在蝾螈肢体再生过程中通过全皮瓣手术抑制伤口表皮的形成

本文介绍了如何通过立即在截肢平面上缝合全层皮肤来执行手术方法，以抑制蝾螈肢体再生期间伤口表皮的形成。这种方法使研究人员能够研究伤口表皮在肢体再生早期阶段的功能作用。

蝾螈肢体再生需要专门的伤口表皮。这种手术抑制伤口表皮的形成，可以与分子和功能技术相结合来研究肢体再生。该协议的主要优点是它高效且技术可重复。

这种手术方法为研究人员提供了一种工具来询问伤口表皮功能，并促进我们对为什么这种结构对再生至关重要的理解。确保蝾螈完全麻醉后，使用解剖剪刀在 zeugopodial 骨骼元件的远端进行肢体截肢。然后，用弹簧剪刀在皮肤的腹侧部分做一个小切口。

使用镊子，小心地将皮肤剥回大约 zeugopodial 骨骼元件的中线，露出下面的肢体组织，同时确保不会损伤皮肤。如果可能，在处理全层皮瓣时使用较钝的镊子，以防止损坏。用手术剪刀截去 zeugopod 中线处暴露的下肢组织，然后用手术剪刀将肌肉组织推回并修剪暴露的骨骼。

小心地将额外的全层皮肤拉过截肢平面以覆盖暴露的皮下组织，确保皮瓣保持其结构完整性。将其缝合到腹侧全层皮肤上。使用镊子和弯曲的弹簧剪刀，将皮瓣的剩余左右两侧以纵横交错的方式缝合到完整皮肤的底层腹侧部分。

完成后，确保看不到暴露的皮下组织，并且缝合线系紧并打结至少 3 次。作为可选的内部控制，用手术剪刀在中 zeugopod 水平截肢对对侧肢体进行截肢，然后用手术剪刀将肌肉组织推回并修剪裸露的骨骼。将装有磺胺片嗪溶液的容器底部放在冰上。

然后，将蝾螈放入容器中，轻轻地将湿巾的裸露端包裹在动物的顶部，以保持其水分充足。将其放在冰上 30 分钟到 1 小时，以确保在麻醉恢复期间尽量减少运动，然后将其放入装有 0.5% 磺胺片嗪溶液的静态外壳容器中。蝾螈必须在手术后的前 24 小时内保留在该溶液中，以防止感染。

该手术方案允许完全抑制伤口表皮的形成，并最终实现肢体再生。每天检查缝合的肢体很重要。如果一条或多条缝合线弹出，就会形成伤口表皮，导致小或大的胚层和手术失败。

通过缝合的肢体组织矢状切片并在任何时间点进行组织学分析，也可以验证整个皮瓣是否存在真皮，并在没有伤口表皮的情况下环绕整个截肢平面。尝试此手术时，重要的是要确保皮瓣保持其结构完整性并覆盖截肢平面。将缝合线打紧并确保皮瓣牢固对于方案的成功也至关重要。

该方法可与下游分析配对，包括 RNA 测序或功能技术，包括异位遗传过表达，以确定伤口表皮功能和肢体再生的新分子调节因子。