机械通气仔猪肾小球滤过率的经皮测量

TGFR 可对肾功能进行实时评估。与传统标志物相比，TGFR 可在同一批动物中多次监测肾功能的变化。此外，该技术无需采集血液或尿液样本。

随着异种移植技术的最新进展，将会有更多研究采用猪模型。因此，我们认为该工具对于转化研究至关重要，并且在未来几年更有可能在临床上得到应用。实验在出生后三至七天的仔猪上进行。

动物容易出现低体温、低血容量以及由手术引起的其他并发症，因此整个手术过程中需要密切监测。此外，该方法需要经过练习，因其涉及气管造口术和血管插管操作。

完成动物术前准备后，使用手术刀在左侧做一条5至6厘米长的旁正中垂直切口，因为猪的盲肠位于左侧腰腹部。逐层分离腹壁组织，注意避免损伤浅表腹壁血管。切开腹膜层后，使用拉钩扩大腹腔内结构的暴露视野，并在腹腔左上象限识别螺旋结肠。

为了定位盲肠，沿结肠旋支向尾侧和背侧追踪。盲肠基底部的结肠旋支与髂骨相连。在回盲交界处远端稍远处结扎盲肠。

使用18号针头在盲肠上制造七个穿刺孔，并将粪便挤入腹膜腔。使用3/0丝线缝合腹腔各层，可采用单纯间断或连续缝合。如有条件，也可使用缝合器关闭皮肤层。

结扎盲肠8小时后，开始进行经皮肾小球滤过率（GFR）测量。使用MB Service软件3.0版调节GFR设备的采样速率。通过USB连接线将经皮GFR设备连接至计算机。

打开 MB Service 软件。点击连接，将时间调整为 4,000 毫秒。点击写入以保存设置，然后点击断开连接。

将带透明窗口的双面 adhesive 贴片粘贴至设备的一侧。将电池连接到设备上，确保发光二极管位于透明窗口下方，以便检测示踪剂。电池连接后，立即将带 adhesive 的设备固定到位。

确保其固定牢固。由于仔猪已处于深度麻醉状态，可能无需使用胶带即可固定装置。用生理盐水配制50毫克/毫升的FITC-锡尼司丁溶液，并将适当剂量吸入注射器中。

将装有药物的注射器连接至三通旋塞阀的一侧，另一侧连接生理盐水冲洗液。推注FITC-锡尼司丁，随后立即推注5 mL生理盐水团注，然后关闭通向仔猪静脉的三通旋塞阀。保持装置与仔猪连接四小时。

为避免在此期间出现运动伪影，应按照文中的描述使仔猪保持麻醉状态。四小时结束后，移除设备并立即断开电池连接。使用供应商提供的USB连接线将经皮肾小球滤过率（GFR）设备连接至计算机。

打开 MB 实验室软件以从设备中获取数据。要保存原始数据，请单击连接并选择读取，然后等待设备完成读取过程。

单击重命名，然后单击保存。根据手册说明，在分析软件中处理并评估已保存的数据。简要步骤如下：打开 MB Studio，单击加载以导入已保存的数据。

使用自动标记调整偏移量、起始和停止位置。必要时去除伪影。选择三室模型，点击拟合以获得显示荧光素-左旋菊粉清除率（单位：分钟）的读数，并利用此方程计算肾小球滤过率（TGFR）。

假手术组和脓毒症组动物的体重具有可比性。术后12小时，脓毒症组仔猪血清中C反应蛋白（脓毒症标志物）水平升高。图中显示了假手术组和脓毒症组仔猪术后12小时的FITC-辛丝特林清除曲线。

肾功能受损的脓毒症猪表现出曲线下面积增加。脓毒症仔猪对FITC-辛丝林的清除能力下降，提示存在急性肾损伤。假手术组和脓毒症组中FITC-辛丝林的平均半衰期分别为114分钟和537分钟。

假手术组的平均肾小球滤过率显著高于脓毒症组。假手术组在0小时和12小时的血清肌酐水平相似。然而，脓毒症猪在12小时后肌酐水平显著升高。

确保电池正确连接至仔猪。若电池脱落，设备将无法工作。尽量将FITC-sinistrin以一次流畅的推注方式注入，以避免出现多个峰值。

同时，确保设备正确连接至仔猪，以防止运动伪影。通过实时测量肾小球滤过率（GFR），我们能够准确评估肾功能，以检测早期急性肾损伤（AKI），并可能评估正在研究中的治疗药物。