹腔注射给予0.9%氯化钠溶液5 mL。</li>
	<li>缝合切口，并将大鼠转移至恢复区域。 
	注意：麻醉结束后数分钟，大鼠将苏醒并在笼内自主活动。</li>
	<li>在大脑中动脉闭塞（MCAO）后23小时，通过套管27经尾静脉向两组手术大鼠注射生理盐水中2%伊文思蓝溶液（4 mL/kg）23,26。 
	注意：该染料用于示踪血脑屏障通透性。允许循环60分钟。</li>
</ol>
4. 梗死区域的确定
<ol>
	<li>按照先前描述的方法9,15,18,19,26，在MCAO术后24小时测量梗死体积（IZ）。 
	注意：体重减轻超过20%、出现癫痫发作或偏瘫的大鼠将被排除在实验之外。</li>
	<li>通过将吸入气体混合物替换为20%氧气和80%二氧化碳，直至大鼠自主呼吸停止，以实施安乐死。</li>
	<li>使用剪刀和外科镊子，在肋弓下方通过腹壁做5-6 cm的侧向切口，打开胸腔。</li>
	<li>使用剪刀和外科镊子，沿整个肋弓长度进行横膈膜切开。</li>
	<li>小心移开肺组织，用剪刀沿左右两侧从肋弓剪至锁骨处28。</li>
	<li>通过心脏左心室灌注200 mL生理盐水。</li>
	<li>用剪刀穿刺或切开心脏右心房。</li>
	<li>使用断头器进行断头，并收集脑组织。</li>
	<li>使用虹膜剪，从枕骨大孔开始，沿后颅骨表面两侧向远端边缘剪开。</li>
	<li>将嗅球、颅骨腹侧和背侧的神经连接与脑组织分离。</li>
	<li>将脑组织从头颅中取出。</li>
	<li>使用厚度为0.009英寸的未涂层单刃不锈钢剃须刀片，制作2 mm厚的水平切片，共获得6个脑切片。</li>
	<li>在0.05% TTC溶液中37 °C孵育30分钟。</li>
	<li>将脑组织置于显微镜载玻片上，以1600×1600 dpi的分辨率对这6个脑切片进行光学扫描（示例见补充材料1）。</li>
	<li>使用图像编辑软件（如Adobe Photoshop CS2）的通道混合器功能（图像 &gt; 调整 &gt; 通道混合器）添加蓝色滤镜，并将图像保存为JPEG格式。 
	注意：应用蓝色滤镜后，图像将呈现为灰度图像。</li>
	<li>在ImageJ 1.37v29,30中打开已保存的图像。 
	注意：该计算机程序使用阈值函数来分离并计算黑色或白色像素的数量（见图1）。</li>
	<li>对图像中每个脑切片的左右半球（右侧为损伤同侧，左侧为未损伤对侧），使用主菜单中的“多边形选区”工具分别选择并保存为独立的图像文件。</li>
	<li>在ImageJ软件主菜单中选择图像 &gt; 调整 &gt; 阈值，使用自动阈值功能设定阈值，测量单个脑切片每侧半球的像素数量。 
	注意：此步骤可在ImageJ中使用宏命令完成（代码见补充材料2）。阈值是决定将哪些像素转换为白色、哪些转换为黑色的关键参数，取决于灰度深浅（示例见补充材料3和补充材料4）。ImageJ随后通过比较白色与黑色像素来确定梗死体积。根据染色方案和扫描仪设置，我们采用0.220的固定阈值。</li>
	<li>采用同侧与对侧大脑半球比值法（RICH法）13,23校正组织肿胀对梗死体积（IZ）的测量（示例见补充材料5）。 
	<img alt="校正后的梗死体积计算公式；神经学研究中的公式；半球大小比值。" src="/files/ftp_upload/61309/61309equ01.jpg" data-altupdatedat="1788250015000" data-alt="公式1"> 
	注意：梗死体积以对侧半球体积的百分比表示。</li>
</ol>
5. 脑水肿的测定31
注意：使用 ImageJ 1.37v 测量 BE32,33。
<ol>
	<li>在大脑中动脉阻塞（MCAO）后 24 小时测量脑水肿（BE）。计算 BE 时，使用左右半球体积（以单位计）的数据。</li>
	<li>以 1600×1600 dpi 的分辨率进行光学扫描（示例见补充资料 1）。</li>
	<li>选择脑半球，并按照上文第 4.17–4.19 节所述，使用 ImageJ 1.37v 设置用于确定 BE 的阈值。</li>
	<li>将 BE 面积表示为未受累对侧半球标准面积的百分比，采用 RICH 方法并通过以下公式计算（示例见补充资料 5）23,34。 
	<img alt="脑水肿程度公式，脑半球体积比，数学表达式" src="/files/ftp_upload/61309/61309equ02v2.jpg" data-altupdatedat="1788250015000" data-alt="Equation 2"> 
	注：脑水肿（BE）程度以对侧半球的百分比表示。</li>
</ol>
6. 血脑屏障破坏的测定
<ol>
	<li>在大脑中动脉闭塞（MCAO）后24小时检测血脑屏障（BBB）的破坏情况。</li>
	<li>将右侧和左侧半脑各分为六个切片，每个切片放入一个微量离心管中。</li>
	<li>根据每1 g脑组织加入4 mL 50%三氯乙酸的计算比例，用三氯乙酸对每一片脑组织进行匀浆处理。</li>
	<li>以10,000 × g 离心20分钟。</li>
	<li>用96%乙醇将上清液按1:3比例稀释。</li>
	<li>使用分光光度计软件，安装样品板，并按照以下参数进行样品检测：荧光强度激发波长620 nm（带宽10 nm），发射波长680 nm（带宽10 nm）23,35；顶部模式；检测次数25；手动模式100；振荡1秒，振幅1 mm。 
	注意：使用激发波长620 nm（带宽10 nm）和发射波长680 nm（带宽10 nm）进行检测。23,35</li>
</ol>

作者无任何利益冲突需要披露。

本实验方案的主要目标是展示对缺血性损伤三个主要参数——梗死区（IZ）、脑水肿（BE）和血脑屏障（BBB）通透性——进行一致测量的方法。该领域先前的研究已证明可在同一样本中同时检测其中一至两个参数。除了该三联方法可降低实验成本外，它还提供了一种更符合生物伦理的模型，减少了需要手术并随后实施安乐死的动物数量。与所有组织学技术一样，该方法的局限性在于无法动态观察缺血性损伤过程。
图像分析中使用了四个计算机程序：ImageJ 1.37v、Adobe Photoshop CS2、&#160;Microsoft Excel 365 和 IBM SPSS Statistics 22。ImageJ 用于测量梗死区域的范围和脑水肿程度。Adobe Photoshop 用于消除伊文思蓝对脑组织的影响，因为蓝色表明血脑屏障（BBB）破坏。在计算梗死区域之前，必须从图像中去除蓝色，否则会影响梗死区域测量的准确性（见图1B、1D、1F）。Excel 和 SPSS 用于数据处理。
<p class="jove...

全球范围内，卒中是导致发病和死亡的最常见原因之一。其中，缺血性卒中占全球所有卒中病例的68%，而在美国，缺血性卒中占卒中病例的87%1,2据估计，脑卒中给美国带来的经济负担高达340亿美元。2 以及 &#8364;450亿（欧盟）3. 研究脑卒中的病理生理机制、开发新的评估方法并提出新的治疗方案，需要借助卒中动物模型4.
缺血性脑卒中通常由大脑主要动脉闭塞引起，最常见的是大脑中动脉或其分支的闭塞5。因此，缺血性脑卒中的动物模型历史上多采用大脑中动脉闭塞（MCAO）的方法6,7,8,9,10,11,12。在MCAO后，神经功能损伤通常通过以下三种方式评估：采用2,3,5-三苯基氯化四氮唑（TTC）染色法测定梗死区域（IZ）13，通过干燥法或计算半球体积来评估脑水肿（BE）14,15,16，以及利用伊文思蓝染色结合分光光度法检测血脑屏障（BBB）通透性17,18,19。
传统的MCAO方法对每项脑部测量均使用不同的脑组织样本。当样本量较大时，这会导致大量实验动物被实施安乐死，从而带来额外的伦理和经济负担。一种可减轻这些成本的替代方法是在同一组MCAO后啮齿类动物脑组织中同时测量全部三项参数。
既往已有尝试在同一脑样本中联合测量多个参数。在同一批脑样本中，已有研究在TTC染色后采用同时进行的免疫荧光染色方法20以及其他分子和生物化学分析方法21。我们此前曾在同一批脑组织中通过计算大脑半球体积来评估脑水肿，并进行TTC染色以计算梗死区域15。
在本实验方案中，我们介绍了一种改良的MCAO技术，通过在同一组啮齿类动物脑组织中测定IZ、BE和BBB通透性来评估缺血性脑损伤。IZ通过TTC染色法测定，BE通过计算半球体积确定，BBB通透性则采用光谱法测定19。在本方案中，我们采用了一种改良的MCAO模型，该模型基于将单丝缝合线导管直接插入并固定于颈内动脉（ICA），进而阻断大脑中动脉（MCA）的血流22。与传统的MCAO方法相比，该改良方法的死亡率和发病率显著降低16,22。
这种新方法为测量大脑中动脉闭塞（MCAO）后的神经损伤提供了一种经济可行且符合伦理的模型。对缺血性脑损伤主要参数的评估将有助于全面研究其病理生理机制。

<table><tbody><tr><td>2 mL注射器</td><td>布劳恩</td><td>4606027V</td><td></td></tr><tr><td>70% 酒精溶液中的 2% 氯己定</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>500 cc</td><td>为手术区域皮肤提供常规消毒</td></tr><tr><td>27 G 针头配注射器</td><td>布劳恩</td><td>305620</td><td></td></tr><tr><td>3-0 丝线缝合线</td><td>Henry Schein</td><td>1007842</td><td></td></tr><tr><td>4-0 尼龙缝线</td><td>4-00</td><td></td><td></td></tr><tr><td>大脑 &amp;与组织基质</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>15013</td><td></td></tr><tr><td>Cannula Venflon 22 G</td><td>KD-FIX</td><td>183603985447</td><td></td></tr><tr><td>Sigma 2-16P 离心机</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>Sigma 2-16P</td><td></td></tr><tr><td>紧凑型分析天平</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>HR-AZ/HR-A</td><td></td></tr><tr><td>电子天平</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>4,000 卢比</td><td></td></tr><tr><td>解剖剪</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>Z265969</td><td></td></tr><tr><td>Eppendorf 移液器</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>Z683884</td><td></td></tr><tr><td>Eppendorf管</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>EP0030119460</td><td></td></tr><tr><td>荧光检测器</td><td>Tecan, M&amp;auml;nnedorf 瑞士</td><td>型号：Infinite 200 PRO 多功能酶标仪</td><td>可选。</td></tr><tr><td>荧光检测器</td><td>Molecular Devices LLC</td><td>VWR 货号 # 10822 512 SpectraMax Paradigm 多功能微孔板读板仪基础仪器</td><td>可选。</td></tr><tr><td>纱布敷料</td><td>Fisher</td><td>22-362-178</td><td></td></tr><tr><td>带温度计的加热器</td><td>加热板-1</td><td>型号：HEATINGPAD-1/2</td><td></td></tr><tr><td>止血微型夹</td><td>Sigma-Aldrich</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Horizon-XL</td><td>Mennen Medical Ltd</td><td></td><td></td></tr><tr><td>输注袖带</td><td>ABN</td><td>IC-500</td><td></td></tr><tr><td>微型镊子</td><td>Sigma-Aldrich</td><td></td><td></td></tr><tr><td>微型剪刀</td><td>Sigma-Aldrich</td><td></td><td></td></tr><tr><td>多集合</td><td>梯瓦医疗</td><td>998702</td><td></td></tr><tr><td>奥林巴斯 BX 40 显微镜</td><td>Olympus</td><td></td><td></td></tr><tr><td>操作镊子</td><td>Sigma-Aldrich</td><td></td><td></td></tr><tr><td>使用剪刀</td><td>Sigma-Aldrich</td><td></td><td></td></tr><tr><td>光学扫描仪</td><td>佳能</td><td>Cano Scan 4200F</td><td>分辨率 3200 x 6400 dpi</td></tr><tr><td>培养皿</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>P5606</td><td></td></tr><tr><td>普瑞纳饲料</td><td>普瑞纳</td><td>5001</td><td>实验中向大鼠随意提供的啮齿类动物实验室饲料是一种生命周期营养饲料，已用于生物医学研究五十多年。该饲料同样适用于小鼠和仓鼠。</td></tr><tr><td>大鼠笼具</td><td>Techniplast</td><td>2000P</td><td>啮齿类动物常规饲养环境。实验全程使用笼具饲养大鼠</td></tr><tr><td>11号手术刀片</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>S2771</td><td></td></tr><tr><td>&lt;强&gt;软件&lt;/strong&gt;</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Adobe Photoshop CS2 for Windows</td><td>Adobe</td><td></td><td></td></tr><tr><td>ImageJ 1.37v</td><td>美国国立卫生研究院</td><td></td><td>源代码可免费获取。作者 Wayne Rasband（wayne@codon.nih.gov）来自美国马里兰州贝塞斯达市国家精神卫生研究院研究服务部</td></tr><tr><td>SPSS Statistics 22</td><td>IBM</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Office 365 ProPlus</td><td>Microsoft</td><td>-</td><td>Microsoft Office Excel</td></tr><tr><td>Windows 10</td><td>微软</td><td></td><td></td></tr><tr><td>&lt;强&gt;试剂&lt;/strong&gt;</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>2,3,5-三苯基氯化四氮唑</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>298-96-4</td><td></td></tr><tr><td>50% 三氯乙酸</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>76-03-9</td><td></td></tr><tr><td>乙醇 96 %</td><td>Romical</td><td></td><td>易燃液体</td></tr><tr><td>伊文思蓝 2%</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>314-13-6</td><td></td></tr><tr><td>异氟烷，USP 100%</td><td>Piramamal Critical Care, Inc</td><td>NDC 66794-017</td><td></td></tr></tbody></table>

在一组啮齿类动物脑样本中同时测量卒中后脑水肿、梗死区域及血脑屏障破坏

Measuring Post-Stroke Cerebral Edema, Infarct Zone and Blood-Brain Barrier Breakdown in a Single Set of Rodent Brain Samples

全球发病率和死亡率最常见的原因之一是缺血性脑卒中。传统上，用于模拟缺血性脑卒中的动物模型包括大脑中动脉阻塞（MCAO）。脑梗死区域、脑水肿以及血脑屏障（BBB）破坏被用作反映MCAO后脑损伤程度的检测指标。该方法的一个重要局限性在于，这些指标通常需在不同的大鼠脑组织样本中分别测定，因而为了获得足够的样本量需要处死大量大鼠，带来伦理和经济上的负担。本文介绍一种可在同一批大鼠脑组织中同时测定梗死区域、脑水肿和血脑屏障通透性的方法，以准确评估MCAO后的脑损伤情况。这一新技术为评估脑卒中的病理生理机制提供了更高效的研究手段。

梗死区域测量
独立样本 t 检验显示，接受永久性大脑中动脉闭塞（MCAO）的19只大鼠相比16只假手术大鼠，脑梗死体积显著增加（MCAO=7.49% ± 3.57 vs. 假手术=0.31% ± 1.9，t(28.49) = 7.56，p &lt; 0.01（见图2A））。数据以对侧半球的平均百分比±标准差表示。
脑水肿测量
独立样本 t 检验显示，与 16 只假手术大鼠相比，接受永久性大脑中动脉闭塞（MCAO）的 19 只大鼠在术后 24 小时脑水肿程度显著增加（MCAO=12.31% ± 8.6 vs. 假手术组=0.64% ± 10.2，t(29.37) = 3.61，p = 0.01，d = 1.23（见图 ...

本方案描述了一种在同一批啮齿类动物脑样本上测量缺血性脑损伤三个最重要参数的新技术。仅使用一个脑样本在伦理和经济成本方面具有显著优势。

全球发病率和死亡率最常见的原因之一是缺血性脑卒中。传统上，用于模拟缺血性脑卒中的动物模型……

在本实验方案中，我们介绍了一种改良的中动脉闭塞技术，用于检测同一组啮齿类动物脑组织中的缺血性脑损伤，以确定梗死区域、脑水肿以及血脑屏障（BBB）通透性。从伦理和经济成本角度考虑，该技术的主要优势在于仅需一个脑样本即可完成上述三项检测。对缺血性脑损伤主要参数的评估将有助于全面研究缺血性脑卒中的病理生理机制。首先，取出大鼠脑组织，使用未涂层的0.009英寸不锈钢单边剃须刀片将其切成2毫米厚的水平切片。将切片置于0.005% TTC溶液中，在37摄氏度下孵育30分钟，然后将脑组织放置于显微镜载玻片上，以1600 × 1600 DPI的分辨率对六片脑切片进行光学扫描。使用图像编辑软件为图像添加蓝色滤光效果。打开软件后，进入图像、调整、通道混合器。选择蓝色作为输出通道，并勾选单色，然后点击确定。将图像以 JPEG 文件格式保存。使用 ImageJ 1.37 版本中的多边形选择工具，分别选中六张脑切片中每一张的两个半球，并将其保存为独立的图像文件。为计算梗死体积和脑水肿，使用宏程序根据设定的阈值将图像中的像素转换为白色或黑色。然后关闭所有文件，再使用第二个宏程序比较白色和黑色像素的数量，以确定梗死体积和脑水肿程度。将原始数据复制到电子表格中。在计算梗死体积时，通过使用同侧和对侧大脑半球的比值来校正组织肿胀。将脑水肿区域表示为未受累对侧半球标准面积的百分比。在阻断后24小时确定血脑屏障的破坏情况。将右侧和左侧半球分为六个切片，将每个切片放入一个微量离心管中。使用每克脑组织4毫升50%三氯乙酸，将每个脑组织切片在三氯乙酸中进行匀浆处理。将样品在10,000 × g条件下离心20分钟，然后将上清液转移至新管中，并用96%乙醇按1:3比例稀释。使用酶标仪进行发光光谱测定。独立样本t检验结果显示，接受永久性大脑中动脉闭塞（MCAO）的19只大鼠与16只假手术大鼠相比，脑梗死体积显著增加。与假手术组动物相比，接受永久性大脑中动脉阻断（MCAO）的大鼠在24小时后也表现出脑水肿程度和血脑屏障破坏的显著增加。在实施该操作时，重要的是确保化学试剂的浓度符合方案要求。该方案使得在一份脑组织样本中即可同时评估缺血性损伤的全部三个参数。

measuring-post-stroke-cerebral-edema-infarct-zone-blood-brain-barrier

Research

科研

JoVE Journal

Neuroscience

神经科学

测量一组啮齿动物脑样本中的中风后脑水肿、梗塞区和血脑屏障破裂

本视频演示了如何评估经大脑中动脉阻塞处理的大鼠脑切片中的梗死区域和脑水肿。使用氧化还原染色法识别梗死区域，同时通过图像分析软件中的蓝色滤光片和阈值功能，对受损半脑的梗死区域和水肿进行定量分析。...

测量大鼠大脑中动脉闭塞后脑梗死区域和脑水肿

来源：Zeynalov, E. et. al., 持续静脉输注是研究小鼠中风诱发脑水肿时使用精氨酸加压素受体阻滞剂考尼伐坦的首选给药途径。J. Vis. Exp.

静脉注射受体阻滞剂以减轻小鼠模型中的脑水肿

脑灌注监测已被证明可提高缺血性卒中模型的准确性。技术难题常常限制了这一脑血管研究重要工具的应用。本视频展示了一种优化的系统，可在大鼠大脑中动脉内栓塞过程中实现单部位或多部位的血流动力学监测。...

改良的大鼠大脑中动脉内栓塞卒中模型脑灌注监测系统

脑卒中后脑内髓系细胞的表征可通过体视学结合光学分数器方法，或通过脑白细胞悬液的流式细胞分析来实现。这两种技术均有助于对缺血性脑组织中主要髓系细胞亚群进行准确的表型区分。...

短暂性或永久性脑缺血模型中白细胞亚群的体视学与流式细胞术表征

本方案描述了重复性缺氧预处理，即短暂暴露于全身性缺氧，可减少小鼠短暂性大脑中动脉闭塞后脑梗死体积及血脑屏障的破坏。同时，本文还详细说明了脑卒中后脑梗死体积与血脑屏障破坏的双重定量方法，以评估神经血管保护作用的疗效。...

重复性缺氧预处理及小鼠短暂性大脑中动脉闭塞后神经血管保护作用的量化

我们描述了一种通过使用硅胶包被的缝合线阻塞大脑中动脉来诱导小鼠脑卒中的模型。该方案可用于诱导永久性阻塞，或诱导短暂性缺血后进行再灌注。...

采用大脑中动脉阻塞技术诱导小鼠缺血性卒中与缺血-再灌注及梗死区域的可视化

本实验的总体目标是提供一种高度可重复的技术，用于在缺血性脑卒中大鼠模型中进行血脑屏障破坏的体内评估。...

一个 在体 内 缺血性中风大鼠模型中血脑屏障破坏的评估

本文介绍了一种通过颈内动脉阻塞大脑中动脉以在大鼠中诱导卒中后抑郁的实验方案。我们采用Porsolt强迫游泳实验和蔗糖偏好实验来确认并评估所诱导的抑郁情绪状态。...

一种用于诱导大鼠卒中后抑郁的中动脉闭塞技术

该 本研究旨在通过检测大鼠大脑中动脉闭塞/再灌注（MCAO/R）后1至90天的脑梗死及感觉运动功能，建立并验证一种用于脑缺血恢复期及后遗症期研究的动物模型。...

一种用于评估大鼠急性中风后脑功能恢复的临床前模型

本文介绍了一种建立啮齿类动物脑损伤模型的技术。该方法利用激光照射，以运动皮层为靶区。...

大鼠运动皮层激光诱导脑损伤

学习改良型大脑中动脉闭塞技术，用于在啮齿动物脑样本中同时测量脑梗死区、脑水肿及血脑屏障通透性。该方法仅需单一脑样本即可完成三项关键指标评估，显著提高伦理与经济效益，助力全面研究缺血性脑卒中的病理生理学机制。

在一组啮齿类动物脑样本中同时测量卒中后脑水肿、梗死区域及血脑屏障破坏

探索更多视频