November 6th, 2020
在这里,我们提出了一个有效和高效的方法,啮齿动物尾静脉注射使用独特的设计的加热/抑制装置。通过简化血管吸附和抑制过程的启动,本协议允许准确和及时地静脉注射大群动物,以最小的痛苦。
加热和约束装置为成功进行静脉尾静脉注射提供了一种简化的技术,在受控环境中提供加热,并有效处理以进行静脉尾静脉注射。在尝试该技术之前,熟悉盐水注射的方案和实践非常重要。视觉演示提供了展示提示和注意事项以帮助完成手术的机会。
我实验室的博士后 Junko Yano 将设置设备,我将演示程序。要初始化加热装置,请将加热装置放在干净的平坦工作台面上并打开电源,确保恒温器电源指示灯呈绿色亮起。然后将垫料放入加热室内,以保持该区域干燥并保持热量。
对于约束装置的设置,将约束装置放在加热装置旁边,并确定适合动物的锥体尺寸。手动调整柔韧铝锥体的底座宽度,为动物提供足够的约束。或者,用定制的模型替换锥体,以适应不同大小的动物。
使用控制旋钮将恒温器设置为所需温度,确保加热器指示灯亮起红色且灯泡亮起。当灯泡打开时,请仔细监控内部温度显示。一旦达到目标温度,它将自动激活。
使用高度调节旋钮将约束平台锥体高度定位到最适合用户的水平。达到目标温度后,轻轻地将动物从笼子转移到加热室中。加热室可以安全地容纳 4 到 6 只小鼠或 1 只大鼠,最长 20 到 30 分钟。
热处理 5 到 10 分钟就足以诱导血管舒张并增强尾静脉的可见度。监测动物是否有任何急性热应激的迹象,例如呼吸急促、嗜睡或跳跃逃跑行为。通过尾巴底部提起动物,将其从腔室中取出,然后将其放在约束装置的锥形开口上。
当动物用前腿抓住圆锥体的远边缘时,轻轻地向后拉尾巴,然后将尾巴穿过敞开的缝隙。固定从圆锥体中伸出的任一后腿,以便在 12 点钟位置可以看到侧静脉。用非惯用手用拇指和食指抓住尾巴的中段到 2/3 长度,在侧静脉上施加轻微的张力,以保持尾部的位置和血管舒张。
用蘸有 70% 酒精的纱布海绵或垫子擦拭注射部位的皮肤。用惯用手握住注射器,并将针头与尾部平行放置。将针头以 10 到 25 度的角度沿血流方向插入,然后穿透 2 到 4 毫米,进一步进入静脉腔。
慢慢注入溶液。如果注射部位上方出现耐药性或白色水泡,请拔下针头并尝试在原始针头位置上方的部位进行第二次注射。如果一侧静脉注射不成功,请将动物重新定位到对侧,并在对侧静脉上进行更多尝试。
取下针头并用拇指用力按压注射部位,以防止注射液或血液回流。继续用干净的纱布或纸巾轻轻按压,直到出血停止。将动物放回笼子并监测 5 分钟,确保动物恢复正常活动,不再流血。
一旦加热室的加热器被激活,灯泡散发的热量会在最初的 5 到 15 分钟内迅速升高内部温度,具体取决于目标温度。如果检测到的内部温度超过设定温度,加热器将停用灯泡。随后,设备自动重复加热循环以保持内部温度。
在导致脓毒症的血流念珠菌病小鼠模型中,瑞士韦氏小鼠的白色念珠菌静脉攻击导致脓毒症的快速发作和微生物的播散,导致三到四天内的高死亡率。相比之下,可以通过预免疫或接种无毒菌株 Candida dubliniensis 来保护动物免受败血症,在用毒力白色念珠菌进行致命的 IV 攻击后实现超过 95% 的存活率。未接种疫苗的致死性感染动物败血症诱导的发病率显着增加,而接种疫苗的组在致命攻击后表现出轻微的症状。
在四项独立实验中可重复地获得进行性死亡率与疫苗介导的保护的结果。将动物放置在锥体中时要小心,确保针头正确倾斜以进入静脉,将针头调整到静脉中并注射静脉。这种流线型技术提供了一种高效且有效的方法来进行尾静脉注射,这将提高研究人员的科学成果。
本文介绍了一种使用专门的加热和约束设备对啮齿动物进行尾静脉注射的简化方法。该协议提高了注射的准确性和效率,同时最大限度地减少了动物的痛苦。