RESEARCH
Peer reviewed scientific video journal
Video encyclopedia of advanced research methods
Visualizing science through experiment videos
EDUCATION
Video textbooks for undergraduate courses
Visual demonstrations of key scientific experiments
BUSINESS
Video textbooks for business education
OTHERS
Interactive video based quizzes for formative assessments
Products
RESEARCH
JoVE Journal
Peer reviewed scientific video journal
JoVE Encyclopedia of Experiments
Video encyclopedia of advanced research methods
EDUCATION
JoVE Core
Video textbooks for undergraduates
JoVE Science Education
Visual demonstrations of key scientific experiments
JoVE Lab Manual
Videos of experiments for undergraduate lab courses
BUSINESS
JoVE Business
Video textbooks for business education
Solutions
Language
zh_CN
Menu
Menu
Menu
Menu
DOI: 10.3791/62227-v
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
我们描述了一个协议,以水稻(Oryza水稻 L.)为模型物种,从湿地环境中取样、保存和分割完整的根部和周围的岩石圈土壤。保存后,可以使用元素成像技术(如同步加速器 X 射线荧光 (XRF) 化学光谱成像技术分析样品。
这种方法为研究人员提供了一种为元素成像技术准备水生植物根部、周围岩石圈和散装土壤的新方法。这种方法的主要优点是,它相对快速和负担得起,同时也准确地保留了利益元素的分布和规格。该技术可用于回答有关许多元素和植物系统的问题,从农业系统的营养物质到束缚系统中污染物的命运和运输。
请务必快速工作,同时注意取样根系统所需的区域或区域。并每个根系统采集多个样本。为了准备实验的冷冻设备,将二、五乘五乘五乘15厘米的铜块水平放入一个能够容纳液氮的清洁冷却器中。
穿着适当的PPPE,将足够的液氮倒入冷却器中,以淹没方块。一旦冒泡消退,在一个铜块的两端放置一个隔音器。然后,使用钳子和低温手套,站在其末端的另一个铜博客,使检索更容易,当样品到位。
要收集样品,要么使用盆栽植物,要么使用铲子开始从潮湿的土壤中提取所需的植物和岩石圈,注意挖洞比所需的根体积大得多。使用钢刀片切割多余的土壤,注意不要打扰所需区域内的土壤。当所需的区域到达时,将大约三乘三乘三乘二厘米的根立方体切开,并立即将立方体放置在水平铜块的两个隔板之间。
对于样品的冷冻,使用低温手套将垂直铜块放置在垫片上约五分钟。当冒泡消退时,将冷冻的岩石圈立方体样品转移到一块预先标记的铝箔方块中。要冷冻干燥土壤立方体,当冷冻干燥机达到适当的真空压力和温度时,放置一个冷冻的岩石圈立方体样品,用于清洁和酸洗 50 毫升管或直接进入冷冻干燥机,并使用干净的一次性湿巾防止灰尘进入真空泵。
将样品放入冷冻干燥容器中至少几天,直到干燥。当组织被冻结干燥时,使用钢刀片将土壤立方体干燥到适当的大小进行分析,然后将立方体放入真空干燥器内的标记形式中。根据制造商的说明准备环氧树脂后,使用滴滴器在土壤的一侧慢慢添加环氧树脂,直到环氧树脂完全覆盖样品。
当环氧树脂弄脏土壤时,土壤会变暗。一旦表格中装满了环氧树脂,关闭干燥器并打开真空。前一到四小时每 30 到 90 分钟检查一次环氧树脂水平,必要时添加额外的环氧树脂。
环氧树脂硬化后,取出样品。嵌入后,使用钻石刀片精密湿锯切割样品。如果在上一个切口中未获得根部,则将样品切成不同的方向。
修剪后,手动用逐渐细化的砂纸将每个样品的切面擦去,每次砂砾大小为 30 秒。在这个数字中,在土壤基质中可以观察到几个根直径作为横截面。根部可能表现出不同的质量水平。
例如,在这张图片中,可以观察到保存完好的根部、被冻结干燥过程扭曲的根和在薄分割过程中拔出的根。通过同步加速器 X 射线荧光成像分析此根横向部分,通过纵向纵向部分进行分析,可以检测铁、锰和砷。在光显微图图像中也可以看到土壤内和铁斑块根部周围的铁的存在。
锰在横向根部皮层内独一无二,但在铁斑块内的某些区域也与铁作为绿蓝色色调共同定位。砷主要存在于横向根合并到原根的血管内。化学规格成像揭示了砷物种本地化的变异性。
正如在这种三色情节中观察到的,砷酸盐和砷酸谷胱甘肽在血管中密切相关,而砷酸盐主要在根部外部局部化,与铁斑块相关联。在采集样本之前,确定元素成像根系统所需的部分。这将决定删除的根键的位置方向。
根据此协议,样品可以使用各种技术以微米级或粗糙度成像,具体取决于具体的研究问题、感兴趣的元素或可用的仪器。
View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos
Related Videos
07:59
Related Videos
10.6K Views
11:37
Related Videos
16.7K Views
11:57
Related Videos
19K Views
09:55
Related Videos
27.9K Views
10:31
Related Videos
56.6K Views
07:45
Related Videos
16.6K Views
09:17
Related Videos
13K Views
10:22
Related Videos
5.8K Views
12:03
Related Videos
6.6K Views
08:28
Related Videos
3.1K Views