在大鼠模型中通过结扎和脂多糖注射的组合 诱导 牙周炎

这是实验性牙周炎的大鼠模型，基于脂多糖注射结合结扎放置的技术，为研究疾病进展和评估牙周炎的治疗提供了一种有效的方法。将这两种技术与单独的方法相结合，最终导致快速疾病诱导，放大破坏性炎症反应并增加结缔组织的损失和肺泡骨吸收。这种方法为评估牙周炎治疗的影响提供了宝贵的机会。

演示该程序将是Dr.Oscar Villa博士，博士首先在手术前对所有手术器械进行消毒。通过将 1.6 毫升氯胺酮与 1 毫升甲苯噻嗪混合，用 PBS 或盐水稀释，制备氯胺酮和甲苯噻嗪的混合物，并将原液储存在 4 摄氏度。

将阿替美唑稀释至终浓度为每毫升0.25毫克，丁丙诺啡稀释至终浓度为每毫升0.03毫克/毫升，并将原液储存在4摄氏度。在无菌盐水中准备一毫升PG-LPS，并将原液储存在零下20摄氏度。使用雌性和雄性Wistar大鼠进行实验。

将动物分组饲养在适当的环境中，随意提供食物和标准水。大鼠麻醉后，将动物仰卧在加热的手术平台上。在手术过程中覆盖动物的身体以防止热量散失。

使用小鼻锥给予 100% 氧气，并通过脉搏血氧饱和度监测脉搏率和血氧饱和度。现在，在门牙周围使用铝制嘴塞打开大鼠嘴。用它收回舌头，将上颌骨和下颌骨稳定在开放、舒适的工作位置，以便进入下颌磨牙。

使用总共四个30号吸收纸点收集GCF，将其插入M1中腭周围的牙龈缝隙中，直到轻微阻力。将纸点保持在同一位置 30 秒，然后立即取出。收集后，立即将纸点转移到塑料小瓶中，并储存在零下80摄氏度直至测定性能。

将缝合线的远端尾部放在牙列的腭侧，并将近端段插入 M1 和第二上颌磨牙的接触之间。使用骨膜显微外科电梯将缝合线插入沟内。非常小心地将结扎线包裹在M1的颊表面，因为该水平的组织呈现出狭窄的附着牙龈区域。

确保缝合线两端收紧，以打入牙龈沟。接下来，用外科医生的结绑住缝合线的末端，并将尾巴修剪得尽可能短。将结插入沟中。

结扎定位后，将40微升PG-LPS在无菌盐水中双侧注射到M1中腭侧的龈下组织中。为了检查和调整结扎，将麻醉的动物放在其背上，并在手术过程中使用一个小鼻锥，用1%异氟醚和100%氧气维持动物麻醉。使用门牙周围的铝制口塞打开包裹口，用舌头缩回舌头，并将上颌骨和下颌骨稳定在开放、舒适的工作位置，以便能够结扎。

在骨膜显微外科电梯的帮助下收紧牙龈上的结扎，并确保插入结扎线，在牙龈周围产生炎症。结扎调整后，双侧将40微升PG-LPS注射到M1中腭侧的龈下组织中，如前所述。在第14天牺牲动物后，如前所示收集GCF。

立即将纸点转移到塑料小瓶中，并在零下80摄氏度下储存，直到测定性能。上颌磨牙牙槽骨的二维图像显示，在建立牙周炎后，基底对照的骨体积更大，肺泡骨质流失更高。矢状图像分析显示，与基础对照组相比，牙周炎建立后M1和M2的根间骨区域的肺泡骨质流失更显着。

处死后，不同组间M1的上颚表现为牙龈萎缩。与基础对照组相比，牙周炎组显示出更显着的顶端牙龈迁移和上颌磨牙周围的牙龈炎症。此外，牙周炎组显示GCF的促炎细胞因子1L-1β的释放明显高于对照组。

该程序的关键步骤是在沟中正确放置缝合线和结，正确调整结扎以及在14天方案中准确注射脂多糖。