Name: 小鼠终末H反射测量 (视频) | JoVE Journal
Uploaded: 2022-06-16T12:30:00.000+00:00
Duration: 5 min 38 s
Description: 学习小鼠终末H反射测量方法，通过直接神经刺激记录前爪电生理信号。该技术可减少传统经皮记录的变异性，适用于脊髓损伤和中风等疾病模型的神经回路完整性评估。

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

作者们衷心感谢T. Akay（达尔豪西大学）在MG访问其实验室期间提供的支持。本工作获得了Friebe基金会（T0498/28960/16）以及德国研究基金会（DFG，German Research Foundation）——项目编号431549029——SFB 1451的资助。

所有实验均遵循欧洲和国家动物护理法律法规以及机构指南，&#160;并经北莱茵-威斯特法伦州自然、环境与消费者保护局批准（编号：81-02.04.2019.A309）。本方案优化用于成年小鼠（约8–16周龄的C57Bl/6J小鼠）的前肢记录。通过刺激后肢相应神经并记录后爪肌肉，可轻松适配用于后肢实验（图1B）。记录电极和刺激电极的详细说明见于材料表。请注意，本方案仅用于终末性测量。
1. 准备
<ol>
	<li>称重动物，并通过注射开始麻醉 通过 腹腔注射氯胺酮（100 mg/kg）和赛拉嗪（10 mg/kg）的混合物。</li>
	<li>将小鼠置于保温箱中直至达到手术耐受状态。等待数分钟，直至小鼠状态平静、呼吸稳定且反射消失。通过检测脚趾夹捏无反应来确认麻醉深度。</li>
	<li>将小鼠仰卧置于加热垫上（最佳方式是使用直肠温度探针进行反馈控制的加热）。用胶带固定前肢，注意胶带的放置位置应便于将测量电极插入前肢。</li>
	<li>插入直肠探针以测量动物体温，并用胶带固定。涂抹眼药膏以防止眼睛干涩。</li>
</ol>
2. 手术
注意：在整个操作过程中，应定期监测麻醉动物的稳定状态，即呼吸、体温和反射消失情况。前肢掌部的桡神经/尺神经/正中神经的直接神经H波测量步骤如（图3A）所示。该测量方法也可经适当调整后应用于后肢掌部（坐骨神经/胫神经）。
<ol>
	<li>为了更清楚地观察手术区域，可事先在另一处使用电动剃刀或剪刀去除毛发。对于经验丰富的手术操作者，此步骤为可选。 
	注意：此处无需消毒，因为本实验为终点实验，动物后续将被实施安乐死。</li>
	<li>用镊子提起皮肤，使用精细圆头剪刀沿前肢掌侧后轴方向（腋窝及胸壁上方区域）在皮肤上做约1 cm的切口。</li>
	<li>小心去除结缔组织，暴露其下方的肌肉和神经。用镊子移除暴露的胸小肌，以显露正中&#160;神经（图3E,F）。使用柔软组织清除暴露的血液和组织液。</li>
	<li>下一步，从上至下小心剪开乳腺或腋部肌肉，以暴露其下方的神经束。将神经束从结缔组织和肌肉组织中游离约1.5 cm的长度。 
	注意：此步骤需特别注意避免损伤与正中神经平行走行的血管。切割组织时，应始终沿神经方向进行，以防损伤神经。若发生损伤，需用棉签清除渗出的液体和血液。整个实验过程中无需使用体视显微镜，但在神经解剖阶段可酌情使用以辅助操作。</li>
	<li>使用弯头玻璃移液管小心分离前肢的尺神经和正中神经（图3E）。两条神经中位置较上方的为尺神经，较下方的为正中神经。 
	&#8203;注意：分离两条神经时，应注意避免损伤其下方的血管。</li>
</ol>
3. 电极放置
<ol>
	<li>将刺激钩状电极平行放置，间距为 0.5–1.0 mm，并使用显微操作器将双钩电极移至靠近神经的位置。</li>
	<li>使用玻璃钩作为工具，将尺神经轻轻提起并置于刺激钩状电极上。利用显微操作器将带有神经的电极向后拉，并将其与其他神经分离约 1–2 mm（图 3D、F）。</li>
	<li>将电极沿足掌的长轴方向放置，以减少肌肉间的串扰。 
	注意：由于个体解剖结构的差异，电极的放置至关重要但难以标准化，需要经验丰富的外科医生准确操作。若信号幅度不理想，也可重新调整电极位置。</li>
	<li>将附着在神经上的电极钩表面轻轻擦干，并用注射器涂抹凡士林，以实现与周围组织的电绝缘。 
	&#8203;注意：应小心操作，确保在电极表面以及两个钩之间充分涂抹凡士林，以保证电绝缘效果，并防止神经干燥。</li>
</ol>
4. 记录电极和参考电极的放置
<ol>
	<li>为测量H反射，将肌电图（EMG）电极插入前肢肌肉内，同时将参考电极皮下置于后肢（例如使用微小针头），并用微型鳄鱼夹固定（图3B）。</li>
	<li>开启刺激器后，可通过前肢轻微抽动观察刺激是否成功。引发M波及前肢轻微可见抽动的最小刺激电流应在10–50 µA范围内。 
	注意：若在50 µA时仍无可见抽动，应调整刺激电极并重新涂抹凡士林。此外，在小鼠中，M波常在较H波更低的刺激强度下出现5。</li>
</ol>
5. 测量
<ol>
	<li>使用持续时间为 0.2 ms 的脉冲重复刺激神经 15 次。每组刺激之间间隔 2 分钟，刺激频率依次从 0.1、0.5、1.0、2.0 增加至 5 Hz。 
	注意：若需后续计算反射衰减（RDD），则必须采用上述频率。所有肌电图（EMG）数据均通过软件（例如 Spike2 软件，CED，版本 7.19）进行记录、数字化和分析。H 波振幅在 0.1 Hz 时最大；随着频率升高，由于反射衰减（RDD）效应，H 波振幅逐渐减小。</li>
	<li>实验结束后，根据机构动物护理与使用委员会（IACUC）的规程处死动物。本实验中，在深度麻醉下对小鼠进行经心脏灌注，依次使用 PBS 和 4% 多聚甲醛（PFA）。</li>
</ol>

<ol><li>Palmieri, R. M., Ingersoll, C. D., Hoffman, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Hoffmann+reflex%3A+methodologic+considerations+and+applications+for+use+in+sports+medicine+and+athletic+training+research%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Athletic+Training%22%5BJournal%5D)">The Hoffmann reflex: methodologic considerations and applications for use in sports medicine and athletic training research.</a> Journal of Athletic Training. 39 (3), 268-277 (2004).</li>
<li>Henneman, E., Somjen, G., Carpenter, D. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Excitability+and+inhibitibility+of+motoneurons+of+different+sizes%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neurophysiology%22%5BJournal%5D)">Excitability and inhibitibility of motoneurons of different sizes.</a> Journal of Neurophysiology. 28 (3), 599-620 (1965).</li>
<li>Toda, T., Ishida, K., Kiyama, H., Yamashita, T., Lee, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Down-regulation+of+KCC2+expression+and+phosphorylation+in+motoneurons%2C+and+increases+the+number+of+in+primary+afferent+projections+to+motoneurons+in+mice+with+post-stroke+spasticity%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+ONE%22%5BJournal%5D)">Down-regulation of KCC2 expression and phosphorylation in motoneurons, and increases the number of in primary afferent projections to motoneurons in mice with post-stroke spasticity.</a> PLoS ONE. 9 (12), 114328(2014).</li>
<li>Lee, S., Toda, T., Kiyama, H., Yamashita, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Weakened+rate-dependent+depression+of+Hoffmann%E2%80%99s+reflex+and+increased+motoneuron+hyperactivity+after+motor+cortical+infarction+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Death+%26+Disease%22%5BJournal%5D)">Weakened rate-dependent depression of Hoffmann’s reflex and increased motoneuron hyperactivity after motor cortical infarction in mice.</a> Cell Death & Disease. 5 (1), 1007(2014).</li>
<li>Knikou, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+H-reflex+as+a+probe%3A+Pathways+and+pitfalls%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neuroscience+Methods%22%5BJournal%5D)">The H-reflex as a probe: Pathways and pitfalls.</a> Journal of Neuroscience Methods. 171 (1), 1-12 (2008).</li>
<li>Wieters, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Introduction+to+spasticity+and+related+mouse+models%5BTitle%5D)+AND+%22Experimental+Neurology%22%5BJournal%5D)">Introduction to spasticity and related mouse models.</a> Experimental Neurology. 335, 113491(2020).</li>
<li>Pearson, K. G., Acharya, H., Fouad, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+new+electrode+configuration+for+recording+electromyographic+activity+in+behaving+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neuroscience+Methods%22%5BJournal%5D)">A new electrode configuration for recording electromyographic activity in behaving mice.</a> Journal of Neuroscience Methods. 148 (1), 36-42 (2005).</li>
<li>Akay, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Long-term+measurement+of+muscle+denervation+and+locomotor+behavior+in+individual+wild-type+and+ALS+model+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neurophysiology%22%5BJournal%5D)">Long-term measurement of muscle denervation and locomotor behavior in individual wild-type and ALS model mice.</a> Journal of Neurophysiology. 111 (3), 694-703 (2014).</li>
<li>Haghighi, S. S., Green, D. K., Oro, J. J., Drake, R. K., Kracke, G. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Depressive+effect+of+isoflurane+anesthesia+on+motor+evoked+potentials%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosurgery%22%5BJournal%5D)">Depressive effect of isoflurane anesthesia on motor evoked potentials.</a> Neurosurgery. 26 (6), 993(1990).</li>
<li>Chang, H. -Y., Havton, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Differential+effects+of+urethane+and+isoflurane+on+external+urethral+sphincter+electromyography+and+cystometry+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology-Renal+Physiology%22%5BJournal%5D)">Differential effects of urethane and isoflurane on external urethral sphincter electromyography and cystometry in rats.</a> American Journal of Physiology-Renal Physiology. 295 (4), 1248-1253 (2008).</li>
<li>Nolan, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Section+4%3A+Nervous+system+%28Br.+J.+Pharmacol%29%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+pharmacology%22%5BJournal%5D)">Section 4: Nervous system (Br. J. Pharmacol).</a> Clinical pharmacology. , 295-310 (2012).</li>
<li>Struck, M. B., Andrutis, K. A., Ramirez, H. E., Battles, A. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+a+short-term+fast+on+ketamine-xylazine+anesthesia+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+American+Association+for+Laboratory+Animal+Science%3A+JAALAS%22%5BJournal%5D)">Effect of a short-term fast on ketamine-xylazine anesthesia in rats.</a> Journal of the American Association for Laboratory Animal Science: JAALAS. 50 (3), 344-348 (2011).</li>
<li>Zandieh, S., Hopf, R., Redl, H., Schlag, M. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effect+of+ketamine%2Fxylazine+anesthesia+on+sensory+and+motor+evoked+potentials+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Spinal+Cord%22%5BJournal%5D)">The effect of ketamine/xylazine anesthesia on sensory and motor evoked potentials in the rat.</a> Spinal Cord. 41 (1), 16-22 (2003).</li>
</ol>

作者声明不存在竞争性财务利益。

与先前报道的小鼠经皮H反射测量方法6相比，本方法提供了更直接且针对特定神经的测量方式。该新方法可应用于前肢和后肢的神经（例如正中神经、尺神经和桡神经，以及胫神经和坐骨神经），因此可作为多种疾病模型（如脑卒中、多发性硬化、肌萎缩侧索硬化、创伤性脑损伤和脊髓损伤）的诊断工具，具有良好的适应性。根据所选神经的不同，建议对H波振幅随刺激强度变化的关系进行验证。H波振幅可能因神经直径、运动神经元兴奋性以及电接触情况而产生变化。通过测量H/M比值和反射潜伏期差值（RDD），可减少实验因素（如针电极位置）对结果的影响，从而显著提高所获数据的可靠性。
本方案的主要局限性在于其为终末性应用，无法进行纵向测量。此外，还需考虑若干方法学细节。持续的麻醉应保持最小程度的肌肉松弛，这对获得可靠的测量结果至关重要，且需针对每种特定模型或应用进行验证。与异氟烷麻醉不同，后者会引起肌肉反射（如H反射）的强烈抑制9,10,<sup...

Hoffmann反射（H反射）以生理学家Paul Hoffmann的名字命名，可通过电刺激外周神经诱发，这些外周神经包含起自并支配&#160;同一肌肉的感觉神经元和运动神经元的轴突。H反射是单突触牵张反射的电诱发类似现象，二者具有相同的传导通路1。与肌肉牵拉不同，H反射由电刺激引发。当以外周神经施加低强度电流刺激时，由于Ia传入纤维的轴突直径较大，通常会首先发生去极化2。其动作电位激活脊髓中的α运动神经元（αMNs），继而引发动作电位沿αMN轴突向肌肉传导（图1）。这一级联反应产生幅度较小的肌肉反应，表现为所谓的H波。通过逐步增加刺激强度，由于更多运动单位被募集，H波的幅度随之增大。当刺激强度达到某一阈值时，αMN较细的轴突可被直接激发产生动作电位，此反应记录为M波。M波的潜伏期短于H波（图2）。若进一步提高刺激强度，由于更多αMN轴突被募集，M波幅度进一步增大，而H波则逐渐减小。在高强度刺激下，H波可被抑制，原因是αMN轴突中动作电位发生逆向传导，这些被触发的动作电位与来自Ia纤维刺激的动作电位相碰撞，从而相互抵消。在超强刺激强度下，所有运动神经元轴突中均同时发生顺向（朝向肌肉）和逆向（朝向脊髓）的动作电位；前者产生最大M波幅度（Mmax），后者则导致H反射完全消失3。
为了评估卒中后肌张力障碍（PSS）或脊髓损伤（SCI），H反射已被用于研究人类运动和肌张力障碍的神经基础1。通过使用H波与M波的比值（H/M比值），可以更准确地量化不同测量之间以及不同受试者之间的H反射变化。另一种方法是测量频率依赖性抑制（RDD），即采用一组递增频率（例如0.1、0.5、1.0、2.0和5.0 Hz）进行刺激。RDD反映了可能因卒中或SCI而受损的抑制性神经回路的完整性。当所有神经回路均完整时，H反射会表现出一致且不依赖频率的抑制效应。然而，若由于卒中或SCI导致神经抑制功能减弱，则随着刺激频率的增加，H反射的抑制作用会逐渐减弱4。
使用表面电极进行正确的电生理记录可能具有挑战性，并可能受到运动任务、抑制性机制以及α运动神经元兴奋性的影响5在啮齿类动物的经皮记录中，刺激电极置于胫神经附近，记录电极置于前爪相关肌肉附近。然而，根据我们的经验，经皮电极的正确放置（图1A在啮齿类动物中，该技术比在人类中使用表面电极更为复杂且变异性更大。这可能导致引发H反射所需的刺激时长、频率和强度存在差异。这些方法学上的挑战或许可以解释为何目前仅有极少数关于H反射测量的研究（例如，在实验性脑卒中模型中）。3,4以及其他痉挛性模型6原则上，可通过在目标神经周围植入电极，实现对单个神经H反射的精确（长期）刺激与记录7,8由于该手术对动物具有挑战性，可能带来副作用，且探针可能存在不稳定性，因此该方法尚未成为本领域的标准技术。本文介绍的方法同样需要一定的手术操作经验，但能够实现对孤立神经进行新颖、精确的刺激与记录。 体内 使用低强度刺激，以避免同时刺激邻近神经。

<table><tbody><tr><td>吸水垫</td><td>VWR</td><td>115-0684</td><td></td></tr><tr><td>模数转换器</td><td>Cambridge Electronic Design, 英国</td><td>CED 1401micro</td><td></td></tr><tr><td>放大器</td><td>动物学研究所车间，乌得勒支大学</td><td>-</td><td></td></tr><tr><td>数字刺激器</td><td>动物学研究所车间，乌得勒支大学</td><td>MS 501</td><td></td></tr><tr><td>肌电图电极</td><td>动物学研究所车间，乌得勒支大学</td><td></td><td>将两根绞合的绝缘铜线（外径 50 &amp;micro;m）焊接到公插头上，并连接至差分放大器。</td></tr><tr><td>眼药膏</td><td>拜耳</td><td>Bepanthen</td><td></td></tr><tr><td>玻璃移液管</td><td>动物学研究所车间，乌得勒支大学</td><td>-</td><td>在本生灯火焰中将玻璃移液管弯成简单的玻璃钩。</td></tr><tr><td>加热箱</td><td>MediHeat</td><td>MediHeat V1200</td><td></td></tr><tr><td>加热垫</td><td>WPI</td><td>61840 加热垫</td><td></td></tr><tr><td>钩状电极</td><td>动物学研究所车间，乌得勒支大学</td><td>-</td><td>制作电极时，将不锈钢微型针在一端弯成钩状，并插入钝头套管中以形成直接机械接触。将套管末端焊接到铜线上（长度约 50 cm），铜线再连接至刺激或记录设备。</td></tr><tr><td>氯胺酮</td><td>辉瑞</td><td>Ketavet</td><td></td></tr><tr><td>直肠探头</td><td>WPI</td><td>RET-3</td><td></td></tr><tr><td>刺激器隔离单元</td><td>动物学研究所车间，乌得勒支大学</td><td>MI 401</td><td></td></tr><tr><td>灭菌器</td><td>CellPoint Scientific</td><td>Germinator 500</td><td>手术器械的常规术前和术后消毒应通过热灭菌完成。在加热的玻璃珠浴中（260&amp;deg;C）对器械去污 15 秒。</td></tr><tr><td>温度控制器</td><td>WPI</td><td>ATC200</td><td></td></tr><tr><td>凡士林</td><td>拜耳</td><td>-</td><td></td></tr><tr><td>赛拉嗪</td><td>拜耳</td><td>Rompun</td><td></td></tr></tbody></table>

小鼠终末h反射测量

Terminal H-reflex Measurements in Mice

作为牵张反射的电生理类似物，Hoffmann反射（H反射）可用于在脊髓损伤或中风等损伤后，对神经回路完整性的电生理评估。H反射反应增强，伴随相应肌肉出现非自主性肌肉收缩、病理性增强的牵张反射和肌张力增高等症状，是中风后痉挛状态（PSS）的指征。
与相对缺乏神经特异性的经皮测量方法相比，本文介绍了一种直接在前肢的尺神经和正中神经上定量测定H反射的实验方案，该方法经少量修改后也可适用于后肢的胫神经和坐骨神经。基于直接刺激并针对不同神经进行的优化，该方法是一种可靠且多功能的工具，可用于验证与痉挛相关疾病模型中的电生理变化。

针对每个刺激频率和每只足垫的 n = 15 次刺激试验，应至少选取 n = 10 次成功记录用于分析。存在测量误差（例如缺失M波）的试验将被排除在分析之外。需对每次试验单独进行分析，后续再生成平均值以进行组间或时间点间的比较。每次试验中均需记录刺激与M波和H波出现之间的时间潜伏期。根据我们的经验，由于信号通过脊髓的传导时间较长，M波通常在刺激后约 2 ms 出现，而H波则在 6–8 ms 后出现（图 1A 和 图 2B）。M波和H波的波幅应以峰-峰幅值进行测量。
为了评估脊髓损伤或脑卒中后发生的生理变化，H波与M波振幅的比值（H/M比值，图2）受实验变异性的干扰较小，而这种变异性可能体现在振幅差异上。因此，该比值能够更可靠地评估与疾病相关的电生理变化。例如，在初级和次级运动皮层发生脑卒中的小鼠中，H波振幅增大，而M波保持不变（图2），提示α运动神...

基于Hoffmann反射（H反射）并利用外周神经电刺激对痉挛状态进行临床评估是一种成熟的方法。本文提供了一种在小鼠前爪中用于定量H反射的终末直接神经刺激方案。

小鼠终末H反射测量

Hoffmann反射（H反射）作为牵张反射的电生理模拟，可用于验证神经环路完整性的电生理评估……

H反射可用于神经回路完整性的电生理学验证。本文介绍一种在小鼠前爪神经上直接定量检测H反射的终末实验方案。与传统的、对神经特异性较差的经皮记录方法不同，该方法在不同小鼠及不同测量日期之间的结果变异性更小。与在患者中进行的H反射记录类似，精确的定量分析可实现对疾病模型（如脊髓损伤和脑卒中）的电生理学特征描述。该方案要求操作者具备熟练的小鼠手术器械操作实验技能。如果您不确定如何分离神经与结缔组织及血管，请先进行练习。本操作将由我实验室的博士生 Frederique Wieters 示范。开始时，将一只成年、已麻醉的 8 至 16 周龄 C57 black/6J 小鼠置于覆盖的加热垫上，等待小鼠状态平静、呼吸稳定且反射消失。将小鼠仰卧放置，然后用胶带固定前肢。放置胶带时应确保测量电极能够方便地插入前肢。测量小鼠体温时，插入直肠探头并用胶带固定。涂抹眼药膏以防止眼睛干涩。使用精细的圆头剪刀小心去除毛发，同时用镊子轻轻提起皮肤。随后，使用一把精细的圆头剪刀沿前肢掌侧后缘轴线做一厘米长的皮肤切口。小心去除结缔组织，暴露下方的肌肉和神经。然后用镊子去除暴露的胸小肌，以观察正中神经。用柔软的纸巾小心去除少量血液和组织液。接着，从上至下仔细剪开胸部或腋窝肌肉，以暴露神经束。在长约约1.5厘米的范围内，将神经束从结缔组织和肌肉组织中游离出来。使用弯头玻璃移液管小心分离前肢的尺神经和正中神经。上方的神经为尺神经，下方的为正中神经。将刺激器钩状电极平行放置，间距为0.5至1毫米，并使用显微操作器将双钩电极移至靠近神经的位置。使用玻璃钩将尺神经抬至刺激钩状电极上。然后，连同神经一起向后拉动电极，并将其与其他神经分离。将电极沿足掌的长轴放置，以减少肌肉间的串扰。用注射器将电极钩上附着的神经表面轻轻擦干，并涂抹凡士林，以实现与邻近组织的电绝缘。为测量H反射，将肌电图电极插入前肢足部肌肉内，然后将参考电极置于后肢皮下，用微型鳄鱼夹固定。开启刺激器后，通过前肢足垫出现微小抽动来观察刺激是否成功。引发M波及前肢足垫可见微小抽动的最小刺激电流为10至50微安。采用持续时间为0.2毫秒的脉冲，共进行15次神经刺激。每组刺激之间间隔两分钟，刺激频率依次从 0.1、0.5、1.0、2.0 增加至 5 赫兹。此处展示了用于测量 H 反射和肌肉反应通路的记录装置示意图。评估了 H 波与 M 波振幅的比值。将刺激信号及相应的刺激伪迹设定在零毫秒处，随后出现直接M波以及其后代表H波的较小波峰。M波大约在刺激后2毫秒出现，而H波由于在脊髓中的传导时间较长，在刺激后6至8毫秒出现。除神经分离操作外，电极上以及两个钩子之间涂抹石蜡油也至关重要。这是一项终末性实验。在我们的实验室中，该技术为经皮H反射记录提供了新的金标准参考。

Research

科研

JoVE Journal

Biology

生物学

本文介绍了使用改良的自动化装置进行小鼠T迷宫测试以评估其学习和记忆功能的实验方案。...

小鼠工作记忆与参考记忆评估的T型迷宫强制交替与左右辨别任务

本视频演示了一种在小鼠体内测量复合肌肉动作电位（CMAP）的技术。该技术概述了电极设置、刺激支配肌纤维的前肢神经元以及记录肌肉反应的步骤。该方法可用于评估神经元脱髓鞘及功能性神经元的丢失。...

在活体小鼠前肢肌肉中测量复合肌肉动作电位

本视频演示了通过电刺激大鼠尺神经、调节电极以获得最佳信号，并逐步增加刺激强度以评估神经功能，来记录复合肌肉动作电位（CMAP）的操作流程。该方法可实现对神经传导功能的定量评估。 体内...

在大鼠体内测量复合肌肉动作电位

电子 von Frey 测量法是对传统 von Frey...

使用电子 von Frey 仪器测量小鼠后肢触觉敏感性的变化

我们提出经过优化的实验方案，可实现 体内...

小鼠后肢肌肉中复合肌肉动作电位（CMAP）的电生理运动单位计数（MUNE）测量

本文介绍了如何将病毒载体注射到小鼠前额叶皮层，以检测需要G蛋白偶联受体异源多聚体形成的动物行为学实验。...

通过HSV介导的嵌合构建体转基因表达研究小鼠GPCR异源寡聚体的行为功能

本研究建立了一种使用树脂毒素（RTX）的纯小纤维神经病变实验模型。特定剂量的RTX（50...

建立纯小纤维神经病小鼠模型的瞬时受体电位香草素受体1超强激动剂方法

神经传导测量是评估神经退行性疾病小鼠模型的有用工具，但通常仅用于刺激后肢坐骨神经。本文介绍了一种测量复合肌肉动作电位（CMAP）的技术 体内...

体内电生理记录小鼠运动神经元变性模型前肢复合肌肉动作电位

测量啮齿类动物骨骼肌的收缩功能是一种有用的工具，可用于追踪疾病进展以及评估治疗干预的效果。本文描述了一种非侵入性的、可在活体（in...

小鼠背屈肌功能的非侵入性评估

机械冲突回避实验被用作评估小鼠疼痛敏感性的一种非反射性指标，可用于更好地理解多种小鼠疼痛模型中的情感-动机反应。...

小鼠疼痛行为的机械性避冲突检测法

本文提供了利用尿激酶型纤溶酶原激活物进行韧带内注射，以快速、简便地建立小鼠背痛模型的方法。...

尿激酶型纤溶酶原激活物诱导的小鼠背痛模型

学习小鼠终末H反射测量方法，通过直接神经刺激记录前爪电生理信号。该技术可减少传统经皮记录的变异性，适用于脊髓损伤和中风等疾病模型的神经回路完整性评估。

小鼠终末H反射测量

探索更多视频