Name: 小鼠模型中风:光血栓形成的焦皮质病变 (视频) | JoVE Journal
Uploaded: 2021-05-06T14:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 7 s
Description: 了解光血栓性中风模型在小鼠中的应用，通过Rose Bengal腹腔注射和561纳米激光照射诱导局灶性皮质病变。该方法具有高重现性和低死亡率，适用于研究中风后机制及治疗策略。

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感谢免疫与中风研究联盟（Immunostroke Consortia，FOR 2879，从免疫细胞到中风恢复）的所有合作成员提供的建议和讨论。本研究由德国研究基金会（Deutsche Forschungsgemeinschaft，DFG）资助，资助项目包括德国卓越战略框架下的慕尼黑系统神经学集群（Munich Cluster for Systems Neurology，EXC 2145 SyNergy - 编号 390857198），以及项目编号 LI-2534/6-1、LI-2534/7-1 和 LL-112/1-1 的基金支持。

本视频中报道的实验均按照国家关于实验动物使用的规定进行，实验方案经德国政府委员会（德国慕尼黑上巴伐利亚行政区）批准。本研究所使用的小鼠为雄性C57Bl/6J小鼠，年龄10至12周，由德国查尔斯河实验室提供。动物饲养环境温度控制在（22 °C ± 2 °C），光照-黑暗周期为12小时，可自由摄取颗粒饲料和饮水ad libitum。
1. 材料与仪器的准备
<ol>
	<li>将玫瑰红（Rose Bengal）溶解于0.9%生理盐水中，配制成终浓度为10 mg/mL的溶液。连接加热毯以保持手术区域温暖，并在麻醉期间维持小鼠体温在37 °C。</li>
	<li>准备好剪刀、镊子、棉片、右泛醇（dexpanthenol）眼膏和缝合材料。准备一支不含针头的生理盐水注射器，用于保持手术区域湿润。准备好麻醉气体（100% O2 + 异氟烷）。</li>
</ol>
2. 动物准备
<ol>
	<li>手术前30分钟注射镇痛剂（卡洛芬4 mg/kg，布托啡诺0.1 mg/kg）。</li>
	<li>记录小鼠体重，以调整玫瑰红（Rose Bengal）的注射剂量（10 µL/g，即100 µg/g）。</li>
	<li>将小鼠放入诱导室，以4%异氟烷气流进行麻醉，直至其身体和胡须的自发运动停止。</li>
	<li>将小鼠转移至立体定位仪，使其呈俯卧位，鼻部插入麻醉面罩。固定动物后，维持异氟烷浓度为4%，持续1分钟，随后降低并维持在2%。</li>
	<li>轻柔插入直肠探头，以在手术过程中持续监测体温。设置相应的反馈控制加热垫，维持小鼠体温在37 °C。</li>
	<li>在双眼涂抹右旋泛醇眼膏，并使用消毒剂清洁皮肤及周围毛发。</li>
</ol>
3. 光化学血栓模型
<ol>
	<li>做一个2.0–2.5 cm的纵向切口并牵开以暴露颅骨。通过单一切口完成颅骨暴露，以避免伤口并发症。</li>
	<li>用棉签轻轻去除骨膜，并辨认冠状缝。</li>
	<li>戴上护目镜，打开561 nm激光器，标记bregma左侧+3 mm处。</li>
	<li>关闭激光器，在上述提到的标记坐标处贴上一个直径为4 mm的带孔贴纸。</li>
	<li>向小鼠腹腔注射孟加拉红（10 µL/g）。将激光束置于距颅骨4-5 cm处，打开561 nm激光器，照射颅骨20分钟。</li>
	<li>在……上滴加两滴0.9%生理盐水&#160;将颅骨置于再水化环境中，缝合伤口，并将动物放入37 °C的恢复室中，使其从麻醉状态中恢复。1小时后，将小鼠送回温度可控房间内的笼具中。</li>
	<li>术后3天内每12小时注射一次镇痛剂（4 mg/kg 卡洛芬和 0.1 mg/kg 布托啡诺）。</li>
</ol>
4. 假手术操作
<ol>
	<li>按照步骤 4.1.1 和 4.1.2 中所述，进行两种不同的假手术操作。
	<ol>
		<li>所有操作步骤均与上述手术完全相同，注射玫瑰红（Rose Bengal），但不开启激光。麻醉状态下持续 20 分钟后，将动物置于恢复室中恢复 1 小时，然后送回笼中。</li>
		<li>所有操作步骤均与上述手术完全相同，开启激光，但不注射玫瑰红（Rose Bengal）。激光照射 20 分钟后，将动物置于恢复室中恢复 1 小时以苏醒，然后送回笼中。</li>
	</ol>
	</li>
</ol>
5. 激光散斑
<ol>
	<li>连接加热毯以保持手术区域温暖，并在麻醉期间将小鼠体温维持在 37 °C。</li>
	<li>将小鼠放入诱导室，异氟烷气流速率为 4%，麻醉至小鼠身体自发运动和胡须抖动停止，然后将小鼠转移至立体定位仪中。</li>
	<li>将小鼠置于俯卧位，鼻部插入麻醉面罩。固定动物后，维持异氟烷浓度为 4% 持续 1 分钟，随后降低并维持在 2%。</li>
	<li>轻柔插入直肠探头，以在手术过程中持续监测体温。设置相应的反馈控制加热垫，将小鼠体温维持在 37 °C，并在双眼涂抹泛醇眼膏。使用消毒剂清洁皮肤及周围毛发。</li>
	<li>作一条 2.0–2.5 cm 的纵向切口并牵拉暴露颅骨。采用单一切口方式暴露颅骨，以避免伤口并发症。</li>
	<li>将立体定位仪置于激光散斑成像仪下方，调节高度以获得清晰图像。将激光散斑灌注成像（LSI）相机对准颅窗。按照先前所述方法配置高分辨率激光散斑成像（LSI）相机系统15。</li>
	<li>使用波长为 785 nm、功率为 80 mW 的激光，在工作距离 1 cm 处以每秒 21 幅图像的帧率，采集 1 cm × 1 cm 视野范围内的数据，持续 1 分钟。</li>
	<li>成像结束后，在颅骨上滴加两滴 0.9% 生理盐水以重新水化组织，缝合切口，并将动物置于 37 °C 的恢复室中复苏 1 小时。1 小时后，将小鼠放回温度可控房间内的笼具中。</li>
</ol>
6. 神经功能评分
注意：神经功能缺损分析采用 Eckenstein 等人于 1997 年发表的改良神经功能评分标准15。
<ol>
	<li>根据表1（一般性缺陷）和表2（局灶性缺陷）对动物进行评分。该综合评分范围从0分（无缺陷）到46分（严重损伤）。</li>
	<li>每天在同一时间进行神经功能评分，并穿着手术服以保持气味中性。</li>
	<li>在测试前，将小鼠置于开放笼中，在测试房间内适应30分钟，并让其每项观察30秒。</li>
</ol>
7. 灌注
<ol>
	<li>准备一个含有PBS-肝素（2 U/mL）的20 mL注射器，并将其放置在实验台上方1 m处，以利于/确保重力驱动灌注。</li>
	<li>腹腔注射100 µL氯胺酮和赛拉嗪（剂量分别为120/16 mg/kg体重）。等待5分钟，并确认动物自发性身体运动和触须活动停止。</li>
	<li>将动物仰卧位固定，并用100%乙醇对腹部表面进行消毒。在腹部做一条长约3 cm的切口；剪开膈肌和肋骨，充分暴露心脏。</li>
	<li>在右心房做一小切口，将灌注导管插入左心室，并用20 mL PBS-肝素进行灌注。</li>
	<li>灌注完成后，将动物断头，取出脑组织，用干冰速冻后于-80 °C保存，以备后续使用。</li>
</ol>
8. 梗死体积测量
<ol>
	<li>冷冻切片：使用冷冻切片机将脑组织连续切片，厚度为 20 µm，每隔 120 µm 取一片，并将切片贴附于载玻片上。将载玻片储存于 -80 °C，待后续处理。</li>
	<li>焦油紫（CV）染色
	<ol>
		<li>配制染色液：将 0.5 g 醋酸焦油紫溶于 500 mL H2O 中，搅拌并加热至 60 °C，直至晶体完全溶解。冷却后，储存于避光瓶中。每次使用前需重新加热至 60 °C，并用滤纸过滤。</li>
		<li>将载玻片在室温下干燥 30 分钟。随后依次置于 95% 乙醇中 15 分钟、70% 乙醇中 1 分钟，以及 50% 乙醇中 1 分钟。</li>
		<li>将载玻片置于蒸馏水中 2 分钟，更换新鲜蒸馏水后再次浸入蒸馏水中 1 分钟。然后将载玻片放入预热至 60 °C 的染色液中染色 10 分钟。最后用蒸馏水漂洗两次，每次 1 分钟。</li>
		<li>将载玻片置于 95% 乙醇中 2 分钟，随后转移至 100% 乙醇中 5 分钟，更换新鲜 100% 乙醇后再浸入 100% 乙醇中 2 分钟。之后，用封片剂封片。</li>
		<li>分析：扫描载玻片，并采用 Swanson 方法16计算校正水肿后的间接梗死体积：缺血区域 = （缺血区）-（同侧半球 - 对侧半球）。</li>
	</ol>
	</li>
</ol>
9. TUNEL 染色（原位 细胞凋亡检测试剂盒
<ol>
	<li>将载玻片干燥，于室温下用含4%多聚甲醛的PBS（pH 7.4）后固定10–20分钟。用PBS洗涤，再于-20 °C下用预冷的乙醇:冰醋酸（2:1）溶液后固定5分钟。</li>
	<li>用PBS洗涤，加入平衡缓冲液（室温孵育10秒至最长60分钟），然后加入工作浓度的TdT酶（于37 °C湿盒中孵育1小时）。</li>
	<li>加入工作浓度的终止/洗涤液（室温孵育10分钟），用PBS洗涤，再加入已恢复至室温的工作浓度抗地高辛素偶联物（避光，室温孵育30分钟）。</li>
	<li>用PBS洗涤，加入DAPI室温孵育5分钟，最后用荧光封片介质封片。</li>
</ol>

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</ol>

作者无任何竞争利益需要披露。

本方案介绍了一种光血栓诱导的实验性脑卒中模型，通过在腹腔注射玫瑰红染料后，使用561 nm激光照射完整颅骨来诱导血栓形成。直到最近，该模型的应用较少，但其使用正稳步增加。
在此模型中，诱导脑卒中期间无死亡情况。总体死亡率低于5%，死亡发生在手术过程中，原因在于麻醉相关并发症，或因符合排除标准而被实施安乐死。为确保该模型的低变异性及可重复性，建议采用以下排除标准：1）手术时间超过30分钟；2）缝合材料感染；3）咬伤；4）光栓塞术后24小时无梗死灶或无前肢不对称表现。
一种广泛使用的实验性脑卒中模型是通过缝合丝线暂时阻塞大脑中动脉（MCA），即将丝线经颈内动脉插入，直至硅胶包被的尖端阻塞MCA的起始部。该模型可通过撤出丝线实现再灌注，模拟了临床上因栓塞性血栓自发或经治疗性溶栓（rtPA）后脑血流恢复的情况18,19。然而，该方法涉及复杂的手术操作，最终梗死范围变异性大，且死亡率较高<sup class="xref"...

缺血性卒中仍是发达国家中死亡和获得性成人残疾的主要原因st 21世纪，全球2017年约有270万人因此死亡1尽管科学界付出了巨大努力，目前可用的治疗方法仍然有限。此外，由于严格的排除标准，这些本已有限的治疗选择无法惠及许多患者，因此迫切需要开发新的治疗方法，以改善卒中后的功能恢复。
考虑到无法实现 体外 为了模拟大脑复杂的相互作用，动物模型对于卒中前期研究至关重要。小鼠是卒中研究领域最常用的动物模型。这些小鼠模型中的大多数旨在通过阻断大脑中动脉（MCA）的血流来诱导梗死，因为人类卒中病灶的大多数位于MCA供血区域。2尽管这些模型能更好地模拟人类脑卒中病灶，但其手术过程复杂，且梗死体积变异较大。
自Rosenblum和El-Sabban于1977年提出光化学血栓模型3，随后Watson等人将该模型应用于大鼠4以来，该模型已在缺血性脑卒中研究中得到广泛应用5,6。光化学脑卒中模型通过向血流中预先注射光敏染料，再经光照激活，从而诱导产生局部且边界明确的皮质梗死。此过程可导致光照区域的血管发生局部血栓形成。简而言之，当注射的光敏染料暴露于光下时，会引发内皮细胞膜的局部氧化损伤，进而导致血小板聚集和血栓形成，最终造成局部脑血流中断7。
该技术的主要优势在于操作简便，且能够将病灶精准定位至目标区域。与其他实验性脑卒中模型相比，光栓塞性脑卒中模型仅需较少的外科手术操作经验，因为病灶是通过照射完整的颅骨来诱导产生的。此外，其边界清晰明确图2A 和 图5B以及能够灵活地在特定脑区诱导病灶，有助于研究缺血性或完整皮层区域内的细胞反应8因此，该方法适用于研究皮层可塑性的细胞与分子机制。
在过去几十年中，由于不同研究团队之间研究结果的可重复性不足，引发了所谓的“重复性危机”9。2015年首次协调开展了临床前随机对照多中心试验研究10，该研究作为一种改进临床前研究的建议工具11,12,13，证实了独立实验室之间临床前研究结果不可重复的原因之一，在于实验性脑卒中模型和结局参数缺乏足够的标准化14。因此，当ImmunoStroke联盟（https://immunostroke.de/）成立时——该联盟旨在揭示脑卒中恢复机制背后脑与免疫系统相互作用的基本原理——在各研究团队之间对所有实验性脑卒中模型进行标准化变得至关重要。
本文所述为上述研究联盟所采用的光化学血栓模型诱导标准化操作流程。简言之，实验动物接受麻醉后，腹腔注射玫瑰红（Rose Bengal，10 µL/g），随即以561 nm激光照射颅骨完整部位（位于前囟左侧3 mm处），持续20分钟（图1）。此外，本文还报告了用于分析该模型卒中后果的相关组织学与行为学方法。所有方法均基于实验室开发并使用的标准操作程序。

<table><tbody><tr><td>561 nm 波长激光器</td><td>Solna</td><td>Cobolt HS-03</td><td></td></tr><tr><td>乙酸</td><td>Sigma Life Science</td><td>695092</td><td></td></tr><tr><td>异氟烷麻醉系统</td><td>Drager</td><td></td><td></td></tr><tr><td>ApopTag 过氧化物酶原位凋亡检测试剂盒</td><td>Millipore</td><td>S7100</td><td></td></tr><tr><td>Bepanthen 软膏</td><td>Bayer</td><td>1578681</td><td></td></tr><tr><td>C57Bl/6J 小鼠</td><td>Charles River</td><td>000664</td><td></td></tr><tr><td>准直器</td><td>Thorlabs</td><td>F240APC-A</td><td></td></tr><tr><td>棉签</td><td>NOBA Verbondmitel Danz</td><td>974116</td><td></td></tr><tr><td>焦油紫</td><td>Sigma Life Science</td><td>C5042-10G</td><td></td></tr><tr><td>冷冻切片机</td><td>Thermo Scientific CryoStar NX70</td><td></td><td></td></tr><tr><td>70% 乙醇</td><td>CLN Chemikalien Laborbedorf</td><td>521005</td><td></td></tr><tr><td>96% 乙醇</td><td>CLN Chemikalien Laborbedorf</td><td>522078</td><td></td></tr><tr><td>99% 乙醇</td><td>CLN Chemikalien Laborbedorf</td><td>ETO-5000-99-1</td><td></td></tr><tr><td>滤纸</td><td>Macherey-Nagel</td><td>432018</td><td></td></tr><tr><td>精细剪刀</td><td>FST</td><td>15000-00</td><td></td></tr><tr><td>镊子</td><td>FST</td><td>11616-15</td><td></td></tr><tr><td>加热毯</td><td>FHC DC Temperature Controller</td><td>&amp;nbsp;40-90-8D</td><td></td></tr><tr><td>异氟烷</td><td>Abbot</td><td>B506</td><td></td></tr><tr><td>异戊烷</td><td>Fluka</td><td>59070</td><td></td></tr><tr><td>氯胺酮</td><td>Inresa Arzneimittel GmbH</td><td></td><td></td></tr><tr><td>激光散斑成像仪</td><td>Perimed</td><td>PeriCam PSI HR</td><td></td></tr><tr><td>大剪刀</td><td>FST</td><td>1410-15</td><td></td></tr><tr><td>磷酸盐缓冲液 pH: 7.4</td><td>Apotheke Innestadt Uni Munchen</td><td>P32799</td><td></td></tr><tr><td>防护眼镜</td><td>Laser 2000</td><td>NIR-ZS2-38</td><td></td></tr><tr><td>玫瑰红</td><td>Sigma Aldrich</td><td>198250-5G</td><td></td></tr><tr><td>Roti-Histokit 封片介质</td><td>Roth</td><td>6638.1</td><td></td></tr><tr><td>生理盐水溶液</td><td>Braun</td><td>131321</td><td></td></tr><tr><td>体视显微镜</td><td>Zeiss</td><td>Stemi DV4</td><td></td></tr><tr><td>立体定位仪</td><td>Stoelting</td><td>51500U</td><td></td></tr><tr><td>Superfrost Plus 载玻片</td><td>Thermo Scientific</td><td>J1800AMNZ</td><td></td></tr><tr><td>赛拉嗪</td><td>Albrecht</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

小鼠卒中模型构建：光栓法诱导局灶性皮层损伤

Modeling Stroke in Mice: Focal Cortical Lesions by Photothrombosis

中风是发达国家中导致死亡和获得性成人残疾的主要原因。尽管针对新型治疗策略已进行了广泛研究，但中风患者的治疗选择仍然有限。因此，迫切需要进一步研究中风后的病理生理通路，例如炎症反应、血管生成、神经元可塑性以及再生。鉴于 体外 为重现大脑复杂性，实验性卒中模型对于分析和后续评估这些机制的新型药物靶点至关重要。此外，迫切需要为所有操作建立详细且标准化的模型，以应对所谓的“可重复性危机”。作为ImmunoStroke研究联盟的一项工作，本文描述了一种标准化的光化学血栓性小鼠模型，该模型通过腹腔注射玫瑰红（Rose Bengal），并使用561 nm激光照射完整颅骨实现。该模型可在无需侵入性手术的情况下，在小鼠脑部任意皮层区域诱导卒中，从而实现对大脑不同区域卒中的研究。本视频中，将展示光化学血栓模型中卒中诱导的手术方法以及&#160;展示了组织学分析。

本文所述模型为光化学血栓性脑卒中模型，通过注射玫瑰红（Rose Bengal）并在完整颅骨上以561 nm恒定波长、光纤输出功率25 mW的光照持续照射20分钟建立。尽管完整的光化学血栓手术持续约30分钟，但动物始终处于轻度麻醉状态，脑损伤程度较轻。转移至笼中约10分钟后，所有动物均已清醒，能够在笼内自由活动，并与同笼动物互动。
脑梗死体积测定是在卒中诱导后24小时，利用焦油紫染色的连续冠状脑切片进行的（图2A）。平均梗死体积为29.3 mm3，占一侧脑半球的23%。此外，该卒中模型的变异度极低，标准差约为3.5%（图2B）。病灶区域累及运动皮层，但未累及皮层下结构。
光栓塞导致了中度且长期的感觉运动功能障碍，这通过综合神经评分17（图3）得以体现；一般性及局灶性神经功能缺损在术后...

本文介绍光化学血栓性脑卒中模型，该模型通过在给予光敏染料后利用激光照射，经完整颅骨诱导永久性微血管闭塞，从而产生脑卒中。

中风是发达国家中导致死亡和成人后天性残疾的主要原因。尽管针对新型治疗策略已进行了广泛研究，……

光血栓卒中模型可能适用于皮层可塑性的细胞和分子研究，因其损伤边界局限，并可灵活地在皮层不同区域诱导损伤。该模型具有三个主要优势，使其区别于其他卒中模型：能够将病灶精准定位至目标区域、具有高度可重复性以及低死亡率。恰当的玫瑰红（rose bengal）剂量对于模型的成功建立及其稳定性至关重要。结果取决于激光功率、跨应用时序以及未受影响皮层的光学散射等技术参数。首先将玫瑰红溶于0.9%生理盐水中，配制成终浓度为10毫克/毫升的溶液。使用高温灭菌器对所有器械进行仔细灭菌，并在手术前后使用微生物消毒喷雾对所有表面进行消毒。准备一支装有生理盐水的注射器，以保持手术区域湿润，并准备好麻醉气体。测量小鼠的体重，以调整刚果红染料的注射剂量。设置相应的反馈控制加热垫，以维持小鼠体温。当小鼠完全麻醉并固定在立体定位仪上后，轻轻插入直肠探头，以在手术过程中持续监测小鼠体温。将泛醇眼膏涂抹于双眼，并使用消毒剂清洁皮肤及周围毛发。用剪刀做一个2至2.5厘米长的纵向切口，牵拉切口以暴露颅骨。使用棉签轻轻去除骨膜并定位冠状缝。打开561纳米激光器时需佩戴护目镜，并在左侧标记加3毫米处，然后关闭激光器，在标记的坐标处贴上带有直径4毫米孔洞的贴纸。向小鼠顶骨内注射玫瑰红染料。将激光束置于距离颅骨四到五厘米的位置。打开激光，照射颅骨20分钟。通过滴加两滴0.9%生理盐水重新水化颅骨。缝合伤口后，将小鼠置于37摄氏度的复苏箱中，以恢复麻醉。一小时后，将小鼠放回温度可控房间内的笼子中。在脑卒中诱导24小时后，采用结晶紫染色连续冠状脑切片进行梗死体积定量分析。该卒中模型的变异性较低，平均梗死体积为29.3立方毫米，占单侧脑半球的23%。光诱导血栓病变导致中度且长期的感觉运动功能障碍，复合神经评分结果表明了这一点。卒中动物在术后24小时神经评分出现显著变化。尽管存在差异，卒中模型小鼠随着时间推移逐渐改善。在经玫瑰红染料加光照处理的小鼠中，术后24小时体重和体温下降，但在术后三天内观察到恢复现象。采用激光成像技术确认缺血性改变。结果表明，单独使用玫瑰红或激光照射均未产生病灶，而两者同时应用则形成一个圆形的低灌注区域，周围环绕着狭窄的少血流区。术后24小时通过结晶紫染色和TUNEL染色评估梗死体积，结果显示单独使用玫瑰红或激光照射的手术均未造成组织损伤。另一方面，使用玫瑰红（rose bengal）结合激光照射可产生边界清晰的病灶。必须测量动物的体重以调整玫瑰红的注射剂量。冠状血管开关（coroner switchers）的正确状态对于在不同动物之间诱导出一致的病灶至关重要。由于该方案保留了完整的颅骨，甚至可以通过颅窗进行操作，因此可与宽场或多光子活体成像技术相结合。

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小鼠模型中风:光血栓形成的焦皮质病变

本视频演示了通过在给予光敏染料后，对完整颅骨进行激光照射，在小鼠模型中诱导光栓塞性卒中的操作步骤。...

小鼠模型中光血栓性卒中的建模：通过小鼠颅骨进行激光照射的技术，在给予光敏染料后诱导光血栓形成

光血栓法是一种快速、微创的技术，可高度可重复地在特定感兴趣区域诱导产生小而界限清晰的梗死灶。该方法特别适用于研究转基因小鼠中脑可塑性相关的细胞和分子反应。...

光血栓性缺血：一种用于小鼠卒中研究的微创且可重复的光化学皮层损伤模型

多种小鼠大脑中动脉闭塞（MCAO）模型广泛应用于实验性脑科学研究。本文展示了经颅永久性远端MCAO模型，该模型可产生稳定的皮质梗死，其大小与大多数人类缺血性卒中所造成的损伤相当。...

小鼠卒中模型：远端大脑中动脉永久性凝闭

本文介绍了一种半侵入性光学显微技术，用于在活体小鼠的体感皮层中诱导玫瑰红光栓塞凝块。in...

孟加拉红光栓塞的共聚焦光学成像 体内单血管卒中模型

光化学血栓法是一种微创且高度可重复的操作，可用于在脊髓中诱导局灶性缺血，是小鼠脊髓损伤的模型。...

光血栓法诱导的局灶性缺血作为小鼠脊髓损伤模型

本文描述了一种囊状梗死的建模技术。我们在此采用了一种改良的光化学血栓法，在术前靶向定位后使用低强度光照。利用该技术，我们建立了具有持续性运动功能障碍的局限性囊状梗死模型。...

使用光化学血栓技术建立局限性囊膜梗死模型

传统的光化学血栓性卒中（PTS）模型主要诱导形成对组织型纤溶酶原激活物（tPA）溶栓治疗具有高度抵抗性的致密血小板聚集体。本文介绍了一种通过共注射凝血酶和光敏染料进行光激活的改良小鼠PTS模型。该凝血酶增强型PTS模型可形成血小板与纤维蛋白混合的血栓，且对tPA溶栓治疗高度敏感。...

一种富含纤维蛋白且对tPA敏感的光化学血栓性卒中模型

在实验性脑卒中研究中，采用多种大脑中动脉阻塞（MCAo）模型。本文描述了一种通过颈外动脉（ECA）实现的短暂性MCAo实验性脑卒中模型，旨在模拟人类脑卒中情况下因自发性血栓溶解或治疗干预导致脑血管血栓被清除的情形。...

小鼠卒中模型构建：经由颈外动脉进行短暂性大脑中动脉阻塞

采用全光学方法，在清醒且行为正常的小鼠脑卒中新兴核心区域，利用荧光生物传感器同时记录神经元Ca2+活动，以诱导缺血性脑卒中。...

在活动小鼠中同时进行光栓塞与光纤光度法以诱导并监测缺血性脑卒中

本方案提供了一种整合性方法，包括病毒递送、光探针植入、光血栓诱导、星形胶质细胞与神经元活动的同步记录，以及星形胶质细胞的光遗传学刺激。该整合性方法旨在对缺血性脑卒中从急性期到慢性期各个阶段的星形胶质细胞-神经元相互关系进行同步研究。...

一种用于光栓法脑卒中建模的整合方法 在体 内 行为小鼠中神经元和星形胶质细胞活动的光探针记录

了解光血栓性中风模型在小鼠中的应用，通过Rose Bengal腹腔注射和561纳米激光照射诱导局灶性皮质病变。该方法具有高重现性和低死亡率，适用于研究中风后机制及治疗策略。

小鼠卒中模型构建：光栓法诱导局灶性皮层损伤

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