Name: 在固体培养基上长期培养单个 秀丽隐杆线虫 ，用于纵向荧光监测和厌恶干预 (视频) | JoVE Journal
Uploaded: 2022-12-02T14:30:00.000+00:00
Duration: 7 min 25 s
Description: 了解在固体培养基上长期培养秀丽隐杆线虫的方法，用于纵向荧光监测和寿命健康跨度追踪。该方案支持厌恶干预与基因动态研究，为衰老研究提供可靠工具。

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本工作由美国国立卫生研究院（NIH）R35GM133588 项目资助，授予 G.L.S.，&#160;NIHT32GM008659 培训资助项目（授予 L.E.），美国国家医学科学院 Catalyst 奖（授予 G.L.S.），以及由亚利桑那州理事会管理的亚利桑那州技术和研究倡议基金。

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作者声明不存在任何需要披露的利益冲突。

在此，我们介绍一种新型培养系统，该系统采用原本用于人类白细胞抗原组织分型检测的微孔板，以实现单个细胞的分离与表征 秀丽隐杆线虫 在与基于琼脂的NGM标准培养基环境相似的固体培养基中，随时间推移 秀丽隐杆线虫 研究。该系统可兼容多种干预措施，包括饮食限制、外源性药物处理、化学或环境应激物刺激以及RNAi。此外，还可实现对荧光生物标志物的长期纵向监测 体内 在个体动物中。在群体中追踪个体动物的能力，使得能够评估具有明显时间成分的表型在个体内部的变异性，包括行为、发病过程、对压力条件的反应以及健康状况的下降。同时，该方法还可将群体中个体早期生命特征的变化与晚期生命结局（包括寿命和健康状况）相联系。与其它单虫成像技术类似，这种基于微孔板的培养系统可实现对个体动物在整个生命周期中多个时间点的监测，同时避免了潜在的混杂因素，例如当线虫在液体环境中培养时所引发的应激反应通路激活（许多微流控装置即存在此类情况）。因此，该培养系统所获得的数据可更直接地与以往大多数研究结果进行比较 秀丽隐杆线虫 在固体培养基上进行的工作。近期的技术进步使得许多方面的自动化成为可能 秀丽隐杆线虫...

C. elegans 是遗传学、细胞生物学和分子生物学研究中一种强大的模式生物，因为它们易于在实验室中培养，具有较短的世代时间和寿命，与哺乳动物在蛋白质序列上具有高度同源性，并且其透明的身体结构使得能够在活体（in vivo）中直接观察荧光蛋白和染料的分布1。由于 C. elegans 长期被广泛用作发育生物学、衰老等多个研究领域的重要模型系统，其生长与发育过程已被深入理解，基因组已实现全序列测定，同时已开发出一系列强大的遗传学工具，包括全基因组范围的RNAi饲喂文库，以及数千种突变体和转基因品系。传统上，C. elegans 在固体琼脂线虫生长培养基（NGM）上以群体形式培养，表型通过直接观察或成像结合后续分析进行人工评估。荧光显微镜可用于检测个体 C. elegans 中由染料或转基因表达的荧光标签所呈现的多种分子表型。荧光成像通常需要将线虫固定或麻痹在载玻片上的薄层琼脂糖垫中，该过程具有侵入性，且常导致动物死亡。此外，该方法还需使用化学试剂（如左旋咪唑或叠氮化钠），这些试剂可能干扰所研究的分子过程2,3。上述方法能够获取涵盖多种表型的横断面群体水平数据，但无法实现对单个动物随时间的连续追踪。
近年来，多种方法被开发用于培养分离的 C. elegans，使研究人员能够利用新型成像技术捕捉动物在时间进程中的生理和分子表型的动态变化。其中一类 C. elegans 培养方法是微流控装置，包括 WormFarm4、Nemalife 芯片5 以及 Chronis 等人开发的“行为”芯片6，以及其他多种类似系统7,8,9。与之相关的是基于液体的培养方法，该方法使用多孔板对单个线虫或小群体随时间进行表征10,11。微流控和微孔板系统可对 C. elegans 的表型响应进行精确的定量测量，甚至达到单个个体水平，但其培养环境存在一个关键限制。迄今为止，绝大多数关于 C. elegans 的研究，尤其是在衰老领域，都是在基于固体琼脂的培养基上完成的。液体培养会导致 C. elegans 持续游泳，构成一种独特的环境背景，可能改变其基本生物学特性。例如，与在基于琼脂的固体 NGM 培养基上培养的个体相比，液体培养的线虫其脂肪含量和基因表达发生显著改变——特别是与应激反应相关的基因12,13。另一类单个动物成像方法则采用聚二甲基硅氧烷（PDMS）装置，将单个个体隔离在固体培养基上，旨在更接近模拟线虫在培养皿中群体培养时所经历的标准环境。WorMotel 是一种具有 240 个孔的 PDMS 装置，专为在固体培养基上培养单个个体而设计。每个孔中填充了使用低熔点琼脂糖替代琼脂的改良 NGM 培养基，并接种细菌作为食物，从而构建出类似于常规培养皿系统中常用的固体培养环境。孔壁呈圆形，使得无论动物位于孔内何处均可被成像（避免了多孔板中动物靠近直角孔壁时造成的视觉遮挡）。在每个孔周围设置的狭窄沟槽中加入硫酸铜，用作驱避剂以防止动物逃离孔洞14,15。该方法的一个局限性在于，当存在厌恶性环境条件（如饮食限制、致病性细菌或诱导细胞应激的化学物质（例如百草枯））时，硫酸铜无法有效阻止线虫逃逸。
另一种使用固体培养基的系统是线虫围栏（Worm Corral），该系统利用水凝胶在载玻片上为每条线虫创建一个小型密闭环境，从而实现对单独隔离的个体进行长期监测16一个关键的局限性在于，动物必须以卵的形式被密封在环境中，因此需要使用无菌动物以防止繁殖，并将药物处理限制为单次给药。在WorMotel系统中，可通过两种方式实现多剂量药物实验：一是在将线虫转移至装置前进行多轮暴露处理，二是在实验过程中向孔中局部追加药物；然而，在后一种情况下，向已有孔中追加药物后的实际暴露剂量难以精确量化，且取决于药物降解的速度。WorMotel和Worm Corral系统均适用于明场或暗场成像，可用于获取与活动性及动物生理状态（如生长与发育）相关的信息。尽管这些系统也可用于荧光监测，但根据我们的经验，用于构建其他单虫成像技术的聚二甲基硅氧烷（PDMS）材料容易产生微气泡、捕获颗粒物以及其他微小异常，从而导致不规则的荧光伪影，干扰荧光信号的一致性观察与定量，尤其是在GFP（绿色荧光蛋白）的发射波段——这是最常用的荧光染料——的检测中尤为明显。 秀丽隐杆线虫 研究。迄今为止，活体荧光成像的 秀丽隐杆线虫 以纵向方式研究个体动物主要依赖于微流控装置17.
此处，我们介绍一种用于培养单个细胞的新型方法 秀丽隐杆线虫 在可兼容厌恶性干预和直接荧光成像的固体培养基上进行。该方法在概念上与其他单虫成像技术相似，不同之处在于用 commercially available 聚苯乙烯微孔板（最初为微细胞毒性检测开发，也常称为 Terasaki 板）替代了定制的 PDMS 芯片。18这些微型培养板的孔中可填充固体培养基并接种细菌食物，从而高度模拟线虫在标准固体NGM培养条件下所处的环境。每个孔周围均被棕榈酸而非硫酸铜形成的厌恶屏障包围。棕榈酸常用于防止线虫在标准平板群体培养中逃离固体培养基，特别是在涉及厌恶环境刺激（如饮食限制或化学应激物暴露）的实验中。该微型培养板还具有极低且稳定的荧光背景，可直接在培养环境中对线虫进行荧光成像。这一新型的单虫固体琼脂培养系统不仅支持在整个生命周期中对个体线虫进行追踪，实时监测其生长、发育、活动及寿命，还可兼容直接荧光显微观察。由于线虫无需麻痹或固定即可成像， 在体 荧光生物标志物可在单个动物个体上进行纵向定量，且动物可持续保留在培养基中，从而能够观察每个个体生命周期内的动态变化。该培养系统还可与当前一代用于追踪寿命及其他健康指标的自动化系统兼容。14,19我们提供了一种培养单个的详细方案 秀丽隐杆线虫 在此基于微孔板的系统中，讨论潜在的陷阱与故障排除方法，并探讨该系统相较于其他系统的优缺点，特别是更新和优化后的WorMotel实验方案。15.
每个单虫培养环境均由一个微型培养盘组成，该培养盘通过定制的3D打印适配器固定在标准单孔培养板内（图1A）。孔内填充低熔点琼脂糖线虫生长培养基（lmNGM），接种浓缩的细菌作为食物来源，并在周围涂覆棕榈酸以防止线虫逃逸（图1B）。微型培养盘与单孔板壁之间的空隙填充饱和水凝胶晶体，以维持湿度（图1B）。培养板盖内表面涂覆去垢剂，以防止冷凝水形成。每个孔中加入一条线虫，单孔培养板用Parafilm密封，以保持湿度并允许氧气交换。一名熟练的研究人员可同时平行制备最多六个微型培养盘。

<table><tbody><tr><td>3D打印的Terasaki插件</td><td>定制打印公司</td><td>Robot_Terasaki_tray_insert_10-20&lt;br/&gt; -2021.STL</td><td>使用标准PLA增强型细丝，FDM打印，喷嘴尺寸0.6 mm</td></tr><tr><td>AirClean系统AC624LF垂直层流通风柜</td><td>菲舍尔科技公司</td><td>36-100-4376</td><td></td></tr><tr><td>胰蛋白胨</td><td>赛默飞世尔科技公司</td><td>211677</td><td></td></tr><tr><td>CaCl&lt;sub&gt;2&lt;/sub&gt;</td><td>Acros有机物</td><td>349615000</td><td></td></tr><tr><td>&lt;em&gt;秀丽隐杆线虫&lt;/em&gt; N2</td><td>秀丽隐杆线虫遗传中心（CGC）</td><td>N2</td><td>野生型菌株</td></tr><tr><td>羧苄青霉素</td><td>Goldbio</td><td>C-103-25</td><td></td></tr><tr><td>胆固醇</td><td>ICN生物医学公司</td><td>101380</td><td></td></tr><tr><td>&lt;em&gt;大肠杆菌&lt;/em&gt; OP50&amp;nbsp;</td><td>秀丽隐杆线虫遗传中心（CGC）</td><td>OP50</td><td>&lt;em&gt;C. elegans&lt;/em&gt;的标准实验室食物</td></tr><tr><td>乙醇</td><td>密理博公司</td><td>ex0276-4</td><td></td></tr><tr><td>菲舍尔Vortex Genie 2涡旋振荡器</td><td>菲舍尔科技公司</td><td>G-560</td><td></td></tr><tr><td>FUdR&amp;nbsp;</td><td>研究产品国际公司</td><td>F10705-1.0</td><td></td></tr><tr><td>吸水性水凝胶晶体&amp;nbsp;</td><td>M2高分子技术公司</td><td>型号S</td><td>型号S超强吸水性聚合物</td></tr><tr><td>异丙基-&amp;szlig;-D-硫代半乳糖吡喃糖苷（IPTG）</td><td>GoldBio</td><td>I2481C100</td><td></td></tr><tr><td>K&lt;sub&gt;2&lt;/sub&gt;HPO&lt;sub&gt;4&lt;/sub&gt;</td><td>菲舍尔化学</td><td>P288-500</td><td></td></tr><tr><td>Kimwipes纸巾</td><td>KimTech</td><td>34155</td><td>实验用擦拭纸</td></tr><tr><td>LB肉汤，Lennox配方</td><td>BD Difco</td><td>240230</td><td></td></tr><tr><td>Leica K5 sCMOS黑白相机</td><td>徕卡显微系统公司</td><td>11547112</td><td></td></tr><tr><td>Leica M205 FCA荧光体视显微镜</td><td>徕卡显微系统公司</td><td>10450826</td><td></td></tr><tr><td>低熔点琼脂糖</td><td>研究产品国际公司</td><td>A20070-250.0</td><td></td></tr><tr><td>MgSO&lt;sub&gt;4&lt;/sub&gt;&amp;nbsp;</td><td>菲舍尔化学</td><td>M-8900</td><td></td></tr><tr><td>NaCl</td><td>菲舍尔生物试剂</td><td>BP358-1</td><td></td></tr><tr><td>Nunc OmniTray单孔板</td><td>赛默飞世尔科技公司</td><td>264728</td><td></td></tr><tr><td>制霉菌素</td><td>西格玛公司</td><td>N1538</td><td></td></tr><tr><td>棕榈酸</td><td>Acros有机物</td><td>129700010</td><td></td></tr><tr><td>纸巾</td><td>Coastwide Professional</td><td>365374</td><td></td></tr><tr><td>Parafilm M封口膜</td><td>Parafilm</td><td>16-101</td><td></td></tr><tr><td>Stratagene UV Stratalinker 2400</td><td>Stratagene</td><td>400075</td><td>紫外交联仪</td></tr><tr><td>Terasaki板（Lambda）</td><td>One Lambda</td><td>151431</td><td></td></tr><tr><td>Thermolyne Dri-bath干浴器</td><td>Thermolyne</td><td>DB28125</td><td></td></tr><tr><td>Tween&amp;nbsp;</td><td>赛默飞世尔科技公司</td><td>J20605-AP</td><td></td></tr></tbody></table>

长期培养个体细胞 秀丽隐杆线虫 在固体培养基上进行纵向荧光监测和厌恶干预

Long-Term Culture of Individual Caenorhabditis elegans on Solid Media for Longitudinal Fluorescence Monitoring and Aversive Interventions

Caenorhabditis elegans 被广泛用于研究衰老生物学。在 C. elegans 衰老研究中的常规做法是将线虫群体培养在固体线虫生长培养基（NGM）上，从而高效地收集群体水平的生存数据及其他生理表型数据，并定期取样亚群以定量荧光生物标志物。该方法的局限性在于无法（1）对个体线虫进行长期追踪，以建立感兴趣表型的年龄轨迹；以及（2）在培养环境中直接监测荧光生物标志物。其他替代性培养方法采用液体培养或微流控技术对个体动物进行时间序列监测，部分情况下包括荧光定量，但其代价是培养环境与固体NGM在情境上存在显著差异。WorMotel 是一种先前报道的微加工多孔装置，可用于在固体NGM上培养分离的线虫。每条线虫被维持在一个含有固体NGM的孔中，孔周围由充满硫酸铜的护城河包围，硫酸铜是一种对 C. elegans 具有接触驱避作用的物质，从而实现对个体动物的纵向监测。我们发现，当施加衰老研究中常见的厌恶干预（包括饮食限制、致病菌和诱导细胞应激的化学试剂）时，硫酸铜不足以阻止线虫逃逸。此外，这些多孔装置由聚二甲基硅氧烷（PDMS）模制而成，会在荧光成像中产生较高的背景伪影。本实验方案描述了一种新方法，利用市售的聚苯乙烯微孔板（最初设计用于人类白细胞抗原（HLA）分型）在固体NGM上培养分离的线虫，可在整个生命周期内测量生存率、生理表型和荧光信号。棕榈酸屏障可防止线虫逃逸，即使在存在厌恶条件的情况下亦然。每块微孔板最多可培养96条动物，且可轻松适应多种实验条件，包括饮食限制、RNA干扰（RNAi）和化学添加剂，并兼容自动化系统以采集寿命和活动数据。

本文所述基于微培养板的单虫培养环境可用于监测多种表型，包括寿命与健康寿命、活动能力与运动行为、身体形态与爬行轨迹几何特征，以及随时间推移对个体动物中转基因表达的荧光生物标志物的检测。该微培养板系统适用于通过人工评分或图像采集结合下游成像分析来进行寿命分析。与在培养皿上的标准培养方法21类似，可通过刺激后是否产生运动（例如轻敲培养皿或暴露于蓝光）来人工判断线虫的存活或死亡状态。对于基于图像的寿命分析，可通过比较施加刺激后连续图像帧之间的差异，确定每条线虫何时停止运动。该方法可与自动化的图像采集和分析系统兼容，并能提供额外数据，即每个时间点个体动物的活动水平。这些信息不仅可用于估算寿命（运动停止），还可用于评估健康寿命（活动水平下降至某一阈值；目前已有多种定义被提出）。此外，还可从这些图像中测量其他参数（如体型、形态和姿势）。
该微型培养板系统的特征包括：（1）能够长期追踪单个动物的个体变化；（2）培养系统与厌恶性干预措施（如饮食限制或化学应激剂）具有良好的兼容性；（3）能够在培养环境中直接测量荧光信号。为展示这些特性，我们将线虫暴露于2...

本文介绍了一种在固体培养基上培养单个分离线虫并对其进行终生生理参数监测和荧光定量的实验方案。该培养系统在单虫培养孔周围设置棕榈酸屏障，以防止线虫逃逸，从而允许使用具有厌恶性干预条件，包括致病菌和化学应激物。

秀丽隐杆线虫被广泛用于研究衰老生物学。在秀丽隐杆线虫衰老研究中的标准做法是将群体线虫培养在固体培养基上……

尽管存在其他固体培养方法，但这是首个能够在同一系统中实现对个体动物寿命和健康寿命进行自动化纵向追踪，并对荧光生物标志物进行纵向成像的固体培养体系。该方案所得结果与标准的秀丽隐杆线虫（C. elegans）在固体NGM培养基上的实验结果具有可比性，且兼容有害干预措施和直接的活体荧光成像。该系统对于衰老研究具有重要价值，尤其适用于长期暴露于环境应激因子以及在较长时间内观察基因和蛋白质动态变化的研究。避免污染以及确保各孔板干燥均匀均具有挑战性。我们在书面方案中强调了关键步骤，以尽量减少这些问题。首先，用研钵和研杵研磨 500 毫克固体棕榈酸。将它与15毫升TWEEN 20加入50毫升锥形管中，通过涡旋混合以溶解晶体。加入17.5毫升100%乙醇，并涡旋溶液以尽可能溶解棕榈酸。然后加入17.5毫升超纯水，剧烈涡旋。将溶液置于80摄氏度的珠浴中轻轻加热，直至棕榈酸完全溶解。将珠浴重新加热至80摄氏度。使用前立即取一毫升棕榈酸工作溶液分装至各微孔板，并在加热前每毫升棕榈酸溶液中加入四微升制霉菌素。现在用乙醇将Microtray内外喷至饱和，然后甩去多余的乙醇。为对Microtray进行灭菌，将板和盖分别放入紫外交联仪中。20分钟后，翻转板和盖。接下来，将装有棕榈酸工作液的15毫升锥形瓶放入珠浴中，待所有可见晶体完全溶解后再使用。将Microtray盖上盖子后置于珠浴周围的台面上预热两分钟。打开Microtray盖子，沿Microtray后壁缓慢加入200微升棕榈酸工作液。盖上盖子，将Microtray置于珠浴中静置两到三分钟，使棕榈酸溶液在Microtray底部均匀分布。将Microtray旋转180度，然后按照之前的方法加入棕榈酸工作液。通过加入文中所述组分，制备lmNGM。然后将20 µL lmNGM加入到放置在实验台上的每个Microtray中。在重新装填移液器时，务必盖好Microtray以尽量减少污染。为了在Microtray孔中接种细菌食物，将过夜培养的菌液在3,500 ×g下离心20分钟。吸除上清液，然后用85毫摩尔氯化钠溶液将细菌培养物重悬，使其浓度提高十倍。接着，用移液器小心地将5微升十倍浓缩的细菌培养物滴加到每个孔的lmNGM表面。注意避免细菌培养物沿孔壁流下并进入棕榈酸中，否则会吸引线虫离开孔。 将无菌的3D打印插件放入无菌单孔板中。将Microtray放入单孔板内的3D打印适配器中。在Microtray外圈孔与单孔板内壁之间的3D打印插件上方，充分撒布水凝胶晶体。如果无法立即添加线虫，请密封微孔板以备次日使用。关闭微孔板盖子，并用一片封口膜包裹四周以密封微孔板。重复此封口步骤两次，共包裹三层封口膜。当线虫达到所需的生活阶段后，每孔加入一条虫。向单孔板的盖子中加入40微升去污剂溶液，并用擦拭纸均匀涂布盖子表面。使用额外的擦拭纸进一步铺展去污剂溶液，直至透过盖子观察时无视觉畸变。轻轻拉伸第一片Parafilm，以覆盖托盘的两个侧面。用擦拭纸擦拭托盘顶部，并用70%乙醇润湿，以去除任何指纹。通过轻敲培养皿的侧面或顶部，或在培养皿上照射明亮的蓝光，观察每只动物，从而测定其寿命。若动物在数秒内无任何移动，则记为死亡。每隔一至三天重复此操作，直至所有线虫均死亡。对单个孔进行荧光成像。暴露于硫酸铜和二硫苏糖醇显著缩短了线虫的寿命和健康期。相比之下，硫酸铜降低了个体处于良好健康状态的生命比例，而二硫苏糖醇则无此效应。在所有年龄组中，硫酸铜对群体内个体平均活动能力的抑制作用均强于二硫苏糖醇。个体动物终生活动曲线下面积的人群平均值在硫酸铜或二硫苏糖醇处理下显著受损。对于经二硫苏糖醇处理的动物，个体在第10天之前的累积活动量与其寿命相关，但在未处理的对照组或硫酸铜处理的动物中则无此相关性。在成年后的第3至第8天之间，KYNU-1的表达显著升高，此后随着年龄增长逐渐下降。 成年期第14天累积的KYNU-1 mScarlet表达水平与动物寿命相关。由于KYNU-1的表达在整个生命周期中具有动态变化，我们比较了不同年龄阶段KYNU-1的表达水平与个体动物总体生存率的关系。在任何一个单一时间点，KYNU-1的表达水平均未与生存率呈现显著相关性。进行该实验操作时，最关键的步骤包括棕榈酸的添加、琼脂的移液以及线虫的接种。该技术可实现对个体线虫寿命和健康寿命的纵向追踪，同时还能检测荧光生物标志物，其结果可直接与NGM实验结果进行比较。

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科研

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Biology

生物学

在固体培养基上长期培养单个 秀丽隐杆线虫 ，用于纵向荧光监测和厌恶干预

本文介绍了一种在固体培养基上以紫外线灭活的细菌作为食物来源饲养线虫时，测定其寿命的通用实验方案。...

测量 秀丽隐杆线虫 固体培养基上的寿命测定

本文描述了一种基于液体培养和分配表达荧光报告蛋白的C. elegans菌株的方法，该方法无需昂贵的分选设备。该策略可应用于多种可诱导的C.

使用荧光标记的 C. elegans 菌株进行高通量筛选与生物传感

在不固定动物的情况下，对行为和神经活动进行长时间尺度的成像，是理解行为的前提。琼脂糖微流控腔成像（AMI）可用于对秀丽隐杆线虫（Caenorhabditis...

用于长期钙成像的琼脂糖微室培养秀丽隐杆线虫 Caenorhabditis elegans

本文详细描述了专门用于监测线虫秀丽隐杆线虫（Caenorhabditis...

表征线虫胚胎伸长的新指标 秀丽隐杆线虫

本文中，我们介绍线虫Caenorhabditis...

秀丽隐杆线虫——一种多功能的模式生物 体内 研究宿主-微生物相互作用的模型

本方案描述了使用基因编码的Ca2+探针记录自由活动的Caenorhabditis...

行为动物中单个神经元的比率钙成像 秀丽隐杆线虫

本文中，我们利用一种定制的微流控装置，对单个线虫进行活体成像。在该装置中，多条线虫被分别限制在独立的腔室中，从而实现对多种生物学过程的多重化、长期监测。...

用于纵向成像的微流控平台 秀丽隐杆线虫

动态微管成像方案 体内 使用荧光标记的末端结合蛋白对秀丽隐杆线虫后侧微管（PLM）神经元中动态微管进行标记、成像和分析的方法已得到描述。 秀丽隐杆线虫.

秀丽隐杆线虫神经元中微管动态与取向的活体评估

本方案描述了一种简单的微流控芯片设计及微加工方法，可用于在持续供应食物的条件下培养秀丽隐杆线虫（C.

一种用于长期培养与成像的简易微流控芯片 秀丽隐杆线虫

肠道微生物可能对宿主的健康产生正面或负面的影响 通过 特异性或保守性机制 秀丽隐杆线虫 是一种用于筛选此类微生物的便捷平台。本实验方案描述了对48种细菌分离株进行高通量筛选，以评估其对线虫应激抗性的影响，该指标被用作线虫健康状况的替代参数。...

高通量筛选影响微生物分离物 秀丽隐杆线虫 健康

本文展示了一种在微加工多孔装置中的固体培养基上培养分离的单个线虫的优化方案。该方法可对单个动物整个生命周期内的多种与衰老和健康相关的表型进行监测，包括活动性、体型与形态、运动轨迹以及存活情况。...

在多孔板装置中对分离的 Caenorhabditis elegans 进行长期培养与监测

了解在固体培养基上长期培养秀丽隐杆线虫的方法，用于纵向荧光监测和寿命健康跨度追踪。该方案支持厌恶干预与基因动态研究，为衰老研究提供可靠工具。

长期培养个体细胞秀丽隐杆线虫在固体培养基上进行纵向荧光监测和厌恶干预

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