Name: 用于测试新兴抗生素的新型高通量 离体 绵羊皮肤伤口模型 (视频) | JoVE Journal
Uploaded: 2022-09-16T13:20:00.000+00:00
Duration: 8 min 30 s
Description: 了解离体绵羊皮肤伤口模型用于测试新型抗生素的方法。该模型通过金黄色葡萄球菌感染模拟体内伤口环境，为抗菌药物临床前研究提供快速可重复的结果，同时减少对实验动物的依赖。

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作者感谢英国工程与物理科学研究委员会（EPSRC，项目编号：EP/R513313/1）提供的经费支持。作者还感谢位于切斯特菲尔德卡洛的 R.B Elliot 和 Son 屠宰场提供羔羊头部，并在项目初期阶段给予的大力支持与配合；感谢 Kasia Emery 在本实验方案开发过程中提供的持续支持；感谢谢菲尔德大学感染、免疫与心血管疾病系的 Fiona Wright 处理组织学样本，并在整个项目过程中给予的极大帮助。

本项目所用皮肤样本来源于 R.B Elliott 和 Son 屠宰场的羔羊头部。所有羔羊均被屠宰作为食物。这些头部未被丢弃，而是被重新用于科研。由于组织样本来自屠宰场废弃的材料，因此无需获得伦理审批。
1. 灭菌
<ol>
	<li>在采集头部样本前，使用洁净的镊子并在200 °C干热灭菌烘箱中灭菌1小时，对镊子进行消毒。所有玻璃器皿在使用前于121 °C高压蒸汽灭菌15分钟。</li>
	<li>所有操作均应在二级微生物操作柜内进行。所有试剂的配制均应按照制造商说明书进行。</li>
</ol>
2. 样品采集
<ol>
	<li>在屠宰场，使用电击或高压气枪使斯瓦尔代羔羊昏迷后放血致死。屠宰后不超过4小时收集羔羊头部。</li>
</ol>
3. 头部的制备
<ol>
	<li>将约 100 mL 的 200 ppm 二氧化氯溶液倒在样品区域，对羔羊前额部位进行消毒。使用电动剪刀剃除头部前额区域的毛发，并用 200 mL 的 200 ppm 二氧化氯溶液清洗该区域。</li>
	<li>用乙醇和蓝色吸水纸擦拭该区域，涂抹脱毛膏并覆盖 35 分钟。使用刮刀轻轻刮除脱毛膏，并评估样品区域。若仍有大量毛发残留，请重复脱毛过程。</li>
	<li>再使用 200 mL 二氧化氯溶液冲洗该区域，随后用乙醇冲洗，并用蓝色吸水纸擦拭。</li>
	<li>使用无菌的 8 mm 活检打孔器，从准备好的区域切取 8 mm 的皮肤样本。使用无菌镊子和 15 号手术刀取出样本，并确保彻底去除所有皮下脂肪组织。</li>
	<li>将样本放入装有无菌磷酸盐缓冲液（PBS）的 0.5 L 无菌广口瓶中，随后转移至含有 50 mL 200 ppm 二氧化氯溶液的无菌 50 mL 离心管中，倒置混匀两次，静置消毒 30 分钟。</li>
	<li>从二氧化氯溶液中取出样本，将其置于装有 40 mL 无菌 PBS 的 50 mL 离心管中进行清洗。清洗后，将每份皮肤样本分别放入 24 孔板中的独立孔内。</li>
	<li>加入 350 µL 预热的培养基，同时保持样本处于气-液界面状态。培养基的成分为：MK 培养基（含 Hank's 盐、L-谷氨酸和 1.75 mg/mL 碳酸氢钠的 Medium 199）与 Ham's F12 培养基按 1:1 比例混合，并添加胎牛血清（FBS，10% v/v）、表皮生长因子（EGF，10 ng/mL）、胰岛素（5 µg/mL）、青霉素-链霉素（100 U/mL）和两性霉素 B（2.5 µg/mL）。</li>
	<li>使用透气性板封膜密封 24 孔板，置于 37 °C、含 5% CO2 的加湿组织培养箱中孵育，最长不超过 24 小时。</li>
</ol>
4. 皮肤样本的保存
<ol>
	<li>孵育后，移除培养基，并用 500 µL 无菌 PBS 清洗样品。向每个样品中加入不含抗生素的培养基，在 37 °C、含 5% CO2 的湿润组织培养箱中孵育 24 小时，以去除样品中残留的抗生素。</li>
	<li>若在不含抗生素的培养基中孵育 24 小时后出现浑浊或真菌污染，则弃去该样品。</li>
</ol>
5. 接种物的制备
<ol>
	<li>取一支50 mL离心管，加入10 mL无菌胰蛋白胨大豆肉汤。取一新鲜的金黄色葡萄球菌（S. aureus）琼脂平板，用拭子蘸取数个菌落并转移至肉汤中。于37 °C、150 rpm条件下培养18小时。</li>
	<li>在4,000 × g 条件下离心3分钟。弃去上清液，将菌体沉淀重悬于10 mL无菌磷酸盐缓冲液（PBS）中。重复洗涤两次，以确保细胞充分清洗。</li>
	<li>用无菌PBS将接种物浓度调节至OD600为0.6。通过手工活菌平板计数法确认接种量。</li>
</ol>
6. 皮肤样本的感染
<ol>
	<li>使用无菌镊子将24孔板的插入物放入含有400 µL预热的无抗生素培养基的新鲜24孔板中。</li>
	<li>移除皮肤样本中的培养基，用500 µL无菌PBS洗涤，并吸除洗涤液。用无菌镊子轻轻将样本固定在孔底。</li>
	<li>使用4 mm穿孔活检针在中央制造一个伤口瓣膜，穿透深度约为1–2 mm。然后，使用15号刀片手术刀和无菌带齿Allis组织镊去除伤口瓣膜的表层。伤口尺寸的差异可能影响感染结果及终点菌落形成单位（CFU）。</li>
	<li>所有样本造模完成后，用无菌镊子将其转移至24孔板插入物中。向伤口床中加入15 µL细菌接种液，随后在37 °C、含5% CO2的湿润组织培养箱中孵育24小时。</li>
	<li>若需更长的孵育时间，每隔24小时更换一次培养基，即移除原有培养基并替换为新鲜培养基，继续在相同条件下孵育。</li>
</ol>
7. 细菌载量的测定
<ol>
	<li>移除孔底部的培养基。使用无菌镊子将每个样本转移至分别装有1 mL无菌PBS的50 mL离心管中。</li>
	<li>使用细头匀浆器对样本表面进行匀浆处理。注意确保创面床与匀浆器头部直接接触。</li>
	<li>将每个样本在中高转速下匀浆35秒。匀浆过程可使细菌从创面床表面脱离，以便对细菌载量进行计数。</li>
	<li>所有样本处理完毕后，依次将每个样本涡旋振荡，再进行移液操作。以确保细菌匀浆液充分混匀。</li>
	<li>取20 µL涡旋后的匀浆液，加入含有180 µL无菌PBS的96孔板对应孔中。</li>
	<li>将每个样本的匀浆液进行连续梯度稀释至1 × 10−7，然后取10 µL稀释后的匀浆液，分别以三复孔形式接种至胰蛋白胨大豆琼脂平板上。</li>
	<li>将琼脂平板在37 °C条件下孵育18小时，随后计数菌落数量，以确定每个样本的CFU值。</li>
</ol>

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作者无任何利益冲突需要披露

抗菌药物的研发是一项重要但耗资巨大的事业，预计耗资约10亿美元，耗时约15年才能完成。超过90%的抗菌药物发现及抗菌药效的临床前研究由学术研究人员以及员工通常少于50人的中小型公司开展22。这些团队面临严重的资金限制，导致先导分子在转化研究后期阶段的失败可能带来灾难性后果。抗菌药物耐药性的上升速度已超过新型抗菌药物的开发速度，这进一步加剧了负责任地管理抗菌研究领域本已有限的投资的迫切需求23。
感染中细菌生理学的差异 体内 和 体外 实验室培养往往会导致在先导化合物筛选阶段高估活性化合物的抗菌效果。这种高估现象导致了后续转化阶段出现较高的淘汰率。目前可获得的 体外 结合了更接近感染期间细菌生理状态的抗菌功效测试平台 体内 将能够更准确地评估抗菌药物的有效性，并使研究人员在无需依赖昂贵且严格监管的动物实验的情况下，更好地控制先导化合物的优化过程。这类模型还将降低后续转化阶段的失败率，并可能提高抗菌药物研发对投资的吸引力...

皮肤感染是一个重要的全球性问题，给世界各地的医疗保健机构带来了巨大的经济负担。病原体产生的多重耐药性及生物膜形成在难愈性伤口的流行中起着关键作用1,2,3,4。因此，皮肤和软组织感染成为导致住院时间延长以及后续再入院的常见原因之一5。伤口愈合延迟对患者和医疗系统均造成高昂代价，据估计，美国每年约有650万患者受到影响。在英国，皮肤感染及其相关并发症每年导致约7.5万人死亡2,4,6。
金黄色葡萄球菌（S. aureus） 是一种常从患者伤口中分离出的严重伤口病原体2,7。多重耐药性的出现率在2000年代急剧上升。在此期间，约60%的急性细菌性皮肤及皮肤结构感染培养结果为耐甲氧西林 S. aureus1多重耐药菌株数量的不断增加 葡萄球菌在过去20年中，耐药病原体（包括其他病原体）的出现表明，迫切需要快速开发具有新型作用机制的抗生素以克服耐药性问题。
然而，自21世纪初以来，抗生素研发项目普遍面临研发周期长、成功率低的问题，仅有17%进入美国临床试验的新型抗生素最终获得上市批准8。这表明结果之间存在差异 体外 新型抗生素的测试及其临床结果。可以认为，这种差异在很大程度上源于感染过程中细菌生理状态的不同。 体内 以及在使用常规微生物学方法检测抗生素效力时 体外 临床前阶段。因此，需要开发更能代表感染过程中细菌生理状态的新型实验室方法，以提高抗生素发现项目的成功率。
目前研究皮肤感染的方法包括活体动物（例如小鼠）实验、ex vivo 皮肤模型（例如猪皮肤）以及3D组织工程皮肤模型（例如人源皮肤）9,10,11,12。活体动物实验受到严格监管，通量相对较低。在动物模型中，创伤和感染会给动物带来显著痛苦，并引发伦理问题。无论是ex vivo模型还是组织工程皮肤模型，均需获得伦理审批，遵守当地及全球法律法规（如《人体组织法案》《赫尔辛基宣言》），且组织获取困难，部分申请可能需要数年才能完成13,14。这两种模型均耗费大量人力，且需要具备丰富的专业知识以确保实验成功。一些现有的ex vivo皮肤感染模型需要在创面床中使用预接种的圆片和添加剂以促进感染；尽管这些模型非常有用，但感染过程存在局限性，因为添加剂会限制创面床作为营养来源的利用10,15,16,17。本研究中描述的模型在创面床中不使用任何添加剂，从而确保感染的病理变化和活细胞计数结果完全源于创面床作为唯一营养来源的直接利用。
鉴于对新实验方法的需求，一种新型高通量 离体 用于评估新型抗生素疗效的绵羊皮肤感染模型已得到开发。皮肤感染研究面临诸多挑战——高昂的成本、伦理问题以及无法全面呈现疾病特征的模型20,21. 离体 模型和三维组织外植模型能够更直观地展示疾病进程以及治疗手段在更具临床相关性模型中的影响。本文描述了一种新型绵羊皮肤模型的建立方法，该模型&#160;简单、可重复、具有临床相关性且通量高。选择绵羊皮肤是因为绵羊是常用于模拟感染反应的大型哺乳动物之一 体内此外，这些皮肤材料可方便地从屠宰场获得，确保研究中有稳定的皮肤供应，且其尸体未经烫洗处理，从而保证了良好的组织质量。本研究采用 S. aureus 以典型病原体为例；然而，该模型也适用于其他微生物。

<table><tbody><tr><td>24孔配套板</td><td>SLS&amp;nbsp;</td><td>353504</td><td></td></tr><tr><td>4 mm活检打孔器</td><td>Williams Medical</td><td>D7484</td><td></td></tr><tr><td>50 ml离心管</td><td>Fisher Scientific&amp;nbsp;</td><td>10788561</td><td></td></tr><tr><td>8 mm活检打孔器</td><td>Williams Medical</td><td>D7488</td><td></td></tr><tr><td>两性霉素B溶液，无菌</td><td>Sigma&amp;nbsp;</td><td>A2942</td><td></td></tr><tr><td>Color Pro Style无线理发剪</td><td>Wahl</td><td>9639-2117X</td><td>理发剪</td></tr><tr><td>双温控培养箱</td><td>SLS</td><td>OVe1020</td><td>灭菌烘箱</td></tr><tr><td>表皮生长因子&amp;nbsp;</td><td>SLS</td><td>E5036-200UG</td><td></td></tr><tr><td>乙醇</td><td>Honeywell</td><td>458600-2.5L</td><td></td></tr><tr><td>F12 HAM培养基</td><td>Sigma</td><td>N4888</td><td></td></tr><tr><td>胎牛血清&amp;nbsp;</td><td>Labtech International</td><td>CA-115/500</td><td></td></tr><tr><td>镊子</td><td>Fisher Scientific</td><td>15307805</td><td></td></tr><tr><td>脱毛膏</td><td>Veet</td><td>不适用</td><td></td></tr><tr><td>Heracell VIOS 160i</td><td>Thermo Scientific</td><td>15373212&amp;nbsp;</td><td>组织培养箱</td></tr><tr><td>Heraeus Megafuge 16R</td><td>VWR</td><td>521-2242</td><td>离心机</td></tr><tr><td>220型手持式匀浆器</td><td>Fisher Scientific</td><td>15575809</td><td></td></tr><tr><td>220型匀浆器塑料搅拌头</td><td>Fisher Scientific&amp;nbsp;</td><td>15585819</td><td></td></tr><tr><td>24孔插入式培养板，0.4 µm膜</td><td>VWR International</td><td>353095</td><td></td></tr><tr><td>重组人胰岛素</td><td>SLS</td><td>91077C-1G</td><td></td></tr><tr><td>Medium 199（MK培养基）</td><td>Sigma</td><td>M0393</td><td></td></tr><tr><td>96孔细胞培养板，Costar</td><td>Fisher Scientific</td><td>10687551</td><td></td></tr><tr><td>Multitron</td><td>Infors</td><td>不适用</td><td>细菌培养箱</td></tr><tr><td>PBS片剂</td><td>Sigma&amp;nbsp;</td><td>P4417-100TAB</td><td></td></tr><tr><td>青霉素-链霉素</td><td>SLS&amp;nbsp;</td><td>P0781</td><td></td></tr><tr><td>微孔板封板膜</td><td>Fisher Scientific</td><td>ESI-B-100</td><td></td></tr><tr><td>Safe 2020</td><td>Fisher Scientific</td><td>1284804</td><td>II级微生物安全柜</td></tr><tr><td>15号手术刀片</td><td>Fisher Scientific</td><td>O305</td><td></td></tr><tr><td>Swann Morton手术刀</td><td>Fisher Scientific</td><td>11849002</td><td></td></tr><tr><td>碳酸氢钠</td><td>Sigma</td><td>S5761-1KG</td><td></td></tr><tr><td>带齿Allis组织镊</td><td>Rocialle</td><td>RSPU500-322</td><td></td></tr><tr><td>胰蛋白酶大豆琼脂</td><td>Merck Life Science UK Limited</td><td>14432-500G-F</td><td></td></tr><tr><td>胰蛋白酶大豆肉汤</td><td>Merck Life Science UK Limited</td><td>41298-500G-F</td><td></td></tr><tr><td>Vimoba片剂</td><td>Quip Labs</td><td>VMTAB75BX</td><td></td></tr></tbody></table>

一种新型高通量 离体 用于测试新型抗生素的绵羊皮肤伤口模型

A Novel High-Throughput Ex Vivo Ovine Skin Wound Model for Testing Emerging Antibiotics

抗菌药物的研发是一个成本高昂且成功率日益降低的过程，这使得进一步投资于抗菌药物发现研究的吸引力下降。如果能够在研究人员对药物设计和制剂具有更大控制权的先导化合物优化阶段实施“快速失败、低成本失败”的策略，则可使抗菌药物的发现及后续商业化变得更加有利可图。本文介绍了一种简单、经济、高通量且可重复的ex vivo绵羊创伤皮肤感染Staphylococcus aureus&#160;模型的建立方法。该模型中细菌的生理状态模拟了实际感染过程，其增殖依赖于病原体对组织的损伤能力。通过检测到可存活细菌数量相较于接种量显著增加，可确认伤口感染的成功建立。该模型可作为在先导优化阶段评估新型抗菌药物有效性的平台。可以认为，该模型的可用性将为抗菌药物研发人员提供一种“快速失败、低成本失败”的研究工具，有助于提高后续动物实验的成功率。此外，该模型还将促进动物实验使用的减少与优化，并最终推动针对皮肤及软组织感染的新型抗菌药物更快、更经济地向临床转化。

在建立伤口感染模型之前，确定一种对皮肤进行灭菌的途径具有挑战性。难点在于如何在不损伤不同皮肤层的情况下实现皮肤灭菌，因为皮肤层的损伤可能会对感染结果产生非预期的影响。为了确定合适的灭菌方案，尝试了不同处理方法及其作用时间，如表1所述。污染情况通过皮肤样本在MK培养基中维持48小时后是否出现浑浊来判断。组织完整性则通过处理后立即进行苏木精-伊红（H&amp;E）染色的组织学检查进行监测（图1）。结果显示，使用二氧化氯处理30分钟在有效且可重复地灭菌皮肤组织的同时，能够较好地保持组织完整性。
在实验设置中，将受损的无菌组织置于24孔插入式培养板的顶端室中，保持气液界面状态（图2A）。尝试了两种不同的损伤方法：一种是瓣膜切除法，即使用穿孔活检工具对组织造成损伤，并结合15号手术刀片和无菌齿状Allis组织镊去除受损组织的表层；另一种是划痕法，仅使用穿孔活检工具对组织造成损伤。尽管划痕模型在24小时后平均菌落形成单位（CFU）数量较高，但...

该方案描述了一种逐步建立的详细方法 离体 感染的绵羊皮肤伤口模型 金黄色葡萄球菌该高通量模型能更真实地模拟感染过程 体内 与传统微生物学技术相比，为研究人员提供了一个具有生理相关性的平台，用于评估新型抗菌药物的有效性。

抗菌药物的研发是一个成本高昂且成功率日益降低的过程，这使得在抗菌药物发现领域的进一步投资……

该模型将使研究人员在关键的临床前阶段能够更准确地确定新型制剂的抗菌效果，并为研究人员提供对药物设计和制剂的更大控制权。该模型可在具有代表性的伤口环境中实现快速且可重复的实验结果。它减少了对专门繁育动物的需求，并有助于加快局部抗菌药物针对伤口感染向临床应用的转化。主要挑战在于污染和操作灵巧性。严格的无菌技术和在组织处理过程中的耐心至关重要；该方法的成功需要精确且有目的性的瓣膜切除。首先将镊子暴露于200摄氏度干热灭菌一小时，以对其进行消毒。使用前将所有玻璃器皿在 121 摄氏度下高压灭菌 15 分钟。将约 100 毫升浓度为 200 PPM 的二氧化氯溶液倒在样品区域，对灯的前额部位进行消毒。使用电动剪毛器剃除前额部位的毛发，随后用 200 毫升浓度为 200 PPM 的二氧化氯溶液清洗。使用乙醇和蓝色卷纸擦拭该区域，并在取样区域覆盖脱毛膏。35分钟后，使用刮刀轻轻刮去脱毛膏，并评估取样区域。如果仍有大量毛发残留，请重复脱毛过程。用200毫升二氧化氯溶液冲洗洁净的取样区域，随后用乙醇和蓝色吸水纸擦拭。使用无菌的8毫米活检打孔器从准备好的区域切取8毫米皮肤样本。然后用无菌镊子和15号刀片手术刀取下样本，并确保去除所有皮下脂肪。将样品放入装有无菌 PBS 的无菌 0.5 升广口瓶中。然后转移至装有 50 毫升 200 PPM 二氧化氯溶液的无菌 50 毫升离心管中。倒置管子两次，静置消毒 30 分钟。将样品转移至含有40毫升无菌PBS的50毫升离心管中。PBS洗涤后，将每块皮肤样品分别放入24孔板的独立孔中。在孔中加入350微升预热的培养基，同时保持样品处于气液界面。将24孔板用透气性板封膜密封，然后置于含5%二氧化碳、37摄氏度的湿化组织培养箱中孵育24小时。孵育结束后，移除培养基，并用500微升无菌PBS冲洗样品。随后将样品在无抗生素培养基中于5%二氧化碳、37摄氏度条件下继续培养24小时，以去除样品中残留的抗生素。如果无抗生素培养基中出现浑浊或真菌污染，则丢弃该样品。接下来，准备一个50毫升离心管，加入10毫升无菌胰蛋白胨大豆肉汤。然后从新鲜的金黄色葡萄球菌（S. aureus）琼脂平板上挑取数个金黄色葡萄球菌菌落接种至该肉汤中，在37°C、150 RPM条件下振荡培养18小时。将离心管在 4,000 G 条件下离心 3 分钟后，弃去上清液，并用 10 毫升无菌 PBS 重悬细胞沉淀。使用无菌 PBS 将接种物调整至 600 纳米波长下的光密度为 0.6 之前，重复 PBS 洗涤两次。通过手动活菌平板计数确认接种量。为感染皮肤样本，准备新鲜的24孔板，每孔加入400 µL预热的无抗生素培养基，并使用无菌镊子放入24孔插入式培养小室。移除皮肤样本中的培养基，用500 µL无菌PBS洗涤样本，然后吸去洗涤液。使用无菌镊子轻轻将样本固定在孔底。用直径四毫米的穿刺活检针穿透皮肤样本，深度约为一至两毫米，制作一个中央伤口瓣膜。然后使用15号刀片手术刀和带齿的无菌Allis组织镊去除伤口瓣膜的表层组织。所有样品接种损伤后，使用无菌镊子将其转移至24孔板小室中。在37摄氏度、湿润的组织培养箱中孵育24小时之前，用移液器向伤口区域加入15微升细菌接种液。若需更长的孵育时间，则需移除培养基，每隔24小时更换一次新鲜培养基，并在相同条件下继续孵育培养板。为测定细菌载量，移除孔底部的培养基。使用无菌镊子将每个样本转移至分别装有1毫升无菌PBS的50毫升离心管中。随后，使用细头匀浆器对样本表面进行匀浆处理，使细菌从创面表面脱离。确保创面基底与匀浆器的顶端直接接触。所有样本处理完毕后，将每份样本涡旋混匀，然后取20 µL匀浆液转移至含有180 µL无菌PBS的96孔板的相应孔中。将每份样本匀浆液连续梯度稀释至1×10⁻⁷，取10 µL稀释后的匀浆液，重复三份，分别接种于胰蛋白酶大豆琼脂平板上。将胰蛋白胨大豆琼脂平板在37摄氏度下孵育，18小时后计数菌落数量，以确定每个样本的菌落形成单位（CFU）。通过不同处理方法及不同处理时间，确定了合适的皮肤消毒方案。处理后立即进行组织学检测，并采用苏木精和伊红染色，以监测组织完整性。二氧化氯处理30分钟是最有效的处理方法，可重复地对皮肤组织进行灭菌，同时保持组织完整性。感染后48小时，在组织创面可见明显的白色薄膜。尽管划痕模型在24小时后携带的平均菌落形成单位（CFUs）数量较高，但皮瓣切除致伤技术产生的结果更为一致。48小时后，从受损组织中回收的细菌菌落形成单位（CFU）数量约为接种物的100倍，表明感染成功建立。对感染组织进行革兰氏染色的组织学切片显示，伤口床中存在金黄色葡萄球菌（S.aureus）细胞，而在未感染组织的切片中则未见此类细菌。完成该操作后，可进一步开展免疫组织化学分析以研究组织反应，采用改良革兰氏染色法观察细菌的定位分布，或在抗菌处理后进行活菌平板计数以评估抗菌效果。对于开发新型抗菌药物的研究人员而言，该模型将提供更优的先导化合物优化控制，减少对昂贵且监管严格的动物实验的依赖，并推动抗菌药物快速向临床应用转化。

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Research

科研

JoVE Journal

Immunology and Infection

免疫学与感染

用于测试新兴抗生素的新型高通量 离体 绵羊皮肤伤口模型

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一种用于研究针对细菌病原体免疫反应的小鼠皮肤伤口感染模型

该视频展示了生成一个 离体 感染绵羊皮肤模型...

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来到光的一侧：体内监测糖尿病无毛小鼠模型慢性伤口中铜绿假单胞菌的生物膜感染

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使用背部皮下聚乙烯醇海绵植入和尾部皮肤切除伤口模型评估急性伤口愈合

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建立猪离体角膜模型用于研究治疗细菌性角膜炎的药物方案

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人皮肤离体伤口模型及全层染色方法用于精确评估皮肤修复

对抗生素耐药的慢性伤口对医疗系统构成重大威胁。生物膜感染具有顽固性和破坏性，可导致伤口功能闭合不良。我们报道了一种具有临床相关性的猪源性全层慢性伤口生物膜感染模型。该模型在机制研究以及干预措施测试方面均具有强大应用价值。...

生物膜感染与隐性伤口的猪模型

405 nm 蓝光 LED 设备在基于胶原蛋白的合成皮肤模型上评估时，对多种伤口病原体表现出抗菌效果。这一简化方法 体外...

使用基于胶原蛋白的合成皮肤模型研究蓝光LED装置对伤口病原体的抑制作用

了解离体绵羊皮肤伤口模型用于测试新型抗生素的方法。该模型通过金黄色葡萄球菌感染模拟体内伤口环境，为抗菌药物临床前研究提供快速可重复的结果，同时减少对实验动物的依赖。

一种新型高通量离体用于测试新型抗生素的绵羊皮肤伤口模型

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