大鼠胫神经瘤转位模型中的手术和行为测试

这种方法有助于找到更好的神经瘤疼痛治疗方法。这种技术的优点是，您可以在同一代表模型中独立测量神经瘤疼痛和全身性疼痛。TNT模型特别适合神经瘤疼痛的测试，因为神经瘤本身可以用冯弗雷单丝机械刺激。

首先将麻醉的大鼠放在背上，头部向左或向右。将要手术的腿放在外科医生附近。将后下肢外旋，使内踝朝上。

在将大鼠置于6倍放大倍率的立体手术显微镜下之前，用至少三轮交替的碘基磨砂膏和酒精对剃光区域进行消毒。找到膝盖，用手术刀在后爪内侧从小腿中部到脚踝轻轻切开两到三厘米的纵向切口。如果需要，用显微剪刀进一步打开皮肤和皮下，直到肌肉层可见。

将浅表神经血管束识别为两到三条可以在肌肉层上自由移动的白色、紫色或红色线。保持神经血管束完整。从该束中解剖后部。

接下来，解剖以打开腓肠肌之间的筋膜。在肌肉筋膜之间，可以找到与胫神经更深的神经血管束，其大小约为浅表神经血管束的三倍。使用胫骨作为额外的地标，因为胫神经就在胫骨的后方飞行。

要从周围的血管束中分离出胫神经，请钝性地移动胫神经并切开在移动胫神经时显示一些拉伸的暴露组织。一旦整个胫神经暴露在外，将肌肉层放回原处以避免神经脱水，直到胫前皮肤从皮下肌肉中剥离。要从皮下肌肉层解剖胫前皮肤并形成皮下隧道，请使用钝性显微手术工具将皮肤抬起并将钝尖推入平行于皮肤的组织。

确保隧道末端位于胫骨前或侧面，以便于进入该区域以检测神经瘤。在踝关节附近的远端切割胫神经后，将显微镜放大倍率更改为 10 倍或 16 倍，并识别踝关节附近切口近端的胫神经外神经。或者，在胫神经更近端分叉的情况下，确定踝关节附近切口近端的内侧和外侧种植支的表神经。

小心放置一个 8-0尼龙缝合近端神经末梢的外神经，用镊子夹住外神经，并将针头放在神经和外神经之间，咬合约0.5毫米。在皮下隧道末端用针头皮下咬一口，然后拉动缝合线将神经横向转置到皮下隧道中。通过打结固定缝合线。

放置一条较厚的4-0缝合线，深色冲洗到固定的神经末梢，而不会穿透皮肤。确保缝合线在皮肤外可见。检查移动爪子和肌肉后神经是否保持在原位。

在 4-0 上用稍长的缝合端切断缝合线末端，然后在 8-0 上切断缝合端缝合。将显微镜的放大倍率改回6倍，并使用8-0用表皮内缝合线关闭皮肤缝合。使用棉签用0.9%氯化钠轻轻清洁皮肤。

如果房间很冷，请在干净的笼子的一部分下放置加热垫，并将老鼠放在笼子里的纸巾下，以舒适的姿势。确保轻松获得食物和水。为了刺激无菌神经的超敏反应，将单丝涂抹在靠近头发边界的侧面，不要接触脚垫。

为了刺激胫神经的低敏感性，将单丝应用于后爪的种植体表面的中间。对于神经瘤部位测试，握住大鼠的鼻子指向肘部折叠。如果右手握住老鼠，他的左后爪应该自由地悬挂在右手拇指和食指之间。

在确认大鼠在基线保持时保持平静和舒适后，将 15 克单丝轻轻地放在暴露的后爪的前胫骨表面上。手术后，将 15 克的单丝放在可见的缝合线上，并对单丝施加足够的力以弯曲头发并保持一秒钟。神经瘤部位的Von Frey显示，在基线时，大鼠对15克单丝应用的10%至15%有反应。

胫神经瘤转位手术一周后，反应率从45%增加到50%在对侧，术后反应与基线相似。大约20%的大鼠没有发生疼痛的神经瘤，与基线相比，反应率没有增加。在手术后12周的横断和转位胫神经残端结束时，所有大鼠都发展为神经瘤。

胫神经横断降低了由胫神经支配的后爪种植侧中部的机械敏感性。术后1周出现的低敏感性与术后3周的对侧和基线显著不同，一直持续到手术后12周。在受完整腓肠神经支配的后爪播种侧侧，大鼠术后1周与对侧和基线发生显著不同的机械超敏反应。

手术后持续12周。在对侧爪，与基线相比，腓肠或胫神经支配区域的机械敏感性不受影响。请记住创建一个偏离胫神经的长度，以实现横向转位的运动范围。

还要记住用深色缝合线标记这个神经瘤部位。