关节液分析用于识别骨关节炎

关节液分析可在初步评估肌肉骨骼症状和关节积液患者时，揭示炎症程度以及是否存在致病性晶体。该技术的主要优势在于其简便性和可靠性。通过几个步骤，临床医生即可获得有关患者疾病的重要诊断信息。

特异性晶体的鉴定对于诊断和治疗至关重要。尿酸盐晶体提示痛风，而焦磷酸钙及其他钙盐晶体则提示钙相关性关节病或更严重的骨关节炎。首先，取自患者肿胀关节穿刺术中收集的滑膜液样本。

标注样本的体积（以毫升为单位），并分别转移至含有抗凝剂EDTA的试管和另一支不含任何添加剂的试管中。对于疑似感染的情况，需无菌操作将数毫升滑膜液样本转移至培养瓶中，用于微生物学检测。为进行样本的肉眼观察，取一支含有样本的试管，判断样本的颜色，其颜色范围可从浅黄色至深黄色不等。

记录是否存在血液。通过在背光下观察样本，并通过确定透过装有样本的试管阅读印刷页面的难易程度，来判断样本的透明度等级。然后，通过将样本从一次性移液管中滴下，评估其黏稠度。

虽然细长液丝的出现表明黏度较高，而液滴的形成则提示黏度较低。通过将试管置于有背景光的条件下观察，检查样品中是否存在任何颗粒物质，包括组织碎片或纤维蛋白。为了测定白细胞总数，使用马氏-波坦吸管从含有EDTA的试管中吸取0.5微升样品。

使用同一支移液器吸取9.5 µL的0.1%亚甲蓝溶液。通过轻轻颠倒移液器将样品与亚甲蓝溶液混合。在将混合液倒入血细胞计数板的计数室之前，弃去最初几滴。

现在计数九个方格中任意两个相邻方格内的细胞数，并将所得数值乘以100。以每立方毫米的白细胞数表示总白细胞计数。使用不含任何添加剂的试管中的滑膜液样本，测定滑膜液样本的白细胞分类计数。

为了使用活体染色法测定细胞分类计数，取一片预先涂有结晶紫和亚甲蓝的即用型载玻片，在载玻片中央滴加一小滴样本。接着，用盖玻片覆盖样本液滴，并在盖玻片上滴加一滴显微镜镜油。若采用传统染色法估算细胞分类计数，首先在洁净载玻片的一端滴加一小滴样本。

现在使用另一张载玻片或盖玻片，向前推动将液滴沿载玻片均匀铺开。让涂片在空气中自然干燥。将含有空气干燥涂片的载玻片置于1,000倍油镜下进行镜检。

通过连续计数100个细胞，区分嗜多形核细胞、单核细胞和淋巴细胞，以估算细胞分类计数。用浸有乙醇的光学级或软纸擦拭玻璃载玻片进行清洁。取少量未与任何添加剂混合的样品滴加于玻璃载玻片上，盖上盖玻片，然后将载玻片置于显微镜下观察。

使用低倍物镜在显微镜下对玻片进行聚焦，并用40倍物镜在明场下仔细观察。在细胞内外寻找晶体，根据其大小和形状（可能为菱形、针状或杆状）进行识别。然后将偏振滤光片插入光源与标本之间。

为了获得暗背景，旋转偏振器，使其光轴与检偏器垂直。一旦确定了双折射晶体，将补偿器插入偏振器与样品之间，并沿晶体光轴方向平行或垂直移动。观察晶体所呈现的颜色。

进行茜素红染色时，取一滴滑膜液样本与等体积预先配制的茜素红溶液在洁净的载玻片上混合。盖上盖玻片后，在显微镜下以400倍放大倍数观察以识别晶体。滑膜液样本的宏观特征可提示炎症程度。

呈淡黄色且透明度较高的样本通常与非炎症性状况（如骨关节炎）相关。相反，颜色深黄且外观浑浊的样本则提示存在细胞、碎片、透明质酸及纤维蛋白片段，这些成分与炎性渗出液相关。在骨关节炎患者的滑膜液样本中观察到的白细胞主要为单核细胞及其他单核细胞类细胞，如滑膜细胞。

在滑膜液样本中检测到焦磷酸钙晶体，表明炎症性细胞因子水平相对较高。此外，茜素红染色阳性揭示了样本中存在碱性磷酸钙晶体。在普通光线下仔细检查载玻片以寻找晶体时，这一点非常重要。

请注意，焦磷酸盐晶体通常双折射较弱，在偏振光下可能被遗漏。滑膜液中钙盐晶体的存在及其与更严重疾病形式的关联，已促使研究人员探索骨关节炎发病机制及进展过程中的新途径。