2023年1月13日
本方案逐步演示了如何从小鼠中提取下颌第一磨牙,为专注于颌骨愈合与再生研究的研究人员提供了一种替代方法。
本方案提供了一种小鼠下颌磨牙拔除模型,该模型在现有的骨再生研究中鲜有报道。建立小鼠下颌磨牙拔除模型是必要的,因为下颌骨在不同干预组之间具有更高的可比性和一致性。该技术的意义并不涉及任何疾病的治疗应用。
然而,通过帮助研究人员审视这一过程背后的机制,该技术可能在长期范围内促进临床愈合和下颌骨再生。该技术的开发旨在支持相关研究,揭示现有愈合与再生的机制。遗憾的是,该方法无法应用于其他系统。
用镊子从内侧夹住磨牙,开始消除麻醉小鼠的远中阻力。然后将23号针头强行插入远中根的颊侧牙槽骨并形成间隙。接着更换为25号针头,继续扩大间隙。
缓慢旋转针头并向根尖方向及舌侧推进,轻柔地接近根尖区,以将牙根从牙槽窝中推出。为消除近中阻力,将一支23号针头插入牙根分叉处,向上抬升磨牙。在牢固固定磨牙后,取另一支23号针头,将其用力插入舌侧近中牙周膜,以形成间隙。
然后使用25号针头,缓慢向前方和颊侧旋转。如果存在某些深层阻碍导致磨牙脱位困难,可使用26号针头刺入牙根尖端,并重复操作。在最终拔除时,应确保牙冠上升至咬合平面以上,并能清晰看到两根完整的牙根被完整拔出。
成功拔除下颌第一磨牙后,使用干棉球压迫止血,复位舌头,给予镇痛处理,并将小鼠置于恒温加热垫上,直至其从麻醉状态恢复。拔牙后,牙槽窝立即被血凝块充满。随后对牙槽窝的愈合过程进行为期一周的观察。
形成了一些类似海绵的松质骨,但血凝块仍然存在。在愈合过程中,两周后牙槽内被海绵状骨组织填充,表明再生过程已完成。成骨细胞分化的一个主调控因子 Sp7 在骨髓细胞中广泛表达,这些细胞位于骨形成前沿的边缘区域。
在稳态条件下,骨小梁结构连续且致密,骨髓细胞团块如岛屿般散在分布。术后一周,大量表达 Sp7 的细胞填充拔牙创口,周围散布着新形成的骨小梁。术后四周,情况发生逆转,骨小梁大面积融合,形成以骨小梁为主的结构。
表达 Sp7 的细胞活性下降至接近稳态水平。该技术还可用于演示新生再生过程。通过提供一种新的小鼠模型,该技术可帮助研究人员揭示现有愈合与再生过程的潜在机制。
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本方案介绍了一种从小鼠中提取下颌第一磨牙的详细方法,提供了一种研究颌骨愈合与再生的新型小鼠模型。该研究探讨了拔牙后的愈合过程以及骨再生过程中涉及的细胞机制。
小鼠下颌磨牙拔除牙槽愈合模型为研究牙槽骨再生和膜内成骨提供了一个标准化的体内平台。该模型可用于骨愈合通路的机制性风险评估和靶点验证,支持骨骼组织再生领域的早期发现与转化研究。其可重复性和生物学相关性有助于在临床前牙科及颅面研发项目中做出基于风险评估的推进决策。
该模型位于早期发现与临床前验证的交汇点,能够在骨再生工作流程中实现假设验证和机制研究。