2021年9月27日
该论文及配套视频展示了一种经皮活检技术,用于获取脐周区域皮下脂肪组织的样本。该方法是一种低风险且高效的手段,可用于研究脂肪组织内的多种参数(如基因或蛋白质表达、酶活性、脂质含量)。
该技术特别适用于采用前后对照研究设计或旨在表征特定人群的研究,且无需大量的尸体组织。其主要优点在于该技术相对成本较低,几乎无痛。同一天内可在同一受试者身上进行多次活检。
该技术有助于理解脂肪组织的生理学,特别是疾病和代谢功能的相关机制。开始前,应确保实验室配备有适当私密的房间,具有清洁、可擦拭且无孔的表面,以及一张干净舒适的床,供受试者仰卧。然后使用70%乙醇喷雾和洁净的纸巾清洁所有活检操作所需的表面。
接下来,在进行活检操作的区域及操作人员附近,放置合适的锐器废弃桶和生物危害废物袋,确保触手可及。在受试者到达实验室之前,将该操作所需的设备放置于已清洁的通用医用推车上。在获得书面知情同意后,要求受试者填写一份书面问卷,以确认其对本操作中使用的任何材料均无过敏反应。
在口头确认参与者身份后,确保参与者了解将要进行的操作以及可能的次要副作用,包括瘀伤、疼痛和感染。除了书面知情同意外,还需获取参与者的口头同意。接下来,向参与者描述操作过程,重点说明麻醉剂注射和活检过程中可能产生的感觉。
同时,确保受试者同意继续操作。再次确认受试者对局部麻醉药、某些金属和贝类无过敏史,且未服用任何抗凝药物。当受试者处于仰卧位后,确定穿刺部位,该部位位于脐部外侧约5至10厘米处。
接下来,根据标准医疗指南,用肥皂和温水洗手。将无菌单铺在洁净的推车或工作区域,注意仅接触无菌单的外缘。采用正确的无菌技术佩戴无菌外科手套。
然后让助手打开其余设备,使其直接掉落至已准备好的无菌敷布上,避免任何接触或污染。确保助手在从无菌包装中取出物品时不要触碰物品。接下来,指示助手将少量含碘溶液倒在部分无菌纱布上。
然后以螺旋方式从拟定的活检部位中心向外对皮肤进行消毒。如有 excess liquid,用新的无菌纱布擦拭去除。与助手口头确认局部麻醉药小瓶内的内容物及其有效期。
然后指示助手将打开的小瓶倒置。使用21号针头将5毫升局部麻醉药吸入注射器中。将针头丢弃至锐器盒中,并确保注射器内无气泡。
接下来,将26号针头安装到注射器上,并排出所有气泡。然后轻轻捏起腹部皮肤和脂肪组织,使其与腹壁分离,将针头以不超过皮肤表面10度的角度水平插入皮下组织。随后,回抽注射器活塞0.5毫升。
如果注射器中出现血液,应撤出针头并以不同角度重新插入,然后形成一个直径2至4毫米的皮丘,以麻醉穿刺区域。将针头推进皮下组织,以扇形模式注射1毫升利多卡因。取下并妥善处理26号针头。
然后将21号针头连接至注射器,以扇形模式注射剩余的4毫升利多卡因。5分钟后,使用无菌手术刀轻轻探查活检区域,确认局部麻醉效果并确定麻醉区域的边界。随后再等待1至2分钟,重新进行评估。
确认麻醉起效后,轻轻捏住皮肤和脂肪组织,在皮肤上做一个1至2毫米的小切口。接着,将14号针头连接到5或10毫升的注射器上。然后,在轻轻捏住皮肤和脂肪组织的同时,以不超过皮肤表面10度的角度,将针头通过切口轻柔地插入麻醉区域中央附近的脂肪组织中。
通过回抽活塞产生负压,使活塞退至约 2.5 毫升刻度处。然后通过快速前后移动针头获取穿刺样本,以切割脂肪组织碎片。30 秒后,将针头和注射器旋转 90 度,并重复此操作,以进一步破碎脂肪组织碎片,随后通过负压将碎片抽吸至注射器内。
大约一分钟后,拔出针头,并将注射器内的内容物排到覆盖在舟状船形器上的纱布层上,确保针头内腔朝下,以避免可能的血液飞溅。按照演示的方法,最多重复三次活检采集操作,每次重复前需确认受试者同意继续。在采集额外样本的同时,指示助手对先前采集的样本进行处理,并为分析或储存做好准备。
采集到满意的样本后,在穿刺伤口处覆盖一至两层无菌纱布。然后放置冰袋,并用力按压约10分钟,以促进止血。止血完成后,用无菌纱布擦去任何含碘溶液或干涸的血液,再在穿刺部位贴上带有吸收垫的粘性伤口敷料。
在确认受试者感觉良好后,提供关于活检部位护理的口头和书面指导,强调受试者在接下来的几天内可能会出现一定程度的淤青。将使用过的锐器和受污染的材料清理至指定的锐器盒或医疗废物容器中,然后用70%乙醇清洁活检过程中使用的所有表面,并将一次性及非一次性床品分别放入适当的医疗废弃物袋中进行丢弃或清洁处理。本研究中,共对11名健康的正常体重女性进行了39次皮下脂肪组织活检。
采用该操作步骤,平均可获得192毫克的样本。若选择的活检部位过于靠近脐部,可能导致不必要的广泛性瘀伤。以下总结了参与者在脂肪组织活检后出现的并发症列表。
操作时应始终捏紧皮肤,以避免针头刺穿深层肌肉组织或穿透皮肤另一侧。熟练操作至关重要,务必确保由经过培训的医师先进行充分练习,再对实际受试者进行操作。在插入针头以破碎脂肪组织时,实施活检的人员必须有足够的把握,确保能够充分破碎样本。
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本文介绍了一种经皮穿刺活检技术,用于获取脐周皮下脂肪组织样本。该方法风险低、效率高,适用于研究脂肪组织内的多种参数。
这种微创脂肪组织取样技术能够对人类受试者进行多次组织采集,支持肥胖症和糖尿病研究中的纵向代谢研究及靶点验证。该方法无需手术干预即可获取与疾病相关的入体组织,减少了对动物模型的依赖,并提高了临床前靶点去风险化研究的转化可信度。通过提供稳定且可量化的样本用于机制分析,该技术还可支持检测方法开发和生物标志物发现的研究流程。
该技术通过提供人体组织用于靶点验证,推进至化合物筛选的检测方法开发,并利用生物标志物的一致性在临床前模型中实现转化验证,从而整合到早期发现的工作流程中。