吡虫啉在小麦中吸收、易位和分布的测定

这种方法有助于回答吡虫啉如何在小麦中被吸收、运输和分布。该技术的主要优点是吡虫啉检测灵敏度高，可广泛用于测定土壤、水、植物和其他样品中的吡虫啉。要使小麦种子发芽，请选择1000个合适的种子，这些种子具有完整的颗粒，完整的胚胎和均匀的大小。

将种子浸入10%过氧化氢溶液中15分钟，对其表面进行消毒。然后用无菌水冲洗种子五次，每次 10 秒钟。现在，将小麦种子均匀地铺开，将胚胎指向装有潮湿无菌滤纸的玻璃培养皿中。

将培养皿置于保持30摄氏度和80%相对湿度的人工气候培养箱中。将小麦种子在黑暗中培养三天，直到它们发芽并生根。小麦种子发芽后，将15棵小麦幼苗放入含有100毫升半Hoaglands营养液的水培装置中。

然后，将整个水培装置置于25摄氏度和80%相对湿度的人工气候培养箱中七天。为了设置两种不同吡虫啉浓度的农药暴露实验，请准备含有半霍格兰兹营养液的水培装置，每升0.5毫克或每升吡虫啉5毫克。为每个吡虫啉浓度组设置15个水培装置，以确保取样过程中有足够的样品。

现在，将15株小麦植物移植到每个准备好的水培装置中，这些植物在为期七天的水培期中。将整个水培装置置于人工气候培养箱中，在25摄氏度和80%相对湿度下放置三天。在整个吡虫啉暴露期间，每天从植物中收集根和叶。

对于每种吡虫啉浓度，将来自15个水培装置中每五分之一的小麦样品整合为平行组。要从小麦根中提取吡虫啉，请用剪刀将小麦根切成大约一厘米的碎片。称取10克切碎的小麦根，并将它们放入50毫升离心管中。

然后，向离心管中加入10毫升乙酰腈，并涡旋管中一分钟，然后向管中加入4克无水硫酸镁和1.5克氯化钠。立即涡旋管30秒。接下来，将试管以6， 000 G离心五分钟。

用一次性注射器吸出上清液并将其通过0.22微米注射器过滤器以获得样品。要从小麦叶中提取吡虫啉，请用剪刀将新鲜叶子切成约一厘米的碎片。称取10克切碎的小麦叶，并将它们放入50毫升离心管中。

在50毫升离心管中将10毫升乙腈加入10克切碎的小麦叶中，涡旋一分钟。然后用无水硫酸镁和氯化钠处理混合物，并如前所述离心。为了去除样品中的色素沉着和水分，取离心后获得的两毫升上清液，并将其添加到含有石墨化炭黑和无水硫酸镁的五毫升离心管中。

涡旋混合30秒后，将管以6， 000G离心5分钟，然后用一次性注射器吸出上清液并将其通过0.22微米注射器过滤器以获得样品。如手稿中所述，使用液相色谱串联质谱法定量小麦样品中吡虫啉的量。小麦样品吡虫啉回收率表明，暴露于每升吡虫啉0.5毫克或更低的小麦根叶平均吡虫啉回收率高于暴露于每升吡虫啉5毫克的样品的平均回收率。

即使在暴露一天后，在小麦植株的根部和叶子中也检测到吡虫啉，表明其在植物中的快速吸收和电导。暴露第3天吡虫啉含量高于第1天，根部吡虫啉浓度始终高于叶片。与对照组相比，即使在暴露于吡虫啉的植物中暴露于吡虫啉三天后，也没有观察到植物生长的明显抑制。

处理样品中根系浓度因子（RCF）大于1，表明小麦对吡虫啉具有富集作用。然而，叶片的易位因子（TF）小于1，表明农药不易从小麦根部转移到叶片上。最重要的步骤是吡虫啉的提取和纯化。

确保在这些步骤中无损失地提取吡虫啉。